T-лабиринту Принудительное чередование и влево-вправо дискриминации Задачи для оценки рабочей и обращение к памяти у мышей

Представлено модифицированное приложение Automatic teammates с системой отслеживания. Данное приложение сконструировано из белых пластиковых направляющих с перегородками высотой 25 сантиметров. MA разделена на шесть зон с помощью автоматической нити, направленной к зоне A. Одна из них является отсеком STA.

S two представляет собой сходство партнеров по команде. A one и A two — это соответственно левый и правый рукава. Области P one и P two представляют собой соединительные переходы из областей A one или A two обратно в A one, чтобы мышь могла вернуться в статический отсек.

В данном видео в демонстрационных целях двери открываются вниз автоматически, в то время как одна из дверей приводится в действие вручную. Усовершенствованные механизмы управления позволяют использовать INB micro SSIS в молекулярной физиологии и генетических методах во время работы команды. N, с периодом выдачи, используется в качестве пищевого вознаграждения; при нажатии срабатывает флакон дозатора корма, после чего следует флакон для отходов.

Вы можете видеть, как pellet высыпается из дозатора корма на лоток, а затем отбрасывается мышью под поверхность terrains. Мышь фиксируется датчиком, и данные записываются компьютером. На практике программа системы видеотрекинга автоматически выдает pellet, поэтому вам не нужно предпринимать никаких действий до конца сессии. CCD-камера установлена над оператором для регистрации поведения мыши компьютером в виде изображения, при этом аппарат Parus освещается на 100% яркости.

Мы рекомендуем размещать аппарат Аппеля в звукоизолированной комнате, чтобы минимизировать влияние внешних шумов из окружающих помещений. За одну неделю до начала рабочих сессий мыши должны ежедневно находиться в аппарате и получать доступ к корму с определенной скоростью, чтобы привыкнуть к условиям и началу обучения. Подачу стандартного корма ограничивали таким образом, чтобы поддерживать массу тела мышей на уровне 80%–85% от массы при свободном кормлении на протяжении всего эксперимента. На следующий день после достижения целевого веса все клетки с мышами переносят в звукоизолированную комнату как минимум за 30 минут до начала первого испытания, чтобы избежать воздействия прямого света. Во избежание воздействия света клетки не следует размещать на верхней полке.

Перед помещением мышей в операторы необходимо протереть операторы салфеткой, предварительно используя супергипохлористую воду для предотвращения смещения, основанного на сигналах ProAct. Сегодня по шесть особей на мышь помещают в центр, по шесть из которых распределяют по одной в каждый лоток дозаторов корма. Поместите всех мышей в индивидуальные клетки в Perus и предоставьте им возможность свободного перемещения.

Ознакомьтесь с устройством Perus при закрытых дверцах или за 30 минут до начала. Через один день после адаптации мыши будут подвергаться ежедневному забору крови при закрытых дверцах, а гранулы будут помещаться в кормушку. Поместите мышь в левый рукав; если мышь съедает гранулу в течение пяти минут, переведите мышь в правый рукав и начните предварительное обучение заново. Данная процедура обучения повторяется пять раз в день и продолжается до тех пор, пока мышь не начнет употреблять их.

Более чем в 80% случаев мышь помещали в статический отсек. Двери открывались, и мыши предоставлялся первый выбор одного из плеч лабиринта, после чего она самостоятельно возвращалась в стартовый отсек. Затем мыши предоставлялся последующий выбор.

Теперь кусают лапу, противоположную четвертой. Затем мышь самостоятельно возвращается в статический бокс, и процедура повторяется. Это повторяют до 10 раз в день как для контрольных, так и для экспериментальных мышей.

Для дальнейшей проверки этого критерия можно протестировать мышей в задаче с отложенным удержанием, вводя задержки в 3, 10, 30 или 60 секунд между первым выбором и окончательным выбором объекта. Данный рабочий лист предназначен для записи информации по этой задаче: уникального идентификатора мыши, генотипа, схемы метки на ухе и места для ручной фиксации результатов программы применения. Выберите идентификатор проекта для ввода данных в систему Plug TM online.

Например, сеанс ввода названия основной линии. Например, дата тестирования, входные параметры, такие как формула с изображением, зафиксированным камерой C, время отсечки и размер оператора. Далее введите идентификатор испытания.

Например, номер станции для привязки к имени файла или данной задаче необходимо выбрать через выпадающее меню, ввести порядковый номер, установить ограничение по времени для ошибки машины и время штрафа. Затем установите значения яркости и контрастности захваченного изображения, после чего создайте специальное короткое бинарное изображение. Наконец, убедившись, что соответствующие области интереса собраны и шаблон завершен, программа будет готова к тестированию.

Осторожно возьмите мышь и поместите ее в стартовый отсек. Нажмите кнопку пуска и выберите параметр силы. После запуска вы сможете наблюдать изображения в реальном времени и в бинарном виде, а также очаги поражения кишечника.

В данном случае мышь находилась в правой ветви лабиринта, когда она зашла на страницу и дверь открылась. После завершения периода выбора стимул был подан в левую ветвь. Поскольку мышь перешла в левую ветвь, ответ был отмечен как правильный.

Результаты ответов отображаются в нижнем окне монитора. Здесь на примере воспроизводимых в реальном времени изображений показано, что закрытые окна обозначены белыми кругами, а желтые круги указывают на период перекреста. В рамках одной сессии в день мышь подвергается 10 последовательным испытаниям.

Мышь ежедневно обучали до достижения среднего показателя 80% правильных ответов. Процент правильных ответов, латентный период правильного ответа до завершения сессии, расстояние до уровня и количество ошибок ремиссии рассчитываются программой автоматически. После каждой сессии мышь возвращают в домашнюю клетку. Очистите платформу диспенсера, протрите электроды бумажным полотенцем; тщательно удалите остатки воды, чтобы предотвратить возникновение систематической ошибки, основанной на обонятельных стимулах. Если контрольная группа и экспериментальные мыши соответствуют этим критериям и вы хотите дополнительно протестировать мышей в задаче на отсроченное удержание, просто выберите файл с отсрочкой в настройках программы и начните следующую сессию.

Данная процедура в некоторой степени напоминает задачу на позиционирование, однако, в отличие от задачи на пост-ретенцию, движение всегда осуществляется от левой руки к правой в приложении программы. Выберите имя файла предпочтения для данного задания и имя мыши из выпадающего меню, затем поместите мышь в стартовый отсек. Нажмите кнопку «Пуск», и выбор направления начнется.

В данном случае выбранный рычаг всегда перекусывается в течение определенного периода. Мышь обычно проходит от 10 до 20 последовательных проб за сессию в день. Мышей обучают ежедневно до достижения критерия, означающего 80% правильных ответов.

Результаты рассчитываются автоматически после тестирования мышей. На основании этих критериев можно провести дополнительные сессии с мышами для оценки памяти на удержание, увеличив интервал между сессиями, или для оценки поведенческой активности. Путем перемещения рычага в противоположный рукав в ходе различных попыток и сессий видеофиксация позволила скорректировать этот процесс с помощью альфа-сложного hetero M, контролируемого типом LI в задаче с принудительной автоматизацией.

Результат демонстрирует рабочую память у мутантов, но CBR нарушена в задаче с диском; у мышей-мутантов, выполняющих эту задачу, не наблюдается никаких проблем, и даже после задержки в один месяц они не продемонстрировали нарушений в обучении на автобусе. Однако у мутантов наблюдалось ухудшение показателей. Тест T-образного лабиринта является одним из наиболее широко используемых поведенческих тестов для оценки рабочей и референтной памяти.

Для грызунов мы усовершенствовали тестовую установку, что дает несколько преимуществ. Во-первых, раздвижные двери открываются автоматически, и мышь может самостоятельно заходить в S-бокс после каждого испытания. Такая автоматизация MA сокращает время и усилия, необходимые для ручного управления диспенсерами воды и корма.

В нашей лаборатории один эксперимент могут проводить до четырех членов команды одновременно. Во-вторых, конструкция аппарата позволяет использовать методы, требующие подключения проводов к голове животного, такие как микродиализ in vivo, электрофизиология in vivo или оптогенетика in vivo, поскольку раздвижные двери открываются вниз. Наконец, лабиринт спроектирован таким образом, что мышь может двигаться только вперед по другим путям, но не назад, что обеспечивает плавность перемещения животного.

В этом видео мы представили модифицированный автоматический аппарат для тестирования взаимодействия партнеров (teammate apparatus) и наши протоколы; с нами доктор Хиро Паш. В данном фильме Хиротака продемонстрирует протоколы с использованием этого модифицированного автоматического аппарата. Хиротака, каково было ваше первое впечатление от теста взаимодействия партнеров с использованием этого усовершенствованного аппарата?

Моим первым впечатлением было то, что с аппаратом и программным обеспечением очень легко работать, и тест можно выполнить без труда. Считаете ли вы, что любой человек может управлять этим оборудованием и программой, или же требуется какое-то специальное обучение? Я согласен частично.

Любой может научиться управлять операторами. Для выполнения любых процедур тестирования специальная подготовка не требуется. Есть ли какие-либо советы или моменты, на которые следует обратить внимание при проведении теста?

Да. Я тщательно поддерживаю мотивацию к получению пищи, предоставляемой в виде массы, путем ежедневного контроля массы тела. Индивидуальные различия в мотивации могут привести к вариациям в результативности партнеров по команде.