Метод генерации вирусоподобных частиц гриппа с помощью системы млекопитающих

Вирусоподобные частицы, или VLP, имитируют структуру вируса, но не имеют вирусного генетического материала, что делает их невирулентными. VLP обладают поверхностно-связанными антигенными эпитопами, распознаваемыми иммунными клетками, что делает их идеальными кандидатами на вакцинацию.

Для получения рекомбинантных VLP гриппа берут эукариотические векторы экспрессии.

Два вектора содержат гены, кодирующие гемагглютинин, или ГК, и нейраминидазу, или НК — структурные белки вируса гриппа. Третий вектор содержит ген gag, кодирующий основные белки вируса иммунодефицита человека.

Добавьте реагент для трансфекции на основе катионных липидов. Положительно заряженная липидная головная группа взаимодействует с отрицательно заряженной ДНК, образуя бислой вокруг векторов, генерируя липосомные трансфекционные комплексы.

Добавляйте комплексы к культивируемым клеткам-хозяевам млекопитающих, пригодным для производства VLP, и инкубируйте. Трансфекционные комплексы проникают в клетки через эндоцитоз — мембрана липосомы сливается с мембраной эндосомы для высвобождения векторов в цитоплазму.

Векторы проникают в ядро, что приводит к экспрессии вирусных генов. При синтезе ГК и НК в эндоплазматическом ретик