Долгосрочные, Высокое разрешение конфокальной микроскопии Lapse время Arabidopsis семядолей Эпидермиса во время прорастания

Целью данного эксперимента является визуализация ранних событий развития эпидермиса после прорастания семян на клеточном уровне. Это достигается путем предварительного удаления семенной оболочки, чтобы обеспечить четкий обзор косина в качестве второго шага. Козоны крепятся под слоем агаровой среды, которая иммобилизует их и поддерживает их развитие. Последующая покадровая визуализация проводится в течение нескольких дней, чтобы наблюдать за ростом и делением эпидермальных клеток in vivo.

Были получены результаты, которые показывают динамическую экспрессию генов и локализацию белка на основе видимой флуоресценции. Основное преимущество этой методики перед существующими методами, такими как неподвижные изображения окрашивания Гаса или слияния GFP, заключается в том, что она показывает динамическое движение белков во время деления и дифференцировки клеток. Семена Arabidopsis для этого эксперимента стерилизуют в растворе для стерилизации семян, изготовленном из 33% бытового отбеливателя, и 0,1% Triton X 100 помещают семена, несущие нужные флуоресцентные репортерные конструкции и генотипы, в пробирку объемом 1,7 миллилитра и наносят один миллилитр стерилизационного раствора, инкубируют на мутаторе в течение 15 минут.