Прижизненная флуоресцентная микроскопия для изучения микрососудистого тромбообразования

Прижизненная флуоресцентная микроскопия полезна для изучения фототоксической индукции образования тромба — тромба — в месте микрососудистого повреждения.

Начните с приема обезболенной безволосой мыши, которой вводят фототоксичный полисахарид, меченный фторофорами. Поместите мышь в положение лежа на нагревательную платформу, чтобы поддерживать физиологическую температуру для правильного кровообращения.

Поместите апикальную часть уха под прижизненный флуоресцентный микроскоп. При возбуждении светом флуорофор излучает флуоресценцию, что позволяет контролировать микрососудистый кровоток. Увеличьте интенсивность света, чтобы вызвать образование тромбов.

Флуорофор поглощает свет высокой интенсивности и вступает в реакцию с молекулярным кислородом с образованием активных форм кислорода. Эти молекулы вызывают окислительный стресс в эндотелиальных клетках, что приводит к повреждению клеток и обнажению субэндотелиального матрикса.

Поврежденные клетки высвобождают тромботические медиаторы, которые соединяют обнаженный коллаген в субэндотелиальном матриксе и циркулирующие тромбоциты, которые связываются с медиаторами через специфические рецепторы.

Связывание активирует тромбоциты, вызывая высв