Интраназальная доставка миРНК в мозг мыши с помощью позиционирующего устройства

Начните с мышей под наркозом, помещенных на позиционирующее устройство спиной параллельно опоре спинки стула и перпендикулярно сиденью.

Мыши располагаются в положении «голова вниз и вперед» и фиксируются с помощью ремней стула.

С помощью микропипетки, наполненной комплексом пептид-миРНК, нацеленным на нейроны, поместите каплю возле одной ноздри, позволяя мыши вдыхать раствор естественным образом.

Осторожно надавливайте на голову мыши вниз во время вдоха, чтобы раствор не попал в легкие.

Сделайте короткую паузу, затем повторите введение в другую ноздрю.

Повторите процедуру для оставшихся мышей.

Комплекс проникает в слизистую оболочку носа, откуда поступает в обонятельный и тройничный нервы и путешествует по ним, чтобы добраться до мозга.

Внутри мозга комплекс связывается с нейрональными рецепторами, подвергается эндоцитозу и способствует внутриклеточной доставке миРНК.

МиРНК становится частью комплекса RISC, который, связываясь с мРНК-мишенью, индуцирует сайленсинг генов.

Чтобы начать эту процедуру, оцените уровень анестезии двуногого рефлекса мышей с целью поддержания операционной плоскости. Затем разместите позиционирующее устройство на соответствующем расстоянии и высоте, чтобы обеспечит