JoVE Encyclopedia of Experiments
Нейронауки
0 просмотров • 3:58 мин • August 7th, 2025
Закрепите мышь под наркозом с имплантированной опухолью на стереотаксической рамке.
Удалите скобы после предыдущей операции, продезинфицируйте кожу и сделайте надрез вдоль предыдущей раны, чтобы обнажить череп.
Найдите отверстие от заусенца после предыдущей операции, чтобы получить доступ к мозгу.
Расположите минимально инвазивную систему резекции, или MIRS, над отверстием заусенца.
Система состоит из канюли с вращающимся окном, которая использует всасывание для забора целевой ткани, и цилиндрического лезвия в отверстии для иссечения ткани.
Вставьте канюлю в целевую область и начните резекцию.
Отсасывание протягивает небольшие участки опухоли через окно, в то время как лезвие иссекает ткань.
Вращающееся окно обеспечивает контролируемую резекцию за счет непрерывного всасывания и разрезания.
Вырезанные фрагменты перемещаются по стерильной трубке в камеру для сбора образцов.
Извлеките канюлю, закройте рану и дайте мыши восстановиться.
Начните эксперимент с оценки состояния мыши на предмет седативного эффекта, зажав палец ноги. Наносите офтальмологическую мазь на глаза, чтобы избежать сухости роговицы. Затем поместите мышь на стереотаксическую рамку. Удалите скоб с предыдущей операции и продезинфицируйте кожу чередующимися циклами скраба на основе хлоргексидина или бетадина и спирта. Затем с помощью стерильного скальпеля сделайте продольный разрез по средней линии длиной 1 сантиметр вдоль предыдущего хирургического рубца. Прикрепите наконечник MIRS к стереотаксическому кронштейну через адаптер столика.
Чтобы настроить устройство MIRS, вставьте шнур питания, расположенный на задней панели, в гнездо для кабеля питания. Включите или выключите питание системы, переключаясь между значениями от 0 до 1. Вставьте один конец азотного шланга в штуцер с наружной резьбой на задней панели консоли. Поверните соединительную гайку по часовой стрелке, чтобы затянуть ее. Убедитесь, что давление подачи не превышает 100 фунтов на квадратный дюйм изб., и подсоедините шланг к источнику азота.
Закройте крышку вакуумного порта, чтобы избежать утечки. Убедитесь, что ручка аспирации на передней части консоли установлена на 100, но утечки в системе аспирации нет и что давление подачи азота правильное. Вставьте серый разъем ножной педали в серую розетку до щелчка. Таким же образом вставьте синий разъем наконечника в его синюю розетку. Загрунтуйте каждый наконечник, отасунув стерильную жидкость в отверстие через трубку и наконечник, а затем в канистру, чтобы обеспечить смазку внутренней части трубки и наконечника.
Выберите режим аспирации на передней панели консоли и инициируйте с помощью ножной педали. Вставьте канюлю 23G MIRS в скважину на глубину 2,5 миллиметра. Начните процесс резекции, нажав на ножную педаль, подключенную к канюле. Выполняйте полные циклы резекции с помощью ручки управления в наконечнике. После процесса резекции извлеките канюлю MIRS 23 калибра и добавьте 5 миллилитров 1x PBS, чтобы промыть трубку и удалить остаточный мусор. Затем закройте рану степлером и извлеките мышь из стереотаксической рамки. Верните мышь в грелку, чтобы восстановиться после анестезии, прежде чем положить ее обратно в клетку.