Почему процедура катетеризации имеет значение для согласованности модели инфекции?

Стандартизированный катетеризм обеспечивает воспроизводимое введение бактерий в просвет мочевого пузыря, сводя к минимуму вариативность установления инфекции у разных животных.

Каким образом токсин α-гемолизин обеспечивает выход бактерий из везикул?

Мономеры токсина α-гемолизина объединяются в поровые комплексы в везикулярной мембране, что позволяет бактериям перемещаться в цитоплазму хозяина для репликации.

Что позволяет количественно оценить формирование внутриклеточного бактериального сообщества в данной модели?

Формирование IBC оценивают с помощью микроскопии или подсчета количества бактерий в гомогенатах мочевого пузыря, что отражает внутриклеточную репликацию и биопленкоподобную агрегацию.

Почему в эксперименте с самцами мышей мониторили прогрессирование инфекции в динамике?

Отслеживание распространения бактерий из IBC в соседние клетки помогает оценить терапевтическое воздействие на распространение и персистенцию инфекции.

Какие статистические пороги определяют успешное установление инфекции?

Успешность инфицирования определяется на основе заранее установленных показателей качества инстилляции и измерений бактериальной нагрузки после инокуляции, превышающих фоновые уровни.

Трансуретральная катетеризация и бактериальная инокуляция для создания модели инфекции мочевыводящих путей у самцов мышей

JoVE Encyclopedia of Experiments

Иммунология

0 просмотров • 2:32 мин • July 8th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Возьмите мышь, находящегося под наркозом, и вставьте катетер в его гениталии.

Ввести в мочеиспускательный канал уропатогенные бактерии. Внутри мочевыводящих путей бактерия прикрепляется к уроэпителиальной клетке.

Взаимодействие поверхностных белков бактерий с белками мембраны клетки-хозяина вызывает перестройку цитоскелета, в результате чего мембрана клетки-хозяина плотно обхватывает бактерию с помощью механизма молнии.

Впоследствии бактерия интернализуется в мембранно-связанном везикуле. Внутри везикулы бактерия продуцирует мономеры α-гемолизинового токсина, которые собираются, образуя поровый комплекс в везикулярной мембране.

Бактерия улетучивается через поровый комплекс в цитоплазму клетки-хозяина, где она реплицируется, образуя внутриклеточные бактериальные сообщества, или IBC. IBC представляют собой плотные, похожие на биопленку структуры внутри клеток хозяина, защищенные от прямой атаки иммунными клетками, присутствующими во внеклеточном пространстве.

По мере того, как уропатогенные бактерии созревают в IBC, они в конечном итоге покидают клетки-хозяева, чтобы заразить соседние клетки, вызывая инфекции мочевыводящих путей.

Чтобы сделать прививку самцам мышей, поместите два щипца большого пальца краниально и каудально к наружным половым органам мыши. Втяните препуций, чтобы полностью обнажить головку полового члена. Затем, как только пенис будет расположен снаружи, отпустите щипцы для большого пальца. Переместите щипцы так, чтобы стабилизировать выступающий пенис перпендикулярно животному, удерживая орган мягко, но туго. Затем через небольшое отверстие в кончике уретрального прохода осторожно введите катетер и аккуратно введите его в половой член с помощью щипцов для мягкого поддержания напряжения.

Как только ступица катетера встретится с кончиком полового члена, очень медленно выведите 50 микролитров инокулюма, сохраняя при этом положение полового члена. Обратите внимание на качество инстилляции в соответствии с заранее определенной оценкой качества инстилляции, такой как показанная здесь. Медленно втяните катетер в течение 5 секунд, чтобы предотвратить утечку инокулюма. Поместите мышь в клетку в положение лежа на спине. Животное должно начать восстанавливаться через 30-45 минут после введения анестетика.