Оценка химически индуцированного колита с помощью иммуногистохимического анализа срезов ткани толстой кишки

У мышей слой слизистой оболочки толстой кишки состоит из иммунных клеток, содержащих собственную пластинку, окруженную плотно упакованным эпителием, защищающим слизистую оболочку. Химическая обработка сульфатом натрия декстрана разрушает плотные соединения, вызывая повреждение эпителиальных клеток и позволяя микробам просвета проникать в собственную пластинку.

Микробное распознавание в толстой кишке запускает секрецию хемокинов, что приводит к инфильтрации иммунных клеток и высвобождению провоспалительных цитокинов. Этот преувеличенный иммунный ответ приводит к воспалению толстой кишки или колиту.

Чтобы оценить химический колит, начните со предметного стекла с фиксированным, предварительно обработанным участком ткани толстой кишки мыши, демонстрирующим химически индуцированный колит. Обработайте секцию коктейлем первичных антител, специфичных к рецепторам иммунных клеток, которые связываются с соответствующими иммунными клетками.

Промойте, чтобы удалить несвязанные антитела. Инкубируйте участок ткани с биотинилированными вторичными антителами, которые специфически связываются с первичными антителами. Инкубируются со стрептавидин-ферментными конъюгатами, которые взаимодействуют с би