Иммунный ответ

Это видео демонстрирует визуализацию in vivo для изучения динамики набора нейтрофилов в месте инфекции у иммунокомпрометированной, трансгенной мыши с нейтрофилами, экспрессирующими GFP. Он включает в себя инъекцию люминесцентных бактерий, чтобы вызвать инфекцию. Это приводит к набору нейтрофилов в очаг инфекции, отслеживание которого осуществляется с помощью визуализации.

В этом видео мы демонстрируем активацию макрофагов, полученных из костного мозга, в ответ на бактериальный липополисахарид и внутривенное введение иммуноглобулина.

Это видео демонстрирует активацию перитонеальных макрофагов мыши с помощью внутривенного иммуноглобулина и бактериального липополисахарида. Костимуляция активирует перитонеальные макрофаги в противовоспалительные макрофаги, обладающие иммунной регуляторной активностью.

Это видео демонстрирует технику ex vivo для индуцирования гибели клеток мозга, опосредованную цитотоксическими CD8+ Т-клетками. После получения срезов мозга активированные CD8+ Т-клетки, направленные на олигодендроциты, переносятся на срезы для нацеливания на миелиновую оболочку и олигодендроциты. После инкубации повреждение миелина и гибель нейронов могут быть оценены гистологически в интересующих областях.

В этом видео мы описываем протокол проверки эффективности бесклеточной коклюшной вакцины против коклюшной инфекции Bordetella у мышей. После вакцинации мышей подвергали инфекции, и их тканевый гомогенат культивировали для анализа колоний бактерий в качестве показателя защитного иммунитета, вызванного вакциной.

В этом видео мы описываем метод изучения динамики органелл в В-лимфоцитах после их активации микрогранулами, покрытыми антигеном.

Это видео демонстрирует активацию В-клеток in vitro. Процесс включает в себя взаимодействие антигена с рецепторами В-клеток, что приводит к ремоделированию цитоскелета, образованию иммунных синапсов, движению лизосом, интернализации антигена, обработке и последующей презентации на молекулах MHC для активации В-клеток.

Это видео демонстрирует технику создания мышиной модели колита — воспалительного заболевания кишечника, вызванной химическими веществами. Мышь может потреблять раствор сульфата натрия декстрана (DSS) в течение достаточного времени. При употреблении DSS повреждает барьер слизи и эпителиального слоя в толстой кишке, позволяя кишечным микробам проникать в подлежащие ткани, где они воспринимаются резидентными иммунными клетками для опосредования чрезмерного иммунного ответа, что приводит к...

В этом видео мы демонстрируем влияние различных концентраций антител против c-fms на остеокластогенез, который представляет собой процесс образования остеокластов из предшественников остеокластов.

Это видео демонстрирует количественную оценку медиаторов воспаления во время инфекции путем инкубации иммунных клеток, полученных из легочной ткани человека, с Haemophilus influenzae. Проточная цитометрия используется для измерения флуоресценции цитокинов в меченых лимфоцитах, коррелируя с продукцией провоспалительных цитокинов в ответ на бактериальную инфекцию.

В этом видео мы демонстрируем анализ хемилюминесценции in vitro для обнаружения генерации активных форм кислорода нейтрофилами при воздействии опсонизированной бактериальной биопленки.

Это видео демонстрирует анализ in vitro для изучения взаимодействия нейтрофилов и биопленки. Патогенные бактерии, встроенные в биопленку, и выделенные нейтрофилы были помечены с помощью флуоресцентных меток, а иммунный ответ нейтрофилов и уклонение бактерий от иммунного ответа оценивались с помощью флуоресцентного микроскопа.

Это видео демонстрирует метод обнаружения активации инфламмасомы NLRP3 в макрофагах с помощью флуоресцентных репортерных зондов. Клетки обрабатываются ионофорами калия и глицином, чтобы индуцировать сборку инфламмасом и активацию каспазы-1. Флуоресцентные репортерные зонды визуализируют активированную каспазу-1, а клетки окрашиваются флуоресцентным красителем для визуализации ядер.

Это видео демонстрирует метод изучения образования инфламмасомы, содержащей пириновый домен 3 (NLRP3) в первичных макрофагах с помощью иммунофлуоресценции. Макрофаги сначала подвергаются воздействию бактериального липополисахарида (ЛПС) для повышения экспрессии белка NLRP3. Воздействие на макрофаги нигерицина — ионофора калия — приводит к активации NLRP3 и образованию инфламмасом, которые визуализируются с помощью иммунофлуоресценции.

Это видео демонстрирует анализ лактатдегидрогеназы для обнаружения опосредованной инфламмасомами гибели макрофагов. Макрофаги подвергаются воздействию липополисахарида для прайминга, а затем воздействию нигерицина, вызывающего гибель клеток, вызванную инфламмасомами, которая определяется с помощью анализа лактатдегидрогеназы.

