MR молекулярной визуализации рака простаты с небольшой молекулярной CLT1 пептида целевых Агента Contrast

Общая цель этой процедуры заключается в проведении молекулярной визуализации рака предстательной железы у мышей с использованием безопасного и эффективного пептидного контрастного вещества с магнитным резонансом или МРТ. Молекулярная визуализация. Во-первых, успешное развитие и правильный размер ортотопических опухолей предстательной железы проверяются на мышиной модели опухоли предстательной железы. Затем опухолевая специфичность пептида подтверждается с помощью флуоресцентной визуализации и гистологии на мышиной модели ортотопического рака предстательной железы.

Затем целевой или контрольный агент вводится после получения исходного МР-изображения перед инъекцией. Наконец, МРТ-изображения с контрастным усилением получаются в разные моменты времени в течение 30 минут. В конечном счете, могут быть получены результаты, которые показывают, что RI-контрастное вещество, нацеленное на CLT с одним пептидом, может быть эффективным для специфического обнаружения опухолей предстательной железы с помощью методов молекулярной визуализации.

Основное преимущество молекулярной МРТ с таргетными контрастными веществами MI по сравнению с существующими технологиями, такими как МРТ и МРТ домашних животных с клиническими контрастными веществами, заключается в том, что эта технология может обеспечить эффективные, улучшенные изображения опухолей предстательной железы с высоким разрешением в качестве единого метода визуализации. Мы продемонстрируем здесь. Эффективная молекулярная МРТ опухоли предстательной железы может быть достигнута путем выбора обильного биомаркера во внеклеточной метрике опухоли и использования низкомолекулярных целевых контрастных агентов Mi Хорошие навыки в обращении с животными и канюляции хвоста и МРТ также имеют решающее значение для получения высококачественных МРР-изображений опухолей Используя стандартный синтез твердофазных пептидов, синтезируйте, а затем характеризуйте моноамидные комплексы GD DOTA, как показано здесь, после создания опухоли предстательной железы PC 3G FP Животная модель, согласно текстовому протоколу, обезболивает мышей 2%-ным изофтором в кислороде в индукционной камере и выполняет зажим хвоста для проверки седации.

Затем используйте флуоресцентный томограф, чтобы проверить наличие опухолей у мыши. Введите 10 моль на мышь техасских пептидов с красной мечкой мышам с опухолями. Через два часа, после принесения мышей в жертву из-за вывиха шейки матки, соберите опухоль и основные органы и немедленно сделайте визуализацию с помощью флуоресцентного томографа.

Затем, после фиксации опухолевых тканей формалином и криосекции на пять микрометровых срезов, используйте каплю DPI, содержащую монтажную среду, для крепления ткани. Примерно через четыре недели после инокуляции опухоли должны вырасти от 0,3 до 0,6 сантиметра в диаметре. После обезболивания мыши 2%-ным изофтором в кислороде в индукционной камере нанесите офтальмологическую мазь для поддержания влажности в глазах мыши и выполните щипку хвоста для проверки седации.

Далее вставьте иглу 30 калибра в трубку длиной один метр, заполненную гепаринизированным физиологическим раствором. Затем поместите самодельный катетер в вену хвоста мыши с помощью МРТ-сканера 70 с объемной радиочастотной катушкой. Поместите мышь в магнит, затем прикрепите носовой конус и введите 1,5% изоизофтора в кислород для контроля скорости и глубины дыхания.

Поместите датчик дыхания, прикрепленный к системе мониторинга, на брюшной полости животного. Поддерживайте температуру тела животного на уровне 37 градусов по Цельсию с помощью постоянной подачи горячего воздуха в магнит. Теперь поместите животное на МРТ, чтобы определить место расположения опухоли.

Начните с изображений сагиттальных сечений, используя локализующую последовательность. Затем используйте последовательность подавления жира с двумя DT и одним взвешенным градиентом, чтобы получить 2D-аксиальные изображения для контрастного усиления или CE MRI. После получения исходных изображений опухоли начинают вводить таргетное средство или средство контроля в дозе 0,03 миллимоль гадолиния на килограмм

Продолжайте получать изображения МРТ CE в разные моменты времени в течение 30 минут, чтобы полностью охватить и получить изображения всей опухоли. Соберите 12 срезов после завершения визуализации, усыпьте животное углекислым газом и проанализируйте и обработайте изображения в соответствии с текстовым протоколом, как показано здесь, визуализация Maestro подтверждает сильное специфическое связывание техасского CLT one с красной меткой CLT one с опухолью GFP PC 3 с небольшим связыванием с нормальными органами и тканями. В то время как неспецифический скремблированный пептид демонстрирует очень слабое связывание с опухолью.

На этом рисунке показаны типичные T one взвешенные изображения до и после инъекции с контрастным усилением. Таргетный агент приводит к большему и более длительному увеличению опухолевой ткани по сравнению с нетаргетными скремблированными агентами. Усиление контрастного вещества в мочевом пузыре постепенно увеличивается с течением времени, что указывает на то, что контрастные вещества были выведены через почечную фильтрацию.

Количественный анализ сигналов показывает, что целевой агент вызывал более значительное усиление сигнала в опухолевой ткани, чем контрольный агент в течение 30 минут. Исследование биораспределения показывает, что препарат имеет минимальную задержку гадолиния в основных органах и тканях через два дня после инъекции. Наши предварительные данные показывают, что таргетные контрастные вещества для МРТ могут быть специфически доставлены в опухоль в относительно низкой дозе.

Да, мы продемонстрировали здесь эффективность молекулярной МРТ рака предстательной железы путем выбора соответствующего обильного биомаркера в микроокружении опухоли и использования низкомолекулярного целевого контрастного вещества для МРТ. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее понимание того, как разработать правильную технику для эффективного молекулярного ИМ или для небольших злокачественных опухолей на животных моделях с использованием целевого контрастного агента ИМ.