Индукция экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита на мышиной модели

Примите адъювантную эмульсию, содержащую гликопротеины миелина олигодендроцитов, или MOG — белок оболочки миелина нерва, а также инактивированную микобактерию туберкулеза. Введите его подкожно в спину мыши.

Затем внутрибрюшинно вводите экзотоксины, полученные из бактерий, нарушая гематоэнцефалический барьер.

Подкожно вводимая Mycobacterium имитирует местную инфекцию, привлекая иммунные клетки, в том числе антигенпрезентирующие клетки или APC.

АПК взаимодействуют с МОГ, обрабатывая и представляя их на основных комплексах гистосовместимости, МНС

.

Активированные АПК мигрируют в лимфатические узлы, где Т-клетки взаимодействуют с АПК, становясь аутореактивными Т-клетками.

Эти Т-клетки попадают в кровоток, пересекают барьер и проникают в центральную нервную систему, ЦНС.

В ЦНС аутореактивные Т-клетки взаимодействуют с MOG-экспрессирующими клетками, способствуя инфильтрации иммунных клеток.

Инфильтрированные моноциты дифференцируются в макрофаги, высвобождая воспалительные цитокины и активные формы кислорода, вызывая гибель клеток миелин-продуцирующих олигодендроцитов.

В-клетки взаимодействуют с аутореактивными Т-клетками, дифференцируются в плазматические клетки и секретируют аутоантитела против MOG, что приводит к деградации миелиновой оболочки.

Демиелинизация нарушает передачу нервных сигналов, вызывая аутоиммунный энцефаломиелит.

Начните с подкожного введения 10-13-недельным самкам мышей 200 микрограммов гликопротеина миелина олигодендроцитов, эмульгированного в 200 микролитрах полного адъюванта Фрейнда, содержащего 400 микрограммов Mycobacterium tuberculosis. Немедленно, через 24 часа, внутрибрюшинно введите мышам 0,2 микрограмма коклюшного токсина в 200 микролитрах PBS.

Важно, чтобы мыши были адаптированы как к обращению, так и к экспериментальной среде до индукции, чтобы избежать стресса, который может предотвратить развитие клинических симптомов.

Через неделю после инъекции ежедневно осматривайте мышей на наличие клинических симптомов, как описано в таблице.