Определение роли витронектина в устойчивости бактерий к бактерицидной активности сыворотки крови человека

0 просмотров2:55 мин • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Исследовать влияние витронектина — сывороточного гликопротеина человека, на бактерии начинают с пробирок, содержащих суспензию Haemophilus influenzae.

Обработайте одну пробирку нормальной человеческой сывороткой, содержащей витронектин, а другую – сывороткой, обедненной витронектином. Оба варианта сыворотки содержат антитела и различные белки комплемента, необходимые для бактерицидной активности.

Во время инкубации антитела взаимодействуют с бактериальными поверхностными белками, активируя белки комплемента с образованием С5-конвертазы, которая расщепляет С5. C5b связывается с C6, за ним следует C7, образуя комплекс C5b6-7. Этот комплекс связывается с клеточной мембраной бактерии и рекрутирует C8, образуя C5b67-8.

Этот процесс способствует присоединению мономеров C9 и их полимеризации, образуя комплекс атаки мембраны — порообразующую структуру. Эти поры вызывают приток ионов и воды, что приводит к лизису бактерий.

Напротив, в пробирке с нормальной сывороткой витронектин связывается с бактериальным поверхностным белком, который взаимодействует с комплексом C5b6-7 и мономерами C9. Эти взаимодействия предотвращают рекрутирование С8 и полимеризацию С9, ингибируя образование комплекса мембранных атак и приводя к выживанию бактерий.

Возьмите бактериальную суспензию из пробирок и культуру на отдельных агаровых планшетах.

Высшие колонии бактерий в сыворотке, содержащей витронектин, подтверждают его роль в устойчивости бактерий к бактерицидной активности сыворотки крови человека.

Чтобы выполнить анализ витронектин-зависимой резистентности к бактерицидной активности сыворотки крови человека, сначала культивируют и гранулируют бактерии, как описано в текстовом протоколе. После центрифугирования суспендируйте бактериальную гранулу с 1 объемом желатинового буфера декстрозы. Теперь добавьте 1500 КОЕ бактерий к 100 микролитрам DGVB++, содержащему 5% сыворотки.

Инкубируйте образец при температуре 37 градусов Цельсия в течение 15 минут с встряхиванием при 300 об/мин. Удалите 10-микролитровую аликвоту из реакционной смеси через 0 минут и 15 минут. Выложите аликвоту на шоколадный агар и выдержите тарелку при температуре 37 градусов Цельсия в течение ночи. После инкубации пластин с шоколадным агаром подсчитайте колонии, появляющиеся на пластине, и рассчитайте процент убитых бактерий, как описано в текстовом протоколе.

08:51

Применяя INDUCIBLE системы экспрессии для изучения помех бактериальных факторов вирулентности с внутриклеточной сигнализации

Похожие видео

0 Просмотры

08:47

Opsonophagocytic убийства Assay оценить иммунологические реакции против бактериальных патогенов

Похожие видео

0 Просмотры

08:23

Визуализация бактериальной резистентности с использованием флуоресцентных антибиотиков

Похожие видео

0 Просмотры

03:55

Метод анализа взаимодействия между белками приманки и добычи на основе ИФА

Похожие видео

0 Просмотры

03:53

Анализ для изучения роли витронектина в адгезии бактерий к эпителиальным клеткам хозяина

Похожие видео

0 Просмотры

05:40

Сывороточный бактерицидный анализ на комплемент-опосредованную бактерицидную активность антител

Похожие видео

0 Просмотры

03:05

Определение связывания витронектина с бактериальными поверхностями с помощью проточной цитометрии

Похожие видео

0 Просмотры

05:33

Микронейтрализационный анализ для измерения титров нейтрализующих антител в сыворотке крови человека

Похожие видео

0 Просмотры

03:54

Анализ in vitro для оценки влияния антител на биопленку Candida tropicalis

Похожие видео

0 Просмотры

12:33

Определение биопленки инициации на инфицированные вирусом клетки с помощью бактерий и грибов

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 15 августа 2026