Это видео демонстрирует индукцию и визуализацию внеклеточных ловушек нейтрофилов или НЭО в предварительно меченых нейтрофилах с использованием сыворотки пациента, содержащей антинейтрофильные цитоплазматические антитела. Кроме того, использование непроницаемого красителя ДНК и флуоресцентной микроскопии позволяет визуализировать НВЛ.

Это видео демонстрирует выделение липидов из нейтрофилов человека с помощью двухфазной системы растворителей с использованием метанола и хлороформа.

В этом видео мы демонстрируем анализ цитотоксичности для оценки инфекции Cryptococcus neoformans, патогенного грибка, в макрофагах. Цитотоксичность определяется высвобождением фермента цитоплазматической лактатдегидрогеназы в результате лизиса макрофагов, вызванного инфекцией Cryptococcus neoformans.

Это видео демонстрирует систему заражения на основе проницаемой мембранной вставки для оценки воздействия секретируемых бактериальных токсинов. Исключая прямой контакт между бактериальным патогеном и клетками-хозяевами с помощью проницаемой мембраны, этот метод позволяет изучать влияние токсинов, выделяемых патогенными бактериями, на клетки млекопитающих-хозяев.

Это видео демонстрирует систему проницаемых мембранных вставок для исследования воздействия бактериальных токсинов на клетки хозяина контролируемым и изолированным образом. Этот подход позволяет селективно подвергать клетки воздействию токсинов, сохраняя при этом физическое разделение, которое имитирует естественное взаимодействие хозяина и патогена.

Это видео демонстрирует анализ приверженности бактерий к культуре эпителиальных клеток, помеченный GFP, для изучения динамики взаимодействий хозяина и патогена с помощью визуализации на основе флуоресцентной микроскопии.

Это видео демонстрирует метод обнаружения локального и глобального ответа ионов кальция на шигеллу-инфекцию эпителиальных клеток человека. Шигелла проникает в клетки-хозяева и высвобождает эффекторы инвазии, влияя на внутриклеточный уровень кальция. Амплитуда и частота локального и глобального цитозольного кальция изучаются с помощью флуоресцентного индикатора.

В этом видео анализируется образование иммунных синапсов между Т-клетками в неочищенных пан-лейкоцитарных препаратах и энтеротоксином Staphylococcus aureus B, загруженными клетками Raji с SEB. Обогащение CD3 и F-актином наблюдается в иммунном синапсе с помощью визуализационной проточной цитометрии.

Это видео демонстрирует анализ для изучения регуляции фагоцитоза макрофагов мезенхимальными стволовыми клетками (МСК) в ко-культуре. При совместном культивировании МСК с макрофагами добавляются неопсонизированные частицы зимозана, конъюгированные с pH-чувствительным флуорофором, для фагоцитирования макрофагами. С увеличением фагоцитоза интенсивность флуоресценции повышается, что позволяет определить МСК-опосредованную регуляцию фагоцитарной активности.

В этом видео мы демонстрируем интрацистернальную доставку Neisseria meningitidis в мышиную модель для генерации инфекции менингита.

В этом видео мы описываем метод идентификации низкомолекулярных ингибиторов киназы, которые модулируют апоптоз самореактивных CD4+CD8+ двойных положительных незрелых тимоцитов. Апоптоз индуцируется в двуположительных тимоцитах путем их активации магнитными шариками, покрытыми анти-CD3- и анти-CD28-покрытием; Затем следует лечение низкомолекулярными ингибиторами и анализ проточной цитометрии для определения того, модулируют ли ингибиторы экспрессию маркера апоптоза.

В этом видео мы описываем процедуру выполнения нано-инъекции одноцепочечного РНК-вируса положительного смысла взрослым самцам дрозофилы и последующем изучаем противовирусные реакции, инициированные инфекцией. Анализ полимеразной цепной реакции выявляет активацию специфических генов у инфицированных мух, что указывает на активацию путей иммунного ответа, включая РНК-интерференцию и передачу сигналов JAK/STAT.

Это видео демонстрирует метод окрашивания гематоксилином и эозином (H&E) для оценки повреждения толстой кишки на мышиной модели DSS-индуцированного колита — воспалительного заболевания кишечника. После выделения толстой кишки у мыши, обработанной DSS, и получения участков ткани, окрашивание участков H&E помогает выявить повреждение тканей, опосредованное воспалением.

В этом видео мы описываем методологию создания системы культивирования кишечных органов ex vivo для изучения взаимодействий между фрагментами кишечной ткани мыши и специфическими кишечными бактериями. Устройство состоит из двух пар входных-выходных портов, первый из которых соединяет просвет кишечной ткани и подает в него специфическую бактериальную суспензию, а второй непрерывно подает среду в лунки устройства для поддержания жизнеспособности тканей ex vivo.

