Методика создания модели бактериальной инфекции у личинок насекомых

Поместите личинку Galleria mellonella — большой восковой моли — на платформу для инъекций, обнажив брюшную сторону.

Возьмите микрошприц, содержащий суспензию Mycobacterium bovis BCG lux — живого бактериального вакцинного штамма, генетически модифицированного для получения биолюминесценции. Вводят суспензию в последнюю проногу, или брюшные придатки — выпускающие бактерии в гемолимфу — циркуляторную жидкость в полости тела.

Перенесите личинку в контролируемую среду и инкубируйте. Бактерии используют гемолимфу в качестве богатого источника питательных веществ и размножаются.

Гемоциты — иммунные клетки беспозвоночных в гемолимфе — группируются вокруг бактерий, образуя гранулемуподобную структуру для предотвращения распространения инфекции. Гемоциты высвобождают профенолоксидазу, которая подвергается протеолитическому расщеплению с образованием фенолоксидазы.

Фенолоксидаза синтезирует меланин, который изолирует бактерии в месте инфекции. Отложение пигмента меланина вызывает системную меланизацию, потемнение цвета личинок.

Гемоциты поглощают бактерии в фагосомы. Фагосомы сливаются с лизосомами для получения литических ферментов, вызывая бактериальную деградацию. Подмножество бактерий мож