Брыжеечной артерии Сокращение и отдых Исследования с помощью автоматизированной миография провода

В этой процедуре используются кукольные солечувствительные и солеустойчивые крысы для сравнения реактивности артерий брыжеечного сопротивления при напряжении фенилэфрина с внеклеточным кальцием. Это достигается путем первичной изоляции брыжеечной аркады от животных и рассечения ветвей артерии сопротивления. Следующий. Первый из двух проводов из нержавеющей стали продевается через короткий сегмент рассекаемой артерии, и сосуд монтируется в графическую камеру.

Затем второй провод из нержавеющей стали продевается через просвет сосуда параллельно первому проводу. Далее смонтированное судно растягивается до нормированной внутренней окружности. Заключительным этапом процедуры является реактивация сосуда путем повторного применения фенилэфрина и расслабления с помощью кумулятивного применения кальция.

В конечном счете, результаты показывают изменения напряжения в сосуде, которые могут быть преобразованы в кривую реакции кальция и использованы для определения значений EC 50. Для сравнения. Впервые у нас появилась идея использовать этот метод, когда мы обнаружили, что сеть nev масонарных батареек крысы экспрессирует рецептор gpro медного кальция.

Это можно изучать так же, как и горькие рецепторы AIC, которые активируются агонистами. Как правило, люди, плохо знакомые с этим методом, могут испытывать трудности, потому что эндотелий и гладкие мышечные слои малы. Сосуды легко повреждаются.

Если это произойдет, механические свойства этих сосудов могут быть нарушены. Для начала подготовьте рабочую зону и хирургические инструменты. Положите животное под наркозом на спину и протрите живот спиртом.

После выполнения лапаротомии по средней линии с помощью ножниц удалите около 85 сантиметров кишечника, включая верхнюю брыжеечную артерию. Разрежьте проксимальный конец рядом с привратником и дистальный конец рядом с илеоцекальным соединением. Поместите вырезанный срез в чашку Петри с покрытием, содержащую физиологический раствор соли или ПСС комнатной температуры.

Прижмите проксимальный конец кишечника справа, а затем приколите остальную часть кишечника против часовой стрелки. Затем рассеките сегмент брыжеечной артерии, содержащий вторую и третью ветви, и кусок кишечника от проксимального конца. Определите V-образную точку ветви брыжеечной артерии и рассеките ее в сторону от вены.

С помощью щипцов аккуратно оттягивайте жировую и соединительную ткань, чтобы избежать прямого контакта с артерией. Для начала монтажа сосуда разрезают два сегмента артерии длиной около двух миллиметров. Наконечник четырехсантиметровой проволоки из нержавеющей стали 40 микрометров без вольфрама может быть использован для открытия просвета артерии.

Затем с помощью тонких щипцов вставьте проволоку в просвет каждой артерии. Стараясь не повредить эндотелий, заполните камеру миотрансплантата PSS при температуре 37 градусов Цельсия. С помощью щипцов перенесите сегмент продетого сосуда в камеру.

Затем перенесите иссеченный проксимальный сегмент сосуда в камеру миографического графа и потяните конец вдоль проволоки, чтобы подать его в сосуд. Избегайте растяжения сосуда. Закрепите ближний конец провода против часовой стрелки под ближним фиксирующим винтом на правой губке, подключенной к микрометру.

Зацепите свободный конец проволоки щипцами и закрепите его по часовой стрелке под дальним фиксирующим винтом на правой губке, следите, чтобы сегмент сосуда вдоль проволоки находился в зазоре между губками, не соприкасаясь с самой губкой. Разверните губки. Выровняйте вторую проволоку параллельно сосуду и вставьте ее в дальний конец просвета.

Аккуратно пропустите проволоку через просвет сегмента сосуда одним движением, используя уже установленную проволоку в качестве направляющей. Держите проволоку примерно в одном сантиметре от сосуда, чтобы не растянуть его во время маневра и не задеть эндотелий. Прикрутите губки вместе и убедитесь, что второй монтажный провод движется под первым, закрепленным на правой руке.

Губки закрепите ближним концом второго провода по часовой стрелке под ближним фиксирующим винтом левой губки, подключенной к датчику. Закрепите дальний конец проволоки под крепежным винтом на левой губке и затяните, чтобы натянуть проволоку. После завершения монтажа подождите 30 минут для уравновешивания при 37 градусах Цельсия.

После балансировки мотор сбрасывается из монтажного меню и запускается процедура нормализации, которая растягивает сосуд до нормализованной внутренней окружности. Для начала откройте меню нормализации и установите целевое трансмуральное давление на 13,3 килопаскалей. Затем установите продолжительность каждого из шагов нормализации равной 60 секундам.

Соотношение IC one к IC 100 должно быть равно 0,9, а калибровка IP должна быть установлена на две звезды дельта. Измерьте длину смонтированной брыжеечной артерии с помощью показаний окуляра микроскопа, когда линии роста волос находятся над дальним и нейронами сегмента сосуда. После нормализации сосуды реактивируются путем выполнения стандартного старта, состоящего из серии стимуляций и периодов промывания.

Во-первых, установите на место крышку камеры myo и начните аэрацию с 95% воздуха и 5% углекислого газа. Заполните камеру свежим ПСС, содержащим 100 микромоляров аскорбиновой кислоты. Сожмите сосуд пятью микромолярами фенхеля, рина или ПЭ в течение пяти минут и промойте четыре раза буфером PSS. После последнего промывки снова наполните камеру PSS и подождите три минуты, прежде чем снова наполнить камеру PSS, и сокращение PE.As показано ранее, теперь артерия готова к эксперименту.

Измерьте расслабление суженных сосудов путем кумулятивного добавления возрастающих концентраций хлорида кальция. Из этой таблицы видно, что базальное напряжение после применения фенилэфрина варьировало у wistar DS или чувствительных к соли куклы и крыс, устойчивых к DR или кукольной соли. Этот след от крысы линии Wistar показывает расслабление сузенных артерий ТЭЛА путем кумулятивного добавления релаксации кальция с сильно нарушенными тканями у крыс с синдромом Дауна по сравнению с крысами Вистар, и по сравнению с крысами Dr.Rats, как видно здесь, различия в чувствительности к кальцию можно увидеть на кривых реакции кальция и снова при расчете значений EC 50.

Наконец, у крыс с синдромом Дауна наблюдается снижение экспрессии кальциевого чувствительного рецептора в артериях по сравнению с Dr.Rats Once mastered. Эту технику можно выполнить за два часа, если она выполнена правильно. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как сравнивать сосудистую реактивность малого кишечного аттри с экзогенным соединением в изометрических условиях.