Измерение экспрессии белка в мозге грызунов с помощью флуоресценции в ближнем инфракрасном диапазоне и сканирования с высоким разрешением
Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:03 мин. • May 29th, 2025
Возьмите предметное стекло, содержащее срезы ткани мозга крысы, иммуноокрашенные на рецепторы AMPA и NMDA в нейронах миндалевидного тела.
Рецепторы AMPA опосредуют глутамат-индуцированный приток натрия и быструю возбуждающую синаптическую передачу.
Напротив, NMDA-рецепторы опосредуют глутамат и коагонист-индуцированный приток натрия и кальция, способствуя медленной возбуждающей синаптической передаче.
Рецепторы окрашиваются первичными антителами и обнаруживаются с помощью вторичных антител, помеченных флуорофорами ближнего инфракрасного диапазона.
Поместите предметное стекло тканевой стороной вниз на интерфейс сканирования ближнего инфракрасного диапазона.
Отрегулируйте параметры визуализации и начните визуализацию.
При лазерном освещении флуорофоры на рецепторах AMPA и NMDA излучают флуоресценцию.
Изображение в ближнем инфракрасном диапазоне сводит к минимуму автофлуоресценцию, повышая четкость сигнала.
Сканирование с высоким разрешением также обеспечивает четкую дифференциацию флуоресцентных сигналов, что позволяет точно визуализировать близлежащие рецепторы AMPA и NMDA в миндалевидном теле.
Используя программное обеспечение для визуализации, рассчитайте отношение интенсивности флуоресце
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео