Name: Bioluminescent Бактериальные изображений В Vivo (Видео) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-04T23:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 6 s
Description: Изучите биолюминесцентную визуализацию для отслеживания бактерий в опухолях у мышей. Этот метод позволяет неинвазивно мониторить рост бактерий внутри ксенотрансплантатов опухолей в реальном времени.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Авторы хотели бы отметить поддержку, относящиеся к этой рукописи от Европейской комиссии Седьмой Рамочной Программы (PIOF-GA-2009-255466) и Ирландский совет по исследованиям в области здравоохранения (HRA_POR/2010/138). Lux-отмеченных E. палочка была своего рода подарок от доктора Кормак Гаан, University College Cork.

1. Опухоль индукционные <ol><li> Для обычных индукции опухоли, минимальная доза онкогенных клеток суспендируют в 200 мкл бессывороточной культуральной среде вводили подкожно (п) во фланг инфекцию бесплатный 6-8 недельных самок BALB / C или бестимусным MF1-nu/nu мышей п = 6 (Harlan, Оксфордшир, Великобритания) (1 х 10 6 клеток 4T1) с использованием 21-калибровочного иглы шприца. Жизнеспособность клеток, используемых для посева было больше, чем на 95%, как это определено количество визуальных использованием гемоцитометра и Трипановый Синяя краска исключения (Gibco). </li><li> После создания опухоли, опухоли было позволено расти и развиваться и наблюдали дважды в неделю. Объем опухоли вычисляли по формуле V = (AB 2) Π / 6, где находится самый большой диаметр опухоли и B является самой длинной диаметра, перпендикулярного диаметра. </li></ol> 2. Бактериального препарата <ol><li> Бактериальный штамм, используемый в этом protocoЯ был E. соН К-12 MG1655, небелковой-токсин, экспрессирующих штамм, укрывательство luxABCDE кодирования плазмиды, которая позволяет бактериям быть обнаружены BLI. E. палочки MG1655 содержащие интегрированный luxABCDE был выращен в аэробных условиях при 37 ° С в среде LB (Sigma-Aldrich, Ирландия) с добавлением 300 мкг / мл эритромицина (Em). Биолюминесцентного производной MG1655 был создан с помощью плазмиды p16S люкс, который содержит учредительные HELP P luxABCDE оперона 1. </li><li> Для подготовки введения мышам, культуры инкубировали в среде LB при 37 ° C в шейкере со скоростью 200 оборотов в минуту до середины логарифмической фазы (оптической плотности при 600 нм). Бактерии собирают центрифугированием (6000 х г в течение 5 мин), промывают PBS (Sigma), и разводят в PBS 1 × 10 7 колониеобразующих единиц (КОЕ) / мл для внутривенного введения, или 1 х 10 10 для принудительного кормления. </li></ol> 3. Бактериальные администрацииния <ol><li> Мыши были произвольно разделены на экспериментальные группы, когда опухоль достигает примерно 100 мм 3 объема. Для внутривенного введения, сдержанный мышей каждый получил 10 6 клеток в 100 мкл, вводится непосредственно в латеральную хвостовую вену помощью 28G иглу шприца. Количество жизнеспособных каждой посевной определяется ретроспективным покрытием. </li><li> Для исследования желудочно-кишечного тракта колонизации, 10 9 бактериальных клеток вводили перорально в 100 мкл на мышь через желудочный зонд, три дня подряд. Ранее существовавшие комменсальной бактериальной уровни снизились до подачи добавлением 5 мг / мл стрептомицина в мышь питьевой воды в течение 7 дней до начала желудочный зонд 1. </li></ol> 4. Биолюминесценции изображений <ol><li> 2D в естественных условиях BLI изображений проводили с использованием IVIS100 (суппорт). В определенных временных точках сообщение бактериальной администрации, мышей анестезировали использованием XGI-8 суппорт газа анестезииСистема с 3% Isofluorane, и все тело изображение анализ был проведен в ИВИС 100 система в течение 2-5 мин при высокой чувствительности. </li><li> Для визуализации 3D, анестезированных мышей