Внутримозговое лечение ресинфератоксином для десенсибилизации TRPV1 в головном мозге мышей

Возьмем микрошприц, наполненный резинифератоксином, высокоаффинным агонистом рецепторов TRPV1, чувствительных к боли ионных каналов, экспрессируемых на сенсорных нейронах.

Пропустите иглу через металлическую трубку, обнажив короткий конец наконечника для точного нацеливания на желудочки.

Положите мышь под наркозом в положение лежа и продезинфицируйте ее голову с помощью спирта. Крепко держите голову, чтобы стабилизировать череп.

Переместите иглу в боковом направлении по коже головы до тех пор, пока она не зацепится за сагиттальный шов.

Сместите иглу вправо, затем двигайтесь рострально, чтобы зацепиться за корональный шов.

Введите иглу в правый боковой желудочек, затем медленно введите RTX.

Кратковременно удерживайте иглу, чтобы обеспечить диффузию RTX, затем медленно выведите ее, чтобы предотвратить обратный поток.

RTX связывается с каналами TRPV1 на сенсорных нейронах в мозге, вызывая устойчивый приток кальция и длительную деполяризацию нейронов.

Это запускает опосредованную фосфорилированием десенсибилизацию TRPV1 с последующей интернализацией TRPV1 и лизосомальной деградацией, что снижает реакцию нейронов на болевые стимулы.

Обезболите мышь пентобарбиталом натрия внутрибрюшинно и провер