Методика посева распылением для выявления грибковой инфекции в листьях растений риса

0 views • 3:30 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Возьмите пластину Петри с разрезами листьев риса, расположенную над влажной фильтровальной бумагой, чтобы предотвратить высыхание.

Возьмем суспензию конидий — репродуктивных спор — патогенного гриба Magnaporthe grisea. Распылите на срезы листьев и инкубируйте в темных и влажных условиях.

Влага побуждает конидии выделять слизь, облегчая прикрепление к поверхности листа.

Конидии расширяют зародышевые трубки, кончик которых дифференцируется в куполообразный аппрессорий.

Высокая концентрация растворенного вещества внутри аппрессория создает тургорное давление, образуя пег.

Малый диаметр колышка фокусирует тургор-опосредованную силу на небольшой площади листа, вызывая проникновение в ячейку листа.

Стержень дифференцируется на инвазивные гифы для получения питательных веществ.

Инкубируйте срезы листьев под флуоресцентным светом на предмет роста грибков.

Гифы разветвляются внутри инфицированных клеток и проникают в соседние клетки через плазмодесматы.

Грибок выделяет токсины, чтобы вызвать некроз, что приводит к поражению листьев. Оцените поражения для оценки тяжести инфекции.

С помощью стерильных хирургических ножниц разрежьте три слоя фильтровальной бумаги на 8-сантиметровые круги. Поместите кружочки фильтровальной бумаги на 100-миллиметровые стерильные пластиковые пластины. Добавьте в каждую посуду ровно столько дистиллированной деионизированной воды, сколько нужно, чтобы пропитать фильтровальную бумагу. Затем поместите две стерильные зубочистки на расстоянии от 2 до 3 см друг от друга в каждую чашку для культуры.

Через две недели после посева соберите листья с растений риса, срезав нижнюю часть стебля. Используя термостатический инкубатор, культивируйте штаммы M. grisea на планшетах OTA при температуре 25 градусов Цельсия в течение четырех дней. Затем с помощью пипетки добавьте 2 миллилитра дистиллированной деионизированной воды на каждую тарелку. Используя петлю инокуляции, соскребите мицелий с диких и мутантных штаммов в остатки мицелия.

Соберите остатки мицелия и перенесите их на новую ОТА-планшет. Затем высушите остатки мицелия на чистой скамейке. Добавьте 2 миллилитра дистиллированной деионизированной воды в чашку для культивируемого мицелия и с помощью стерильного ватного тампона аккуратно соскребите конидии. Отфильтруйте суспензию конидии через два слоя линзовой бумаги, и переложите суспензию в новую 50-миллилитровую трубку. Затем центрифугируйте пробирку в течение 5 минут при 5000-кратном избежании.

После центрифугирования удалите надосадочную жидкость и повторно суспендируйте гранулу раствором Tween 20, в результате чего концентрация составит 20 000 конидий на миллилитр. Залейте суспензию в ручной распылитель. Затем распылите примерно 10 миллилитров конидиальной суспензии на листья двухнедельных растений риса. Опрыскайте листья контрольных растений раствором Твин 20.

После этого выдержите листья в темной влажной коробке в течение 24 часов. Далее перенесите листья во влажную камеру с люминесцентным светом на 12 часов.

03:03

Инокуляция бактериального патогена в листья арабидопсиса посредством вакуумной инфильтрации

Related Videos

0 Views

02:26

Установление инфекции листьев риса через грибковую инокуляцию через раны

Related Videos

0 Views

15:14

Создание Грибковые энтомопатогенов как Эндофиты: на пути к эндофитные биологического контроля

Related Videos

0 Views

07:09

Быстрый и эффективный метод оценки патогенности Ustilago maydis на линиях кукурузы и teosinte

Related Videos

0 Views

07:14

Завод инфекции тест: Спрей и Рана опосредованной прививка с завода возбудителя Magnaporthe мурены

Related Videos

0 Views

05:56

Прямая агроинокуляция саженцев кукурузы путем инъекции рекомбинантного вируса мозаики лисохвоста и инфекционного клона вируса мозаики сахарного тростника

Related Videos

0 Views

06:09

Простой и гибкий метод инокуляции для точной оценки фенотипов мучнистой росы и других растений

Related Videos

0 Views

11:48

Контраст трех методов инокуляции, используемых для определения расы неизвестных Fusarium oxysporum f.sp. нивеум Изолирует

Related Videos

0 Views

08:16

Стратегии инокуляции для заражения корней растений почвенными микроорганизмами

Related Videos

0 Views

07:36

Визуализация ранних очагов заражения рисовой бластной болезнью (Magnaporthe oryzae) на ячмене (Hordeum vulgare) с помощью базового микроскопа и смартфона

Related Videos

0 Views

Last updated: 4 July 2026