были помещены в трансфера мыши изображений внутри оптической системы визуализации для спины томография (ИВИС Spectrum, суппорт). Для получения изображения бактериальной люциферазы сигнала для 3D-оптических реконструкции, фильтр твердых диапазоне длин волн 500-580 нм были использованы с бен приобретение 16 раз по 3-4 мин на фильтр, чтобы максимизировать отношение сигнал-шум. В рамках этой последовательности захвата изображений, структурированные изображения света было получено для определения высоты карте. Эта карта была введена рассеянный свет томографии (DLIT) реконструкций алгоритмов, которые были использованы для формирования 3D-изображения с помощью оптического неотрицательных наименьших квадратов оптимизации 2. </li><li> Анализ изображений: Регионы интересов были определены и количественно, используя программное обеспечение Живые изображения (суппорт). </li></ol> 5. ПредставительРезультаты В этом исследовании, непатогенные синантропных бактерий E.coli K-12 MG1655 выражения luxABCDE оперона была IV вводили мышам подкожно опухолями 4T1 ксенотрансплантата. Бактериальные люкс сигнал был обнаружен в частности, в опухоли мышей сообщению IV-администрирования (рис. 2). Культура восстановления бактерий из образцов мышей подтверждает существование линейной зависимости между жизнеспособных бактерий номера и количество света обнаружено (рис. 3). В естественных изображений перорального синантропных бактерий в ЖКТ достигается также с помощью 3D BLI. <img src="/files/ftp_upload/4318/4318fig1.jpg" alt="Рисунок 1" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4318/4318fig1highres.jpg"/> Рисунок 1. Протокол Timeline. Подкожные опухоли индуцированные у мышей и бактерий вводили при развитии опухоли (100 мм 3). Онлайн мышей BLI имв возрасте в различных временных точках сообщение бактериальной администрации (стрелки отображения типичных раза). <img src="/files/ftp_upload/4318/4318fig2.jpg" alt="Рисунок 2" /> Рисунок 2. Администрация E. палочки MG1655 luxABCDE опухоли мышей подшипника. Подкожный 4T1 опухоли индуцированные в MF1 Nu / Nu мышей и E. палочки MG1655 luxABCDE вводить на развитие опухоли. Каждое животное получало 10 6 клеток вводится непосредственно в боковую хвостовую вену. Мыши были обследованы в четырех временных точках в ходе исследования (черные точки оси и изображения) с последующей восстановление жизнеспособных бактерий (КОЕ) из опухолей образца жертву мышей (гистограмма). Увеличение числа и бактериальные плазмиды экспрессии генов, в частности, в опухолях наблюдалась в течение долгого времени (представительных мышей показано на момент времени). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4318/4318fig2large.jpg" target="_blank">Нажмите, чтобы увеличить показатель</a> .<img src="/files/ftp_upload/4318/4318fig3.jpg" alt="Рисунок 3" /> Рисунок 3. Отношения между внутриопухолевые бактериального числа и биолюминесценции. Жизнеспособных бактерий в опухоли были перечислены экс естественных условиях бактериальные культуры от опухоли после BLI в различные моменты времени пост IV администрации. Вход значения бактериального числа (КОЕ) по отношению к bioluminesce в естественных единицах на графике. Надежная корреляция между бактерий и бактериальных сигналы биолюминесценции наблюдаются R 2 = 0,9717 1. <img src="/files/ftp_upload/4318/4318fig4.jpg" alt="Рисунок 4" /> Рисунок 4. 3D ИВИС изображения мышиного желудочно-кишечного тракта колонизирована E. палочки MG1655. GIT мышей была колонизирована перорального введения 10 9 КОЕ E. палочки в течение трех дней подряд. Пример изолированного изображения с 3D-томографии колонизировали мышь показано на рисунке.3D-изображения показывают цифровой атлас мыши скелета обеспечить анатомическую регистрации. E. палочки MG1655 биолюминесценции видна в зеленый при более низких, и фиолетовый на более высоких уровнях.

<ol><li>Cronin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+in+vivo+bioluminescent+imaging+for+the+study+of+bacterial+tumour+targeting%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">High resolution in vivo bioluminescent imaging for the study of bacterial tumour targeting.</a> PLoS One. 7, e30940(2012).</li>
<li>Kuo, C., Coquoz, O., Troy, T. L., Xu, H., Rice, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+reconstruction+of+in+vivo+bioluminescent+sources+based+on+multispectral+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Opt%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional reconstruction of in vivo bioluminescent sources based on multispectral imaging.</a> J. Biomed. Opt. 12, 024007(2007).</li>
<li>Tangney, M., Ahmad, S., Collins, S. A., O'Sullivan, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+for+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Postgrad+Med%22%5BJournal%5D)">Gene therapy for prostate cancer.</a> Postgrad Med. 122, 166-180 (2010).</li>
<li>Morrissey, D., O'Sullivan, G. C., Tangney, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumour+targeting+with+systemically+administered+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Tumour targeting with systemically administered bacteria.</a> Curr. Gene Ther. 10, 3-14 (2010).</li>
<li>Collins, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viral+vectors+in+cancer+immunotherapy%3A+which+vector+for+which+strategy%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Viral vectors in cancer immunotherapy: which vector for which strategy.</a> Curr. Gene Ther. 8, 66-78 (2008).</li>
<li>Yu, Y. A., Zhang, Q., Szalay, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+characterization+of+conditions+required+for+tumor+colonization+by+intravenously+delivered+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol.+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Establishment and characterization of conditions required for tumor colonization by intravenously delivered bacteria.</a> Biotechnol. Bioeng. 100, 567-578 (2008).</li>
<li>Baban, C. K., Cronin, M., O'Hanlon, D., O'Sullivan, G. C., Tangney, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacteria+as+vectors+for+gene+therapy+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Bioeng.+Bugs%22%5BJournal%5D)">Bacteria as vectors for gene therapy of cancer.</a> Bioeng. Bugs. 1, 385-394 (2010).</li>
<li>Cronin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orally+administered+bifidobacteria+as+vehicles+for+delivery+of+agents+to+systemic+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Orally administered bifidobacteria as vehicles for delivery of agents to systemic tumors.</a> Mol. Ther. 18, 1397-1407 (2010).</li>
<li>van Pijkeren, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+Listeria+monocytogenes-based+DNA+delivery+system+for+cancer+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">A novel Listeria monocytogenes-based DNA delivery system for cancer gene therapy.</a> Hum. Gene Ther. 21, 405-416 (2010).</li>
<li>Ahmad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+effective+antitumor+response+after+mucosal+bacterial+vector+mediated+DNA+vaccination+with+endogenous+prostate+cancer+specific+antigen%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Induction of effective antitumor response after mucosal bacterial vector mediated DNA vaccination with endogenous prostate cancer specific antigen.</a> J. Urol. 186, 687-693 (2011).</li>
<li>Riedel, C. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+luciferase+tagging+system+for+Listeria+monocytogenes+allows+real-time+monitoring+in+vivo+and+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Improved luciferase tagging system for Listeria monocytogenes allows real-time monitoring in vivo and in vitro.</a> Appl Environ Microbiol. 73, 3091-3094 (2007).</li>
<li>Cheng, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-targeting+prodrug-activating+bacteria+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Tumor-targeting prodrug-activating bacteria for cancer therapy.</a> Cancer Gene Ther. 15, 393-401 (2008).</li>
<li>Foucault, M. L., Thomas, L., Goussard, S., Branchini, B. R., Grillot-Courvalin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+bioluminescence+imaging+for+the+study+of+intestinal+colonization+by+Escherichia+coli+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">In vivo bioluminescence imaging for the study of intestinal colonization by Escherichia coli in mice.</a> Appl. Environ. Microbiol. 76, 264-274 (2010).</li>
<li>Collins, S. A., Hiraoka, K., Inagaki, A., Kasahara, N., Tangney, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+Imaging+For+Gene+%26+Cell+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">PET Imaging For Gene & Cell Therapy.</a> Curr. Gene Ther. , (2012).</li>
<li>Tangney, M., Francis, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+Optical+Imaging+in+Gene+%26+Cell+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">In vivo Optical Imaging in Gene & Cell Therapy.</a> Curr. Gene Ther. , (2012).</li>
</ol>

Нет конфликта интересов объявлены.

В контексте генной терапии, использование биологических агентов для доставки терапевтических генов для пациентов показало большие надежды 3-5. Подобно вирусам, врожденные биологические свойства бактерий условия для эффективной доставки ДНК в клетки или ткани, особенно в контексте рака. Было показано, что бактерии способны естественным возвращение к опухоли при системном введении в результате высокого уровня репликации на местном уровне, либо на внешнем (не-инвазивных видов) или в опухолевых клетках (патогенов...

<table border="1"><tbody><tr><td> Название реагента </td><td> Компания </td><td> Номер в каталоге </td><td> Комментарии </td></tr><tr><td> 4T1 клеточной линии </td><td> ATCC </td><td> CRL-2539 </td><td> Сингенных модели рака молочной железы, полученных от спонтанно возникающих BALB / C опухоли молочной железы </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D6429 </td><td> Дульбекко изменения Орла Средний </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D8537 </td><td> Фосфатным буферным раствором </td></tr><tr><td> Xenogen ИВИС </td><td> Суппорт Life Sciences </td><td></td><td> ИВИС 100 для 2D изображений; ИВИС Spectrum для 3D. </td></tr><tr><td> Лурия бульон Миллер (LB) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> L2542 </td><td> Рост средой для E. палочки </td></TR&gt; <tr><td> Эритромицин </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> E5389 </td><td> Антибиотик </td></tr><tr><td> Стрептомицин </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S9137 </td><td> Антибиотик </td></tr><tr><td> MF1nu/nu мышей </td><td> Харлан (UK) </td><td> 069 (ню) / 070 (Nu / +) </td><td> Hsd: Бестимусным Nude-Foxn1nu </td></tr><tr><td> BALB / C мышей </td><td> Харлан (UK) </td><td> 066 </td><td> Гаплотипа: H-2 D </td></tr><tr><td> Желудочный зонд иглы </td><td> Vet-Tech Solutions (UK) </td><td> DE009 </td><td> 22G х 38 мм прямой зонд иглы </td></tr><tr><td> Шприц для инъекции IV </td><td> BD Biosciences </td><td> 309309 - 1 мл </td><td> Инсулиновый шприц с 28 х G ½ дюйма микро-тонкой иглой IV. </td></tr><tr><td> Шприц для инокуляции опухоли </td><td> Braun </td><td> 9161376V </td><td> Omnifix 26 G х иfrac12; дюймовые иглы </td></tr></tbody></table>

bioluminescent Бактериальные изображений<em&gt; В vivo</em

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Это видео описывает использование всего тела bioluminesce томография (BLI) для изучения бактериальных торговле живыми мышами, с акцентом на использовании бактерий в генной и клеточной терапии рака. Бактерии, присутствующие привлекательной класс вектор для лечения рака, обладающие природной способностью расти преимущественно в опухоли после системного введения. Бактерии инженерии, чтобы выразить кассеты люкс гена разрешения BLI обнаружения бактерий и одновременно опухоли сайтов. Расположение и уровень бактерий в опухоли с течением времени могут быть легко рассмотрены, визуализировали в двух или трех измерениях. Метод применим для широкого спектра бактериальных видов и типов опухолей ксенотрансплантата. В данной статье описывается протокол для анализа биолюминесцентного бактерий в подкожной опухоли мышей подшипника. Визуализация синантропных бактерий в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) от BLI также описан. Это мощный и дешевый, изображений в реальном времени стратегия предTS идеальный метод для изучения бактерий в естественных условиях в контексте исследования рака, в частности генной терапии и инфекционных заболеваний. Это видео описывает процедуру для изучения люкс с метками E. палочки в живых мышей, что свидетельствует о пространственной и временной отсчет достижимо использованием BLI с системой ИВИС.

В этой статье описывается управление<em&gt; Люкс-отмеченных</em&gt; Бактериями мышей и последующее<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Анализ с использованием ИВИС биолюминесценции изображений.

Bioluminescent Бактериальные изображений<em&gt; В Vivo</em

В данном видео описывается применение биолюминесцентной визуализации (BLI) всего тела для изучения перемещения бактерий в живых мышах с акцентом на использование...

В данном видео описывается использование биолюминесцентной визуализации всего тела для изучения перемещения бактерий в живых мышах с акцентом на обнаружение роста бактерий внутри ксенографтов опухолей. Бактерии представляют собой перспективный класс векторов для терапии рака, так как обладают естественной способностью преимущественно расти в опухолях после внутривенного введения, развиваясь либо вне, либо внутри опухолевых клеток. Бактериальные штаммы, модифицированные для экспрессии генной кассеты lux, облегчают обнаружение как самих бактерий, так и опухолей. Ценность неинвазивного лонгитюдного мониторинга бактериальных штаммов in vivo общепризнана, так как это позволяет сократить количество используемых животных и получить более статистически значимые данные по сравнению с терминальными анализами.Данная процедура включает индуцирование подкожных опухолей у мышей. Опухолям дают развиться, осуществляя их мониторинг в течение определенного времени. Для проведения описанных здесь экспериментов бактерии вводят в организм мышей, после чего в установленные временные точки проводят биолюминесцентную визуализацию.Подкожные опухоли индуцируют у мышей либо с полноценным иммунитетом, либо с тимическим дефицитом. В зависимости от выбора ксенографта, бактерии типа Lux соответствующего вида, например e coli, выращивают в виде ночных культур. Бактериальные клетки промывают и ресуспендируют до нужной концентрации для внутривенного введения.10⁶ бактериальных клеток в объеме инъекции 100 µL используются стандартно. Для лечения подготавливают мышей с подкожными опухолями объемом обычно 100 mm³.С помощью иглы шприца 29-го калибра бактериальная суспензия вводится в латеральную хвостовую вену. Со временем бактерии преимущественно реплицируются внутри опухолевой массы. Интратуморальные бактерии продолжают реплицироваться в течение нескольких недель и обнаруживаются с помощью ВУЗИ-визуализации в период от трех до шести дней.После введения препарата для биолюминесцентной визуализации живых анестезированных мышей помещают в камеру IVIS при температуре 37 °C. При необходимости можно проводить визуализацию нескольких мышей одновременно. Фотографические и люминесцентные изображения регистрируют с помощью охлаждаемой CCD-камеры с использованием соответствующих настроек программного обеспечения.В зависимости от используемого устройства визуализации может быть проведен двух- или трехмерный анализ. Достигается устойчивая и линейная зависимость между количеством бактерий внутри опухоли и уровнем вырабатываемого света, что позволяет надежно оценивать количество бактерий in vivo. Бактерии, экспрессирующие люциферазу (LX), также могут быть обнаружены глубоко внутри организма.Визуализация кишечно-колонизирующих комменсальных бактерий, экспрессирующих Lux, проводилась в течение нескольких недель. Последующее введение через каваж дополнительно продемонстрировало полезность биолюминесцентной визуализации для анализа Lux-экспрессирующих бактерий в лабораторных животных.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Иммунология и инфекции

Методы визуализации биолюминесценции бактериальных инфекций в живых животных, описаны. Патогенные изменен, чтобы выразить люциферазы позволяет оптическим целого изображения тела инфекций у животных. Экспериментальные модели на животных могут быть инфицированы люциферазы выражения патогенов и в результате течения заболевания визуализированы в реальном времени биолюминесценции изображений.

Использование люциферазы в Изображение Бактериальные инфекции у мышей

Здесь мы опишем методы построения, визуализации и количественной оценки биолюминесцентного реакции как светлячков и Renilla люциферазы ферментов выражена в метастатических клеток рака молочной железы в процессе их роста и...

В естественных условиях двойного основания Bioluminescent изображений

Источник: de Vries, C. R. и др., Модель отложенной инокуляции хронической инфекции раны Pseudomonas aeruginosa . J. Vis. Exp. (2020).В этом видео демонстрируется метод биолюминесцентной визуализации для мониторинга прогрессирования бактериальной инфекции в модели живой мыши. Патогенные бактерии, сконструированные с помощью репортерской системы luxABCDE , излучают свет в месте заражения, позволяя визуализировать метаболически активные бактерии. Снимая мышь со временем, исследователи могут...

Биолюминесцентная визуализация бактериальных инфекций у мышей

Источник: Valentine, M. E. и др., Генерация мутантов с удалением генов в системе в Pseudomonas aeruginosa и тестирование ослабления вирулентности в простой модели инфекции на мыши. J . Vis. Exp. (2020)В этом видео демонстрируется использование биолюминесцентного метода визуализации для мониторинга бактериальной инфекции в модели живой мыши. Последовательная биолюминесцентная и рентгеновская визуализация позволяет в реальном времени визуализировать и анатомически локализовать инфекцию,...

Визуализация бактериальной инфекции в модели мыши с использованием биолюминесценции в реальном времени

Источник: Wang, Y. и др. In vivo Исследование антимикробной терапии синим светом при мультирезистентных ожоговых инфекциях Acinetobacter baumannii с использованием биолюминесцентной визуализации. J. Vis. Exp . (2017)В этом видео демонстрируется процедура визуализации ожоговых ран у мышей, вакцинированных Acinetobacter baumannii с биолюминесцентным опероном. В ней показано, как окисление субстрата, катализируемое люциферазой, производит свет, пропорциональный нагрузке бактерий, что позволяет...

Биолюминесцентная визуализация ожогов от зараженных Acinetobacter baumannii у мышей

Комбинированный оптический и μCT изображений в мышиной модели ортопедической инфекции имплантата, используя биолюминесцентное инженерии штамм золотистого стафилококка, при условии, возможность неинвазивного и продольно контролировать динамику бактериальной инфекции, а также соответствующий воспалительную реакцию и анатомические изменения в кости.

Комбинированные<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Оптические и μCT изображений на монитор инфекции, воспаления, и кости Анатомия в инфекции Ортопедическая Implant у мышей

Инфекции, вызванные штаммами бактерий с множественной лекарственной устойчивостью (MDR), стали серьезной угрозой для общественного здравоохранения, что требует разработки альтернативных методов лечения. Мы представляем протокол для оценки эффективности антимикробной терапии синим светом (aBL) инфекций MDR Acinetobacter baumannii при ожогах мышей с помощью биолюминесцентной визуализации.

В Vivo Исследовании антимикробной Синяя Светотерапии для Полирезистентного Acinetobacter baumannii Ожог инфекции с помощью биолюминесценции визуализации

Представлен подробный протокол мыши модели для энтерогеморрагические E. coli (EHEC) колонизации с помощью биолюминесценции меченых бактерий. Обнаружение этих биолюминесцентных бактерий неинвазивные в vivo imaging системы в живых животных можно заранее нашего нынешнего понимания особенностей ЭГКП колонизации.

Обнаружение энтерогеморрагические Escherichia Coli колонизации в мышиных принимающей системой неинвазивные в Vivo биолюминесценции

Биолюминесцентных бактерий регулируют света производства через различные механизмы, например кворума. Этот новый метод позволяет на месте расследования биолюминесценции и корреляции светового излучения в плотность клеток. Искусственные биолюминесцентных Escherichia coli система позволяет характеристика опероны люкс , Люкс белков и их взаимодействие.

На месте Измерение и корреляции плотность клеток и светового излучения биолюминесцентных бактерий

Этот протокол описывает создание опухолевой мыши модели для мониторинга прогрессирования опухоли и ангиогенеза в режиме реального времени двойной биолюминесценции изображений.

Двойное биолюминесценционное изображение прогрессирования опухоли и ангиогенеза

Представленный здесь протокол подробно описывает шаги по проведению исследований эффективности препарата на биолюминесцентной модели инфекции Trypanosoma cruzi с акцентом на сбор, анализ и интерпретацию данных. Также предусмотрены процедуры устранения неполадок и контроля качества для минимизации технических проблем.

Демистификация биолюминесцентной визуализации in vivo мышиной модели мышиной болезни Шагаса для исследований эффективности лекарств

Изучите биолюминесцентную визуализацию для отслеживания бактерий в опухолях у мышей. Этот метод позволяет неинвазивно мониторить рост бактерий внутри ксенотрансплантатов опухолей в реальном времени.

Bioluminescent Бактериальные изображений

Больше видео