В пробирке транскрипции и укупорки мРНК люциферазы Gaussia Вслед за Трансфекция Сотовые HeLa

18.3K просмотров

Цитируется: 13

08:55 мин.

26 марта 2012 г.

10.3791/3702-v

26 марта 2012 г.

18.3K просмотров

В данном методе описывается высокоэффективный синтез in vitro как кэпированной, так и некэпированной мРНК из линеаризованной плазмиды, содержащей ген люциферазы Gaussia (GLuc). РНК подвергается очистке, после чего часть некэпированной РНК кэпируется ферментативно с использованием кэпирующего фермента вируса Vaccinia. На заключительном этапе мРНК трансфецируют в клетки HeLa, после чего супернатанты клеточных культур анализируют на люциферазную активность.

Больше видео

T7

Chapters in this video

0:05

Title

1:33

In vitro Transcription using the T7 High-yield RNA Synthesis Kit

3:29

RNA Capping using the Vaccinia Capping System

4:17

HeLa Cell Transfection using the TransIT mRNA Transfection Kit

6:08

Gaussia Luciferase (GLuc) and Cypridina Luciferase (CLuc) Assays

7:20

Representative Results

8:36

Conclusion

Related Videos