29 января 2012 г.
Вынуждены плавать тест проверяется как экспериментальный подход к оценке потенциальных антидепрессантами эффективность у грызунов. Экспериментальные животные помещаются в резервуар с водой и избежать поведения, связанного мобильность количественно. Общих процедур для мыши версия этого теста описаны.
Тест на принудительное плавание у мышей является распространенным тестом, используемым для прогнозирования эффективности антидепрессантов. В этом фильме демонстрируются процедуры теста на принудительное плавание на мыши. Версия мыши отличается от версии с оберткой и не должна использоваться как взаимозаменяемая.
В тесте на принудительное плавание мышей помещают в резервуар, наполненный водой. Мышь остается в баке в течение шести минут. В течение этого времени записывается поведение субъекта.
По окончании шестиминутного тестового периода испытуемого вытаскивают из воды. После завершения теста визуальные записи передаются на компьютер или видеомонитор. Ибо анализ в Observer измеряет время, которое мышь тратит на борьбу в течение последних четырех минут шестиминутного сеанса.
Антидепрессанты увеличивают количество времени, тратя его на борьбу. Это отражается в более коротких периодах неподвижности. Здравствуйте, меня зовут Шон из лаборатории доктора Тодда Гулда в Медицинской школе Университета Мэриленда.
Привет, я Шантель из той же лаборатории. В этом видео мы покажем вам, как выполнить и оценить мышиную версию теста Forced Swim Test. Тест на принудительное плавание на мышах используется для оценки потенциальной эффективности лечения антидепрессантами.
Итак, давайте погрузимся, ладно? Мы используем прозрачные цилиндрические резервуары, изготовленные из прочного материала, например, из оргстекла, размеры резервуара подобраны таким образом, чтобы мыши не могли убежать и коснуться дна ни ногами, ни хвостом. Наполните бак водопроводной водой до заданного и отмеченного уровня, отрегулируйте температуру воды.
Она должна быть в пределах от 23 до 25 градусов по Цельсию. Резервуары для воды должны быть расположены для видеосъемки. В нашей лаборатории мы проводим тест на принудительное плавание с четырьмя-пятью испытуемыми одновременно между резервуарами.
Расставляем разделители, чтобы субъекты не наблюдали друг за другом. Эти разделители также обеспечивают контраст фона с мышами. Для мышей-альбиносов черный цвет обеспечивает хороший контраст при видеозаписи.
Для более темных сортов мыши подойдет белый или кремовый фон. Прежде чем начать эксперимент, запустите генератор белого шума. Убедитесь, что он не слишком громкий.
Он должен только маскировать любые прерывистые шумы. Приведите испытуемых в комнату для экспериментов. Для акклиматизации этот период обычно составляет не менее одного часа.
Условия в экспериментальной комнате должны поддерживаться постоянными и свободными от шумов, изменений уровня освещенности и других возможных нарушений. Как только период привыкания закончится, можно приступать к тесту. Важно записать название сеанса Во-первых, держите мышей за хвосты и аккуратно поместите их в аквариум.
Важно делать это медленно, чтобы животные могли ориентироваться при касании поверхности воды. По окончании шестиминутного тестового периода ведется видеозапись идентификации животных и прекращается запись. Удалите мышей в том же порядке, в котором они были заведены, и аккуратно высушите их бумажными полотенцами, прежде чем положить обратно в клетку.
Воду в баках нельзя использовать повторно. Теперь, когда мы завершили тестирование, давайте перейдем к оценке поведения в тесте Mass Force Swim. Основной переменной, которая оценивается, является количество времени, в течение которого животные остаются неподвижными во время испытания.
Как правило, в тесте на принудительное плавание на мышах оцениваются последние четыре минуты из общего шестиминутного сеанса. Причина этого заключается в том, что большинство мышей, независимо от лечения, постоянно подвижны на ранних стадиях теста. Эта активность затмевает любые потенциальные эффекты лечения.
Как вы можете видеть на этом видео, мыши очень активны на начальных этапах теста. Эта активность будет снижаться после первых двух минут за каждое затраченное время мыши. Мобильность измеряется с помощью секундомера на экране, управляемого игровым джойстиком.
Другой секундомер отсчитывает 240 секунд. Мобильность во времени теста определяется как любые движения, отличные от тех, которые необходимы для балансировки тела и удержания головы над водой. Теперь давайте посмотрим на выборку оценки испытания.
Сначала мы рассматриваем других мышей, которые не оцениваются, чтобы предотвратить путаницу. Мыши обычно легко плавают в воде. Тем не менее, они все еще демонстрируют небольшие движения, чтобы уравновесить свое тело и удержать голову над водой.
Такое поведение не является попыткой убежать и не должно оцениваться как подвижность. Кроме того, после одного приступа подвижных мышей, хотя они в основном неподвижны, все еще могут дрейфовать в воде в результате импульса, полученного ранее, эти движения также не должны оцениваться как подвижность. Теперь перейдем к другому видео.
Мышь в этом видео отображает периоды как подвижности, так и неподвижности, как указано на экране, наблюдатель будет записывать время подвижности. Хотя теоретически возможно измерить время неподвижности напрямую, легче обнаружить и измерить активные движения, чем их отсутствие. Традиционно сообщается о времени неподвижности.
Время неподвижности определяется путем вычитания времени подвижности из 240 секунд. Чтобы сдать четвертый тест по плаванию, нужно много тренироваться и практиковаться. Чтобы достичь высокого уровня надежности, важно создать внутренний стандарт жизни и обучать каждого нового наблюдателя до тех пор, пока он не достигнет высокого уровня надежности.
В этом видео мы расскажем о мышиной версии теста Forced Swim. Удачи вам в дальнейших экспериментах.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Тест вынужденного плавания является проверенным методом оценки потенциальной эффективности антидепресантов у грызунов. Этот тест предполагает погружение мышей в емкость с водой и количественную оценку их поведения, связанного с попытками спастись.
The mouse forced swim test is a widely used preclinical behavioral assay for evaluating antidepressant efficacy, providing a quantitative readout of escape-related mobility that supports target validation and mechanistic de-risking in early discovery. Its standardized procedure enables reproducible assessment of compound effects on depressive-like states, informing go/no-go decisions in antidepressant pipeline prioritization. The test’s simplicity and minimal equipment requirements facilitate scalable implementation across discovery workflows.
The mouse forced swim test functions as a discovery-stage behavioral assay that bridges target validation and lead identification, providing mechanistic insights before progression to preclinical efficacy studies.