Это видео демонстрирует метод in vitro для изучения влияния антимикробной обработки на агрегаты Pseudomonas aeruginosa (Pa). Флуоресцентно меченые Па-клетки выращиваются в виде агрегатов, имитируя характер роста во время инфекции. При воздействии на агрегаты сублетальной концентрацией антибиотика колистина оценка взаимодействия бактерий и антибиотиков в режиме реального времени проводится с помощью флуоресцентной микроскопии.

Это видео демонстрирует метод количественного определения in vitro для определения инфекции макрофагов Listeria monocytogenes с помощью анализа колониеобразующих единиц. Колонии бактерий на агаровой пластине представляют собой внутриклеточную бактериальную популяцию, которая избегает защитного механизма хозяина и выживает в макрофагах.

В этом видео мы количественно оцениваем внутриклеточные и внеклеточные Listeria monocytogenes, внутриклеточные патогенные бактерии, после их инфицирования культивируемых макрофагов in vitro с помощью проточной цитометрии.

Это видео демонстрирует нано-инъекцию бактериальной суспензии в полость тела мухи, что приводит к размножению бактерий и инфекции. Иммунный ответ мухи уничтожает некоторые бактерии, в то время как другие избегают иммунного клиренса и выживают внутри хозяина, вызывая инфекцию.

Это видео демонстрирует технику заражения дрозофилы путем введения патогенной бактерии непосредственно в полость ее тела. Этот метод обходит эпителиальные барьеры и другие пассивные защитные механизмы, позволяя индуцировать системную инфекцию. После заражения полученный иммунный ответ оценивается путем мониторинга смертности мух и проведения последующих анализов.

В этом видео мы демонстрируем метод измерения бактериальной нагрузки E. coli после введения E. coli в грудную клетку Drosophila melanogaster.

В этом видео мы демонстрируем анализ цитопатического эффекта для определения инфицирующей дозы вируса Drosophila C в тканевой культуре на клетках Drosophila S2*. Для инфицирования культивируемых клеток используются различные концентрации вируса. Определена доля клеток, проявляющих структурные изменения, и эти данные используются для расчета инфекционной дозы культуры тканей.

Это видео демонстрирует метод индуцирования воспаления глазной поверхности и дисфункции мейбомиевой железы на мышиной модели. Стимуляция иммунной системы мыши с помощью иммуногена и последующая рестимуляция тем же иммуногеном способствует воспалению глазной поверхности, что вызывает закупорку секреции мейбомиевых желез через аггНЭО, продуцируемые нейтрофилами, и приводит к синдрому сухого глаза.

Это видео демонстрирует активацию белков каспазы в макрофагах человека с использованием бимолекулярных белков-репортеров комплементации флуоресценции. Продомены каспазы-1 слиты с нефлуоресцентными фрагментами венерианских белков, которые рекрутируются в инфламмасомные комплексы. Близость инфламмасом индуцирует рефолдинг и флуоресценцию фрагментов Венеры, подтверждая активацию каспаз в макрофагах.

Это видео демонстрирует влияние препаратов табачных изделий, ТПП, на выработку цитокинов из мононуклеарных клеток периферической крови человека с помощью проточной цитометрии. Лечение клеток ТТП снижает выработку провоспалительных цитокинов, что оценивается после стимуляции липополисахаридами с последующим иммуноокрашиванием и анализом проточной цитометрии.

В этом видео мы демонстрируем получение биопленки in vitro с помощью S. aureus в многолуночном планшете, покрытом поли-L-лизином. Планшет, сформированный из биопленки, может быть использован для последующих экспериментов.

Это видео демонстрирует метод in vitro для стимуляции лимфоцитов с помощью нетипируемого Haemophilus influenzae (NTHi) и оценки иммунного ответа. Инкубация изолированных мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) с NTHi заставляет бактериальные клетки стимулировать Т-лимфоциты, что приводит к выработке цитокинов. После ингибирования секреции цитокинов проводят иммунофлуоресцентное окрашивание с целью выявления накопленных внутриклеточных цитокинов в стимулированных Т-лимфоцитах.

Это видео демонстрирует оценку химически индуцированного колита с помощью иммуногистохимического окрашивания ткани толстой кишки мыши. В срезе окрашенной ткани наличие большого количества иммуночувствительных клеток в поврежденной ткани представляет собой инфильтрацию иммунных клеток во время колита.

В этом видео мы изучаем влияние целой дымовой среды, горючего препарата табачного изделия, на уничтожение клеток K562 эффекторными мононуклеарами периферической крови.

Это видео демонстрирует метод in vivo для оценки тестового антигена путем индуцирования воспаления кожи на мышиной модели. Тестируемый антиген — гаптен в растворе масла/ацетона — местно наносится на кожу уха мыши, и воспаление кожи оценивается через соответствующий период.

Это видео демонстрирует процедуру пункционной биопсии для создания точной раны в модели мыши. При иссечении обнажается подкожный слой кожи, обеспечивая подходящее место для изучения иммунных реакций на локализованную патогенную инфекцию.