JoVE Encyclopedia of Experiments
Нейронауки
0 просмотров • 3:37 мин • August 7th, 2025
Возьмите мышь под наркозом в положение лежа на спине с помощью ингаляционной маски для обеспечения анестезии.
Для интраназального введения препарата с помощью пипетки следует использовать микропипетку, содержащую препарат с радиоактивной меткой.
Вставьте микропипетку через отверстие в маске и введите препарат в носовую полость.
Полость выстлана респираторным и обонятельным эпителием, оба из которых содержат реснички, которые активно выводят вещества, тем самым ограничивая задержку препарата.
Сохраненные молекулы лекарства перемещаются по нервам к мозгу.
Для интраназального введения препарата с помощью обратной канюляции поместите мышь под микроскоп и сделайте разрез на шее.
Обнажите трахею, разрежьте ее, вставьте канюлю и соедините ее с маской для поддержания анестезии.
Обнажите пищевод, сделайте разрез и введите канюлю, направленную в сторону носовой полости.
Перевязайте канюлю и присоедините ее к шприцу, содержащему препарат с радиоактивной меткой.
Подавайте препарат против направления движения ресничек, усиливая удержание и улучшая транспортировку препарата.
Для интраназальной доставки с помощью микропипетки в изолированном радиоизотопном учреждении прикрепите мышь под наркозом к пробковой доске в положении лежа на спине и введите 25 микролитров раствора инулина углерода-14 в одной-двух микролитровых дозах поочередно в левую и правую ноздри животного.
Для обратной канюляции со стороны дыхательных путей через пищевод поместите мышь под наркозом под микроскоп и сделайте разрез кожи в 1,5 раза над горлом. Используйте щипцы для расширения разреза до тех пор, пока трахея не обнажится, и сделайте разрез на 1 миллиметр в открытой трахее. Вставьте канюлю 1.2 в заранее отмеченное положение в разрез и прикрепите противоположный конец канюли к внутренней части ингаляционной маски.
После этого с помощью щипцов обнажают пищевод из-под трахеи. С помощью ножниц сделайте разрез на 1 миллиметр в пищеводе и вставьте вторую канюлю 1,4 в заранее отмеченное положение по направлению к заднему концу носовой полости.
Важно вставить канюлю на соответствующую длину в соответствии с весом подопытного животного, а в других – отрегулировать длину канюли.
Перевязайте пищеводную канюлю и прикрепите иглу 27-го калибра к 1-миллилитровому шприцу, наполненному раствором для введения, подключенному к программируемому микрошприцевому насосу. Затем введите 25 микролитров инулина углерода-14 с постоянной скоростью 5 микролитров в минуту до тех пор, пока не будет введен весь объем раствора.
Медленная, но постоянная скорость диффузии важна для удержания как можно большего количества лекарственного раствора в носовой полости.