Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:35 мин. • July 8th, 2025
Возьмем малую интерферирующую РНК, или миРНК, тип РНК, участвующий в подавлении экспрессии генов.
Добавьте сферические липидные пузырьки, называемые липосомами.
Липосома инкапсулирует миРНК, защищая ее от деградации.
Добавьте комплексы миРНК-липосома в культуральную лунку, содержащую нейральные стволовые клетки. Держите одного из них в качестве контроля и инкубируйте.
Липосома сливается с клеточной мембраной, высвобождая миРНК.
МиРНК связывается с индуцированным РНК сайленсинговым комплексом, или RISC, при котором удаляется одна нить.
Оставшаяся цепь нацелена на мРНК, отвечающую за дифференцировку клетки, что приводит к ее деградации.
Добавьте в лунки подходящую среду для дифференциации.
В контрольной лунке факторы роста и другие питательные вещества в среде способствуют дифференцировке нейральных стволовых клеток в остеобласты.
Используя подходящие методы окрашивания, окрашивайте остеобласт-специфичные маркеры на клетках и окрашивайте ядро синим флуоресцентным красителем.
Отсутствие остеобласт-специфичных маркеров в генно-молчаливых клетках указывает на их неспособность к дифференцировке.
Чтобы выполнить нокдаун миРНК в O9-1, клетки восстанавливаются и засевают клетки. Разведите л
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео