Введение флуоресцентного красителя в субретинальное пространство мыши

Возьмите мышь под наркозом и подстригите усы, чтобы облегчить визуализацию глаз.

Поместите мышь под микроскоп на грелку, чтобы поддерживать температуру тела.

Расширьте зрачок, чтобы обеспечить визуализацию сетчатки, затем смажьте глаз, чтобы предотвратить сухость.

Зажмите конъюнктиву, прозрачную мембрану, и сделайте надрез.

Разрежьте подлежащую капсулу Тенона и удалите слой соединительной ткани, вращая глазом.

При этом обнажается склера, внешний слой глаза, и обеспечивается доступ к месту инъекции рядом со зрительным нервом.

Сделайте склеральный разрез и введите шприц, содержащий флуоресцентный краситель, в субретинальное пространство между слоем фоторецептора сетчатки и пигментным эпителием сетчатки.

Введите краситель, чтобы создать контролируемую отслойку сетчатки, затем извлеките иглу.

Промойте глаз и нанесите антибиотик для предотвращения инфекции.

Дайте мыши восстановиться и обезболивайте. Мышь готова к визуализации для подтверждения успешной субретинальной инъекции.

Чтобы начать эту процедуру, подрежьте усы мыши, находящейся под наркозом, чтобы облегчить визуализацию и поддерживать температуру тела животного на уровне 37 градусов по Цельсию с помощью циркуляционной водяной подушечки.