Мониторинг убиквитин-протеасомной активности в живых клетках с помощью Degron (DGN)-дестабилизировали зеленого флуоресцентного белка (GFP)-Reporter на основе белков

16.1K просмотров

Цитируется: 14

10:25 мин.

10 ноября 2012 г.

10.3791/3327-v

10 ноября 2012 г.

16.1K просмотров

Метод мониторинга убиквитин-протеасомной активности в живых клетках описано. Degron-дестабилизированный GFP-(GFP-DGN) и стабильный GFP-dgnFS гибридного белка создаются и преобразованных в ячейку с помощью лентивирусов вектор экспрессии. Этот метод позволяет генерировать стабильный GFP-dgn/GFP-dgnFS выражения клеточная линия, в которой убиквитин-протеасомной активности может быть легко оценить, используя эпифлуоресцентной или проточной цитометрии.

Больше видео

репортер GFP Dgn

Chapters in this video

0:00

Название

1:21

Производство вируса

4:11

Титрование вируса

6:13

Трансдукция диплоидных фибробластов человека

7:19

Эксперименты с использованием FACS

8:50

Протеасомная активность in vivo

10:04

Заключение

Related Videos