Интраназальная доставка мезенхимальных стволовых клеток у мышей с черепно-мозговой травмой

Начните с мыши, находящейся под наркозом, с черепно-мозговой травмой.

В месте повреждения демиелинизация аксонов и повреждение нейронов вызывают высвобождение провоспалительных цитокинов.

Обезопасьте мышь и интраназально введите протеолитический фермент.

Затем расположите мышь лицевой стороной вверх на короткое время и повторите подачу фермента.

Протеолитические ферменты разрушают внеклеточный матрикс в эпителии носа и усиливают проницаемость клеток.

Затем интраназально вводите меченые мезенхимальные стволовые клетки, или раствор МСК.

Держите голову мыши в вертикальном положении в течение некоторого времени, чтобы предотвратить преждевременный дренаж и обеспечить абсорбцию МСК в ткани носа.

Повторите процесс доставки MSC.

Дайте мыши восстановиться.

Хемотаксические сигналы провоспалительных цитокинов направляют МСК к миграции из носовой полости в место повреждения головного мозга.

В месте повреждения МСК секретируют нейротрофические факторы, способствующие ремиелинизации. Это подчеркивает нейротерапевтический потенциал МСК для восстановления нейронов.

Для доставки клеток, после подтверждения отсутствия реакции на защемление пальца ноги, загривите мышь, обездвиживая череп. Поместите кончик пипетки, содержащей 4 единицы гиалуронидазы на микролитр PBS, рядом с нервным гнездом мыши под углом 45 градусов и введите 3 микролитра суспензии гиалуронидазы в каждую ноздрю. Положите животное лицом вверх на чистую подушечку на пять минут, прежде чем повторить обработку четыре раза, в общей сложности 100 единиц лечения гиалуронидазой.

После последней обработки поместите мышь обратно на коврик на 30 минут, прежде чем удерживать мышь, как показано только что на рисунке. Обездвижив головку, введите 3 микролитра суспензии мезенхимальных стволовых клеток в каждую ноздрю в течение трех секунд за каждую подачу раствора, удерживая мышь в этом положении в течение 30 секунд до полного исчезновения капель образца. Через две минуты повторите подачу до трех раз, пока не будет доставлен весь объем мезенхимальных стволовых клеток. Затем верните мышь в свою клетку с контролем до полного лежачего состояния.