Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:29 мин. • August 7th, 2025
Возьмем мышь под наркозом с мононитью, вставленной в ее среднюю мозговую артерию, чтобы вызвать окклюзию.
Это блокирует приток крови к мозгу, вызывая очаговую ишемию.
Окклюзия ограничивает поступление кислорода и глюкозы, вызывая истощение АТФ и деполяризацию нейронов.
Деполяризованные нейроны выделяют избыток глутамата, который связывается с постсинаптическими рецепторами, вызывая массивный приток кальция.
Повышенное содержание внутриклеточного кальция нарушает функцию митохондрий и способствует выработке АФК, инициируя повреждение нейронов.
Повторно обезболите мышь.
Снова откройте разрез и удалите мононить, чтобы добиться реперфузии.
Внезапное повторное введение кислорода приводит к избытку АФК из дисфункциональных митохондрий, что усугубляет повреждение нейронов.
Чтобы смягчить эту проблему, подвергните мышь воздействию газовой смеси с высоким содержанием углекислого газа для кислотного посткондиционирования или APC после начала реперфузии.
Это увеличивает концентрацию протонов в мозге, ингибируя рецепторы, уменьшая приток кальция и предотвращая кальций-опосредованную эксайтотоксичность.
Кроме того, APC стабилизирует митохондрии и ингибирует выработку АФК, тем самым обеспечивая нейропротекцию.
Через 55 минут после начала окклюзии повторно обезболите животное изофлураном и расположите животное в прежнем положении. Затем откройте разрез на шее и снова обнажите общую сонную артерию. После периода окклюзии с помощью офтальмологических щипцов аккуратно вытяните нить для достижения реперфузии. Затем превратите временный шов в постоянный, затянув узел. Для лечения ацидоза измените газ, вдыхаемый носовым обтекателем, на 20% углекислого газа, 20% кислорода и 60% азота на пять минут. После закрытия разреза прерванным хирургическим швом поместите мышь в клетку с температурой 30 градусов Цельсия до тех пор, пока мышь не придет в сознание.