Генерация вирусоподобных частиц чикунгунья с использованием системы экспрессии бакуловируса в клетках насекомых

Вирусоподобные частицы чикунгунья, VLP, представляют собой неинфекционные структуры, состоящие из белков вирусной оболочки, встроенных в липидный бислой, и лишенных генетического материала.

Для получения Chikungunya VLP необходимо инфицировать клетки насекомых Spodoptera frugiperda Sf9 рекомбинантными бакуловирусами, экспрессирующими кассету структурных генов Chikungunya. Кассета состоит из промотора бакуловируса, слитого со структурными генами чикунгуньи, кодирующими капсид, и оболочечными белками.

Во время инкубации гликопротеины оболочки бакуловируса связываются с поверхностными рецепторами на клетках насекомых. Это облегчает проникновение бакуловируса и высвобождение вирусной ДНК в цитоплазму, генерируя полипротеины, содержащие капсид чикунгуньи и белки оболочки.

После синтеза при автокаталитическом расщеплении белка капсида образуется полипротеин-предшественник, обладающий оболочечными белками в эндоплазматическом ретикулуме, ER. В просвете ER ферменты расщепляют полипротеин-предшественник, генерируя отдельные белки, которые поступают в компартмент Гольджи для дальнейшей переработки, образуя белковые гетертримеры.

Резидентные протеазы Гольджи расщепляют белковые гетеротримеры,