Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:37 мин. • July 8th, 2025
Во время инфекции альвеолярные макрофаги высвобождают макрофагальные внеклеточные ловушки или МЕТ для уничтожения патогенов.
МЕТ состоят из хроматиновых волокон в комплексе с пептидиларгининдеиминазами, ЗПА, матриксными металлопротеиназами и цитруллинированными гистонами.
Чтобы визуализировать МЕТ в макрофагах из жидкости бронхоальвеолярного лаважа, сначала центрифугируйте жидкость.
Поместите ресуспендированные элементы на покровные стекла в колодцы с несколькими лунками.
Макрофаги прикрепляются к покровным стеклам, в то время как другие клетки остаются во взвешенном состоянии и отбрасываются
от них.Фиксируют макрофаги, сохраняя клеточную структуру. Проникайте в них для доступа к клеточным целям.
Добавьте блокирующие белки, препятствующие связыванию неспецифических антител.
Дополните первичным коктейлем антител, который связывается с целевыми цитруллинированными гистонами, ЗДА и матриксными металлопротеиназами соответственно.
Добавьте различные вторичные антитела, помеченные флуорофорами, которые связываются с первичными антителами-мишенями, связанными с белком MET.
Установите элементы с помощью монтажной среды, содержащей DAPI. DAPI, флуоресцентный краситель, окрашивает волокна х
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео