Name: В ноябре этого года в Юпитер (Видео) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 51 s
Description: Изучите ключевые достижения в нейронауке и биологии из ноябрьского выпуска JoVE. Визуализированные эксперименты раскрывают новые данные о поведении нейронов и продвигают методы исследований.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3505/">Измерение быстрых потоков кальция в кардиомиоцитах</a></h2>
Urszula Golebiewska1, Сюзанна Скарлата2 1Факультет биологических наук и геологии, Общественный колледж Квинсборо, 2Факультет физиологии и биофизики, Университет Стоуни-Брук
Мы представляем метод выделения быстрых (микросекундных) событий кальция из более медленных потоков в живых клетках с помощью лазерной сканирующей конфокальной микроскопии. Метод измеряет флуктуации интенсивности флуоресценции показателей кальция путем записи линейных сканов в несколько сотен пикселей в ячейке. Анализ гистограмм позволяет выделить временные масштабы различных потоков кальция.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3373/">Твердофазный субмономерный синтез пептоидных полимеров и их самосборка в высокоупорядоченные нанолисты </a></h2>
Хелен Тран, Sarah L. Гаэль, Michael D. Коннолли, Рональд Н. Молекулярныйлитейный завод Цукермана , Национальная лаборатория им. Лоуренса в Беркли
Описан простой и общий метод ручного синтеза пептоидов с использованием базового оборудования и коммерчески доступных реагентов, позволяющий легко синтезировать пептоиды в большинстве лабораторий. Описан синтез, очистка и характеризация амфифильного пептоида 36mer, а также его самосборка в высокоупорядоченные нанолисты.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3258/">Поведенческая оценка ловкости рук у нечеловекообразных приматов</a></h2>
Эрик Шмидлин*, Mélanie Kaeser*, Anne- Dominique Gindrat, Julie Savidan, Полин Чатаньи, Симон Бадуд, Adjia Hamadjida, Marie-Laure Beaud, Тьерри Ваннье, Abderraouf Belhaj-Saif, Eric M. Медицинский факультет Руйе, Университет Фрибурга * Эти авторы внесли равный вклад
Поскольку ловкость рук является прерогативой в основном приматов, поведенческие задачи были разработаны у макак. Четыре задания на досягаемость и хватание, измеряющие способность и силу манипулирования рукой, позволяют установить функциональное восстановление после поражения центральной нервной системы и проверить эффект лечения.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3588/">Определение фагоцитарной активности клинических образцов антител</a></h2>
Elizabeth G. McAndrew1, Anne-Sophie Dugast1, Anna F. Licht1, Justin R. Eusebio1, Galit Alter1, Margaret E. Акерман2 1Массачусетская больница общего профиля, Институт Рагона MGH, Массачусетский технологический институт и Гарвард, 2Инженерная школа Тайера, Дартмутский колледж
Мы представляем высокопроизводительный проточный цитометрический анализ для определения фагоцитарной активности антиген-специфических антител из клинических образцов с использованием флуоресцентных антигенных гранул и моноцитарной клеточной линии, экспрессирующей множественные Fc-рецепторы, обеспечивающие использование рецепторов и определение фагоцитарной активности стандартизированным и воспроизводимым образом для любого интересующего антигена.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3187/">Исследование актинового цитоскелета в живых эндотелиальных клетках, экспрессирующих GFP-актин</a></h2>
Travis M. Доггетт, Джером В. Кафедра физиологии Бреслина , Центр медицинских наук Университета штата Луизиана Микроскопическая визуализация живых эндотелиальных клеток, экспрессирующих GFP-актин, позволяет охарактеризовать динамические изменения в структурах цитоскелета. В отличие от методов, в которых используются фиксированные образцы, этот метод обеспечивает детальную оценку временных изменений в цитоскелете актина в тех же клетках до, во время и после различных физических, фармакологических или воспалительных стимулов.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3260/">Имплантация радиотелеметрических передатчиков, дающих данные о ЭКГ, частоте сердечных сокращений, температуре тела и активности у свободно движущихся лабораторных мышей</a></h2>
Nikola Cesarovic1, Paulin Jirkof2, Andreas Rettich2, Маргарет Аррас1 1Отделение хирургических исследований, Университетская клиника Цюриха, 2Институт лабораторных животных, Университет Цюриха
Показана хирургическая техника имплантации коммерчески доступных телеметрических передатчиков, используемых для непрерывного измерения биопотенциала (ЭКГ в одном отведении), частоты сердечных сокращений, температуры тела и локомоторной активности у свободно движущихся мышей. Также представлены рекомендации и протоколы по послеоперационному уходу и облегчению боли, улучшению восстановления, самочувствия и выживаемости.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3381">Электропорация черепно-лицевой мезенхимы</a></h2>
Jacqueline M. Tabler, Karen J. Лю Отделение черепно-лицевого развития, Королевский колледж Лондона
Черепно-лицевые хрящи развиваются в тесном контакте с другими тканями и ими трудно манипулировать у живых животных. Мы используем электропорацию для доставки молекулярных инструментов во время роста черепно-лицевого скелета, избегая ранних эмбриональных эффектов. Такой подход позволит нам эффективно тестировать молекулы-кандидаты in vivo.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3379">Срезовая электрофизиологическая запись и оптогенетическая стимуляция нейронов взрослого человека в обонятельной луковице</a></h2>
Matthew Valley, Sebastian Wagner, Benjamin W. Gallarda, Лаборатория восприятия и памяти Пьера-Мари Льедо , Институт Пастера и Национальный центр научных исследований (CNRS)
Взрослыми нейронами, экспрессирующими ChR2, можно манипулировать в электрофизиологических препаратах среза, чтобы изучить их вклад в функцию обонятельных нейронных цепей.

В ноябре этого года в Юпитер

November 2011: This Month in JoVE

Ноябрьский выпуск Journal of Visualized Experiments начинается с серии поведенческих экспериментов по измерению способности к захвату у приматов. Исследователи из Университета Фрибура демонстрируют четыре задачи по захвату и дотягиванию, каждая из которых включает общие этапы комфортной фиксации животного и правильного позиционирования его головы. Тест с доской Бринкмена используется для оценки способности дотягиваться до статичных объектов, в то время как тест с вращающейся доской Бринкмена создает условия, при которых животные должны предвосхищать положение объекта. Тест с коробкой Бринкмена позволяет исследовать ловкость в условиях, когда обезьяна имеет меньше степеней свободы для выполнения задачи по захвату и не может использовать зрение для управления движением. В то время как тесты с доской и коробкой Бринкмена основаны исключительно на анализе видео, полученного во время экспериментов, аппарат для задачи по открыванию выдвижного ящика оснащен детекторами, которые контролируют силу захвата и нагрузки, а также положение ящика, что делает этот тест подходящим для измерения как силы, так и способности к захвату. В совокупности эти четыре теста представляют собой мощный подход к оценке моторного контроля в дистальном отделе передней конечности; группа из Фрибура представляет данные как исследований с применением повреждений, так и экспериментов по тестированию потенциальных методов терапии травм спинного мозга. В разделе «Клиническая и трансляционная медицина» специалисты из Отделения хирургических исследований Университетской клиники Цюриха и Института лабораторных животных Цюрихского университета совместно работают над имплантацией устройств радиотелеметрии мышам, которые могут быть использованы для проведения физиологических измерений у свободно передвигающихся животных. Устройства состоят из двух электродов, способных измерять биопотенциальную активность (ЭКГ, ЭЭГ или ЭМГ), а также температуру, и легкого радиопередатчика (ширина полосы 1-200 Hz), который может быть имплантирован в брюшную полость. Стресс при обращении с животными, а также анестезия являются известными искажающими факторами, влияющими на физиологические измерения, поэтому устройства радиотелеметрии представляют собой удобный способ получения физиологических данных от животных в спокойном, естественном состоянии, а также одновременного проведения измерений у нескольких особей. JoVE также пополняет свою коллекцию протоколов электропорации методом введения макромолекул в краниофациальную мезенхиму развивающихся головастиков Xenopus laevis, предложенным лабораторией Лю из Кингс-колледжа Лондона. Головастиков Xenopus переносят в камеру для электропорации, где в них вводят нуклеиновую кислоту, после чего подвергают электропорации для доставки экспрессионных векторов или морфолино в развивающуюся ткань краниофациальной области. Доставка генов в дифференцированный хрящ по определению затруднена, и лаборатория Лю показывает, что с помощью электропорации морфолино могут быть введены в прохрящевые и хрящевые ткани головастика Xenopus на различных стадиях развития. В разделе «Биоинженерия» группа Цукермана из Национальной лаборатории Лоренса в Беркли иллюстрирует свой метод синтеза пептоидов — класса биологически активных органических молекул, напоминающих пептиды, но имеющих боковые цепи, прикрепленные к азоту пептидной связи, а не к альфа-углероду, что делает их устойчивыми к протеолизу. Группа Цукермана демонстрирует субмономерный синтез, при котором пептидные мономеры добавляются последовательно в реакциях бромацетилирования и замещения бромида, что позволяет точно контролировать длину и состав цепи пептоида. Кроме того, тот факт, что синтез осуществляется на амидной смоле и, следовательно, является твердофазным синтезом, значительно упрощает очистку синтезированных пептоидов. Авторы также показывают, как вновь синтезированные пептоиды могут самоорганизовываться в высокоупорядоченные структуры, называемые нанолистами, которые можно визуализировать с помощью флуоресцентной и сканирующей электронной микроскопии. Эти нанолисты могли бы послужить потенциальной платформой для создания миметиков белков и мембран. Позже в этом месяце в разделе «Иммунология и инфекции» JoVE представляет метод измерения фагоцитарной активности клеток, подвергнутых воздействию клинических образцов антител. Специалисты из Массачусетской больницы общего профиля и Дартмутского колледжа показывают с помощью таймлапс-видеомикроскопии, как клетки THP-1 поглощают бусины, покрытые антиген-антительными комплексами, и представляют метод проточной цитометрии на планшетах для количественной оценки степени фагоцитоза. Авторы используют этот метод для определения способности различных образцов антител индуцировать фагоцитоз, в том числе образцов, полученных от пациентов с ВИЧ, как получавших, так и не получавших антиретровирусную терапию. Данный обзор содержания JoVE за ноябрь предоставляет краткую информацию о ключевых материалах месяца. Среди других заслуживающих внимания статей — методы визуализации динамики цитоскелета в эндотелиальных клетках живьем, измерение потока кальция в кардиомиоцитах и электрофизиология срезов нейронов, рожденных во взрослом возрасте в обонятельной луковице.

Ноябрьский выпуск Journal of Visualized Experiments начинается с серии поведенческих экспериментов по измерению способности к захвату у приматов. Исследователи из Университета Фрибура демонстрируют четыре задачи по захвату и дотягиванию, которые выполняются с соблюдением общих этапов комфортной фиксации животного и правильного позиционирования его головы. Тест с доской Бринкмана используется для оценки способности дотягиваться до статичных объектов, в то время как тест с вращающейся доской Бринкмана создает условия, при которых животным необходимо предугадывать положение объекта. Тест с коробкой Бринкмана позволяет исследовать ловкость рук в условиях, когда у обезьяны меньше степеней свободы для выполнения задачи по захвату и она не может использовать зрение для управления движениями. Если тесты с доской и коробкой Бринкмана опираются исключительно на анализ видеозаписей, полученных в ходе экспериментов, то установка для задачи по вытягиванию ящика оснащена детекторами, которые контролируют силу захвата и нагрузки, а также положение ящика, что делает этот тест подходящим для измерения как силы, так и способности к захвату. В совокупности эти четыре теста представляют собой мощный подход к оценке моторного контроля в дистальном отделе передней конечности; группа из Фрибура представляет данные как исследований с применением деструкции тканей (лезионологических исследований), так и экспериментов, направленных на проверку потенциальных методов терапии травм спинного мозга.

В разделе «Клиническая и трансляционная медицина» сотрудники Отделения хирургических исследований Университетской клиники Цюриха и Института лабораторных животных Цюрихского университета совместно работают над имплантацией мышам устройства радиотелеметрии, которое может быть использовано для проведения физиологических измерений у свободно передвигающихся животных. Устройства состоят из двух электродов, способных измерять биопотенциальную активность (ЭКГ, ЭЭГ или ЭМГ), а также температуру, и легкого радиопередатчика (с шириной полосы пропускания 1–200 Гц), который может быть имплантирован в брюшную полость. Известно, что стресс при манипуляциях с животными, а также анестезия являются конфаундинг-факторами, влияющими на физиологические показатели, поэтому устройства радиотелеметрии представляют собой удобный способ получения физиологических данных от животных в спокойном, естественном состоянии, а также одновременного проведения измерений у нескольких особей.

JoVE также пополняет свою коллекцию протоколов электропорации методом введения макромолекул в краниофациальную мезенхиму развивающихся головастиков Xenopus laevis, предложенным лабораторией Лю из Королевского колледжа Лондона. Головастиков Xenopus переносят в камеру для электропорации, где им вводят нуклеиновые кислоты, после чего подвергают электропорации для доставки экспрессионных векторов или морфолино в развивающуюся ткань челюстно-лицевой области. Доставка генов в дифференцированный хрящ по своей сути затруднена, и лаборатория Лю показывает, что с помощью электропорации морфолино могут быть введены в прохрящевые и хрящевые ткани головастика Xenopus на различных стадиях развития.

В разделе «Биоинженерия» группа Цукермана из Национальной лаборатории Лоренса-Беркли иллюстрирует свой метод синтеза пептоидов — класса биологически активных органических молекул, напоминающих пептиды, но имеющих боковые цепи, присоединенные к азоту пептидной связи, а не к альфа-углероду, что делает их устойчивыми к протеолизу. Группа Цукермана демонстрирует субмономерный синтез, при котором пептидные мономеры добавляются последовательно в реакциях бромацетилирования и замещения бромида, что позволяет точно контролировать длину и состав цепи пептоида. Более того, тот факт, что синтез осуществляется на амидной смоле и, следовательно, является твердофазным синтезом, значительно упрощает очистку синтезированных пептоидов. Авторы также показывают, как синтезированные пептоиды могут быть индуцированы к самосборке в высокоупорядоченные структуры, называемые нанолистами, которые можно визуализировать с помощью флуоресцентной и сканирующей электронной микроскопии.

Research

JoVE Journal

Biology

Биология

Изучите ключевые достижения в нейронауке и биологии из ноябрьского выпуска JoVE. Визуализированные эксперименты раскрывают новые данные о поведении нейронов и продвигают методы исследований.

В ноябре этого года в Юпитер (Видео) | JoVE Journal

Aaron Kolski-Andreaco

В ноябре этого года в Юпитер

Больше видео