Отслойки Модель в Грызуны по субретинальной инжекции гиалуронат натрия

Общей целью этой процедуры является создание экспериментальных отслоек сетчатки с воспроизводимой и устойчивой высотой отслойки без субретинального кровоизлияния. Это достигается с помощью первой инции, височной конъюнктивы в заднем лимбе для отделения конъюнктивы от склеры. На втором этапе кончик иглы 30 калибра используется для выполнения самогерметизирующегося склерального разреза и пункции роговицы.

Затем в субретинальное пространство вводится моча натрия, чтобы отделить нейросенсорную сетчатку от основного пигментного эпителия сетчатки. На заключительном этапе цианоакрилатный клей помещается на склеральную рану, и конъюнктива возвращается в исходное положение, снижая риск утечки натрия из мочи. В конечном итоге, глазное дно исследуется с помощью покровного стекла, чтобы подтвердить создание болюсной отслойки сетчатки без субретинального кровоизлияния.

Существующие методы снижения отслойки сетчатки у грызунов могут привести к вариабельности роста и стойкости отслойки сетчатки, что приводит к непоследовательным показателям смертности клеток. С помощью этой методики можно создать воспроизводимую буллезную и стойкую отслойку сетчатки с уменьшенным риском развития субретинального геморроя, что позволяет создать надежную модель отслойки сетчатки у грызунов. Экспериментальная отслойка сетчатки у грызунов относительно проста в исполнении, имеет разумный временной ход и очень схожа с болезнью человека.

Таким образом, это отличная модель для изучения механизмов гибели фоторецепторных клеток и методов лечения для предотвращения потери зрения. При дегенеративных заболеваниях сетчатки Зная, что варьирует гибель фоторецепторных клеток в отслоившейся сетчатке, предпочтительно создать воспроизводимую отслойку без субретинального кровоизлияния. Это связано с тем, что повышенная продолжительность отслойки сетчатки или возникновение субретинального кровоизлияния могут повлиять на гибель фоторецепторных клеток.

После обезболивания восьминедельной мыши подстригите усы животного, затем расширьте зрачок раствором, содержащим 5% фенилрина и 0,5% тропии под хирургическим микроскопом. Разрежьте животные кончики, примените местную анестезию, 0,5% пропан гидрохлорид офтальмологический раствор. Поместите мышь в боковое положение носом к хирургу, а затем проведите височную конъюнктиву в задней части лимба, отделив конъюнктиву от склеры с помощью пары щипцов.

Возьмитесь за конъюнктиву в лимбе для управления глазом. Затем держа в руках иглу 30 калибра скосом, направленным вверх. С помощью кончика иглы проведите туннель через склеру, проникая склерой в сосудистую оболочку, не проникая в сетчатку глаза.

Далее, держа иглу 30 калибра параллельно радужной оболочке, проколите роговицу для снижения внутриглазного давления. Теперь направляем скос вниз. Введите иглу 33 калибра, соединенную со шприцем Hamilton объемом 10 микролитров, в субретинальное пространство и введите 3,5 микролитра натрия в мочеиспускание.

Это приведет к отделению примерно 50% нейросенсорной сетчатки от основного пигментного эпителия сетчатки. С помощью щипцов надавите на роговицу вокруг прокола роговицы, чтобы водянистая влага вытекла из прокола роговицы, а затем используйте хирургическое копье из целлюлозы, чтобы подтвердить отсутствие утечки из склеральной раны, чтобы снизить риск утечки мочи с натрием. Нанесите цианоакрилатный клей на склеральную рану, а затем приложите конъюнктиву в исходное положение.

Используйте покровное стекло, чтобы проверить глазное дно и подтвердить создание болюсной отслойки сетчатки без субретинального кровоизлияния. Наконец, нанесите мазь с антибиотиком на глаз, чтобы снизить риск заражения. Держите мышь на грелке, чтобы предотвратить понижение температуры тела.

Вследствие пониженного артериального давления. Верните животное обратно в клетку после того, как оно очнется от наркоза. Для оценки стойкости отслойки сетчатки, выполненной по этому протоколу, на третий, седьмой и 14-й день после индукции отслойки были сделаны криосекции.

Для каждой временной точки использовались шесть глаз, гематин и эозин. Окрашивание использовалось для визуализации срезов, каждый из которых имел болюс. Отслоение сетчатки по приближению к хрусталику.

Ни в одном из глаз не было никаких признаков инфекции или повреждения хрусталика. После освоения эта операция может быть выполнена примерно за пять минут При попытке выполнения этой процедуры важно выполнять каждый шаг осторожно, чтобы не вызвать утечку натрия, высокоосвещенное субретинальное кровоизлияние или повреждение хрусталика, которые могут повлиять на то, какая рецепторная клетка в отслоившейся сетчатке. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как создать экспериментальную отслойку сетчатки у грызунов с воспроизводимой и устойчивой высотой отслойки без субретинального кровоизлияния.