Оценка нейропротекторных эффектов тестируемого соединения на мышиной модели окклюзии средней мозговой артерии

Начните с мышей под наркозом с наложением швов на наружную сонную артерию, или ЭКА, и внутреннюю сонную артерию, или ICA, и тонкую нить, окклюзирующую среднюю мозговую артерию, или MCA.

Расположите лазерный допплеровский зонд для измерения относительного мозгового кровотока в MCA. Снижение кровотока подтверждает окклюзию МКА.

Закрепите нить в ВСА, чтобы сохранить окклюзию МКА.

Эта окклюзия ограничивает снабжение мозга насыщенной кислородом кровью, что приводит к гибели нейронов и образованию мертвых тканей или инфаркта.

После периода окклюзии извлеките нить для восстановления кровотока.

Зашите разрез и дайте мышам восстановиться.

Разделите мышей на две группы и введите исследуемое соединение через пероральный зонд в группу лечения, в то время как контрольная группа остается нелеченной.

Соединение попадает в кровоток, достигает мозга, ограничивает апоптоз нейронов и ингибирует дальнейшую гибель нейронов по сравнению с контрольной группой, не получавшей лечения.

Меньший инфаркт в группе лечения по сравнению с контрольной группой подтверждает нейропротекторный эффект соединения.

Чтобы создать модель окклюзии средней мозговой артерии мыши, или MCAO, подтвердите отсутствие реакции на раздражитель у обезболенного шестинедельного самца C57 black 6 мыши, находящегося под наркозом, весом от 22 до 25 граммов. И поместите мышь на одеяло с температурой тела 36,5 градусов по Цельсию, подключенное к термометру.

После удаления всех волос с груди и шеи мыши с помощью бритья и крема для депиляции поместите мышь под стереомикроскоп и сделайте двухсантиметровый разрез кожи в центре шеи. Тщательно изолируйте левую общую сонную артерию, наружную сонную артерию и ветвь внутренней сонной артерии от окружающих соединительных тканей. И используйте шелковый шов 4-0 для перевязки наружной сонной артерии и общей сонной артерии, с полузацепным узлом, чтобы временно перекрыть приток крови во внутреннюю сонную артерию.

Вставьте пластину толщиной от 0,1 до 0,12 миллиметра, длиной 11 миллиметров, с силиконовым покрытием, 8-0 Монофиламент, 4-0 нулевой шелковый шов через внутреннюю сонную артерию к началу левой средней мозговой артерии. И используйте лазерный допплеровский флоуметр для измерения уменьшения относительного мозгового кровотока в артерии. Зафиксируйте введенную нить к кровеносному сосуду на два часа, при этом мозговая артерия окклюзирована.

По окончании окклюзионного периода осторожно извлеките нить для восстановления кровотока в течение 22 часов реперфузии. И с помощью 3-0 шелковых швов зашить кожу в пяти местах с двумя полузаминками узлами. Затем верните мышь в клетку для восстановления анестезии. Через час после окончания реперфузии вводите 300 мг на килограмм массы тела G-Rex экспериментальным животным только через зонд.