Стимуляция сенсорных нейронов ганглия дорсального корешка с помощью агониста нейропептидных рецепторов

Возьмите многолуночный планшет, содержащий трансфицированные ганглиозные нейроны заднего корешка крысы.

Нейроны тестовой лунки демонстрируют сниженную экспрессию нейропептидных рецепторов, в то время как нейроны контрольной лунки демонстрируют физиологические уровни экспрессии нейропептидных рецепторов.

Замените среду на среду, не содержащую сыворотки, чтобы обеспечить контролируемую среду для точной реакции на стимуляцию.

Добавьте в лунки агонист нейропептидных рецепторов и перемешайте. Инкубируйте тарелку.

В контрольной лунке агонист нейропептидных рецепторов связывается с рецепторами-мишенями, запуская внутриклеточный сигнальный каскад, который высвобождает нейротрансмиттеры.

Однако в тестовых лунках сниженная экспрессия нейропептидных рецепторов ограничивает связывание агонистов, что приводит к снижению высвобождения нейромедиаторов по сравнению с контролем.

После инкубации соберите среду из лунок и центрифугите.

Перенесите надосадочную жидкость в пробирки и используйте подходящий иммуноферментный анализ для измерения уровня нейротрансмиттеров. Контрольный образец демонстрирует более высокое высвобождение нейротрансмиттеров, чем тестовый образец, после стимуляции агонистов нейр