Субпиальная доставка генов в спинной мозг мыши для оценки экспрессии генов

Возьмите мышь под наркозом, побрейте ей спину, продезинфицируйте кожу.

Надрежьте кожу, отделите мышцы от позвонков и втяните их с помощью зажимов.

Просверлите пластинки позвонков, чтобы создать трещины, затем удалите костные фрагменты, чтобы обнажить твердую мозговую оболочку, внешнюю оболочку спинного мозга.

С помощью иглы создайте отверстие для твердой мозговой оболочки и проколите нижележащую мозговую оболочку, чтобы войти в субпиальное пространство для прямого доступа к спинномозговым тканям.

Возьмите иглу для доставки, содержащую суспензию рекомбинантного аденоассоциированного вируса, несущего ген, экспрессирующий флуоресцентный белок, и введите суспензию.

Извлеките иглу, зашите мышцы и кожу и дайте мышке восстановиться.

Вирус связывается с рецепторами на нейронах и глиальных клетках и эндоцитозируется.

Попадая внутрь ядра, вирус запускает экспрессию генов для производства флуоресцентных белков.

Субпиальная модель доставки генов теперь готова для оценки экспрессии целевых генов в спинном мозге.

Начните с правильной анестезии животного перед операцией. Здесь используется изофлуран. Прежде чем продолжить, убедитесь в отсутствии реакции на щипок лапы. Затем накройте глаза офтальмологичес