Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:56 мин. • July 8th, 2025
Возьмем, к примеру, культуру раковых клеток печени человека, генетически модифицированную для экспрессии таурохолата натрия, котранспортирующего полипептид или NTCP — трансмембранный рецептор.
Добавьте рекомбинантный вирус гепатита В, или HBV. Вирус состоит из внешней оболочки, содержащей поверхностные белки, и внутреннего нуклеокапсида, охватывающего геном. Вставка репортерного гена люциферазы подавляет репродуктивную способность вируса.
Белок вирусной оболочки связывается с рецептором NTCP клетки-хозяина.
NTCP взаимодействует с рецептором эпидермального фактора роста, EGFR, и олигомеризуется, индуцируя EGFR-опосредованный эндоцитоз вируса.
Вирусная оболочка сливается с эндосомной мембраной, высвобождая нуклеокапсид, который распадается в ядерном поровом комплексе.
Вирусный геном проникает в ядро и преобразуется в ковалентно замкнутую кольцевую ДНК или cccDNA — стабильную матрицу, кодирующую вирусные белки, в том числе люциферазу.
Через заданные промежутки времени собирайте клетки и лизируйте для высвобождения внутриклеточной люциферазы.
Введите репортерский субстрат. Люцифераза окисляет подложку, вырабатывая сигнал.
Постинфекционное повышение активности люциферазы указывает на не
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео