Шаг за шагом метод для разведения Transporter ABC в Nanodisc липидных частиц

25.4K просмотров

Цитируется: 23

12:25 мин.

31 августа 2012 г.

31 августа 2012 г.

25.4K просмотров

Huan Bao¹ , Franck Duong¹ , Catherine S. Chan¹

¹Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of British Columbia

Nanodiscs малых дисковидные частицы, которые включают мембранных белков в небольшой патч фосфолипидного бислоя. Мы предоставляем визуальный протокол, который показывает, шаг за шагом включения MalFGK2 транспортера на диск.

Больше видео

Реконституция нанодисков

мембранный каркасный белок

гель-фильтрационная хроматография

нативный гель-электрофорез

динамическое рассеяние света

соотношение белка и липидов

удаление детергента

контроль качества

Chapters in this video

0:05

Название

2:08

Подготовка мембранного каркасного белка MSP

3:53

Подготовка комплекса MalFGK₂

5:09

Подготовка фосфолипидов

6:07

Подготовка Bio-Beads и реконституция нанодисков

7:59

Анализ нанодисков: электрофорез в нативном геле

8:26

Анализ нанодисков: динамическое рассеяние света (ДРС)

9:11

Анализ нанодисков: измерение АТФазной активности

9:47

Результаты: активность мальтозного транспортера, реконструированного в нанодисках

11:15

Заключение