Инъекция рекомбинантных аденоассоциированных векторов в модель мышей со спинальной и бульбарной мышечной атрофией

Начните с ограниченной спинальной и бульбарной мышечной атрофии или мыши, пораженной SBMA.

Очистите его хвост и согрейте его, чтобы расширить вену.

SBMA вызывается мутировавшим андрогенным рецептором или геном AR, который продуцирует мутантную мРНК AR.

Эта мРНК синтезирует токсичные белки в моторных нейронах, которые ухудшают передачу сигналов и приводят к мышечной слабости.

Далее возьмите шприц, содержащий рекомбинантный аденоассоциированный вирус или векторы AAV с плазмидой, кодирующей терапевтическую микроРНК.

Введите иглу в хвостовую вену и введите раствор.

Теперь надавите, чтобы остановить кровотечение, затем верните мышь в клетку.

Попадая в циркуляцию, вирусный вектор достигает двигательных нейронов, которые контролируют функцию мышц.

Вирус проникает в клетку через эндоцитоз, высвобождая плазмиду.

Плазмида продуцирует зрелую микроРНК с комплементарными последовательностями к мутантной мРНК AR.

Эти микроРНК связываются с мРНК AR, вызывая их деградацию.

Это препятствует накоплению токсического белка и способствует улучшению нервно-мышечной функции.

Разделите запас плазмид микроРНК AAV на аликвоты объемом от 100 до 200 микролитров, содержащие вирусную нагрузку от 10 до 100 триллионов геном