16 октября 2013 г.
За последние несколько лет, новые эндоскопы поколения появились в качестве важных диагностических исследований СПИДа для оценки мышиный колит и колоректального опухолей. Мы представляем здесь подробный протокол для эндоскопической оценки воспаления и колоректального опухолей у мышей, а также в качестве нового балльной системе, которая использует десятичные идентификаторы для документирования эндоскопическое тяжесть колита и колоректального опухолей.
Привет. Я Томохиро Кани, приглашенный специалист по pH из Университета Nintendo в Токио, и я Фабио Элли, директор Исследовательского центра здоровья пищеварительной системы, случай из Медицинской школы Университета Вестерн Резерв. В этом видео мы опишем нашу методику проведения колоноскопии у мышей. Подчеркните важность знакомства с нормальной эндоскопической анатомией.
Опишите, как эффективно устранять неполадки во время эндоскопии, чтобы свести к минимуму травмы и артефакты изображения. И, наконец, опишите нашу систему оценки воспаления кишечника в модели колита и рака, связанного с колитом. Благодарю Вас за внимание.
Во-первых, настройте эндоскопическую систему при подключении эндоскопа к центру видеосистемы и источнику света. Простерилизуйте эндоскоп и прикрепите шприц для инсуффляции воздуха. Затем включите систему и отрегулируйте баланс белого вместе с животным.
Под надлежащим обезболиванием и фиксацией приступают к эндоскопическому исследованию. Образцы биопсии могут быть получены по мере необходимости. После осмотра согрейте мышь светом для восстановления в конце.
Объяснена система баллов для оценки воспаления толстой кишки и ассоциированного рака толстой кишки. Настройка эндоскопической системы. Эндоскопическая система включает в себя центр видеосистемы, ксеноновый источник света и видеорегистратор.
Для колоноскопии у мышей мы используем уретероскоп человека. Наш прицел URFV представляет собой гибкий видеоприцел, в котором используется ПЗС-сенсор. Внешний диаметр вводимой трубки составляет 3,3 миллиметра, а дистальный конец — 2,8 миллиметра в диаметре.
Для начала прикрепите прицел к центру видеосистемы и источнику света. Затем простерилизуйте эндоскоп и поверхность линзы с помощью 70% этанола. Затем к рабочему каналу приложите трехмиллиметровый шприц.
Это используется для регулирования количества внутрипросветного воздуха с помощью инсуффляции или аспирации. Включите главный выключатель и настройте баланс белого. Также не забудьте настроить в NBI режим Two, обезболив мышку.
Во-первых, я продемонстрирую ингаляционную анестезию: используя изофтор, мы используем от 4 до 5% изофтора для индукции. После того как мышь перестанет двигаться, уменьшите концентрацию до поддерживающей дозы от одного до 2%Ограничьте мышь на столе, заклеив тейпом хвост и нижние конечности. Тейпирование хвоста особенно важно для того, чтобы мышь оставалась неподвижной во время осмотра.
Также внутрибрюшинное введение трибромо. Для анестезии можно использовать этанол. Три. Эндоскопические перианальные поражения не являются частью эндоскопической оценки, но являются важным открытием и должны наблюдаться до введения и не должны путаться с травматическим кровотечением.
Перед введением покройте эндоскоп хирургической смазкой, не покрывайте ПЗС-сенсор. Введите прицел через анальное отверстие. Это первоначальное введение должно быть как можно более щадящим, так как слепое введение может повредить слизистую оболочку толстой кишки.
Включите индикатор и начните запись. Медленно и осторожно надавите на воздушный шприц, чтобы получить поле зрения. Слишком сильное вдыхание воздуха может убить ротовую полость.
О наличии спонтанного кровотечения следует судить при введении эндоскопа в прямую кишку или угол толстой кишки. Управление регулирует вид по вертикали, а управление крутящим моментом предназначено для горизонтальной регулировки. Координация между этими двумя элементами управления очень важна.
Соблюдайте прозрачность. В нормальной толстой кишке стенка прозрачная с нормальной сосудистой проницаемостью и без какой-либо толщины. Прозрачность определяется как трансмуральная видимость сосудов или наружных органов.
Повторяющиеся движения по введению и вытягиванию помогают оценке в нормальной толстой кишке. Во время обследования видны как мелкие, так и крупные сосуды. При необходимости вы можете сделать снимки или биопсию.
Проверьте наличие контактного кровотечения. При изъятии эндоскопа не стоит выскабливать слизистую намеренно. В узкополосном режиме визуализации особое внимание уделяется тонким структурам сосудов в слизистых оболочках.
Прямая кишка окружена мышцами, в то время как толстая кишка не фиксируется окружающими тканями. Из-за этой анатомической разницы в прямой кишке не видны внешние внутренние органы. Фекальные гранулы иногда присутствуют близко к анальному отверстию.
Они могут быть удалены с помощью инсуффляции воздуха, однако иногда они могут сохраняться и препятствовать эндоскопическому обзору. В этих случаях мы будем использовать до одного миля клизмы PBS для промывания стула. Кал обычно выводится через пару минут.
Размытое изображение, вызванное наличием мазков на линзе, также является распространенной проблемой, особенно в случае колита или кровотечения. В данной ситуации мы попробовали чистить линзу с помощью вдыхания воздуха. Эта процедура может быть успешной для очистки хрусталика без извлечения эндоскопа.
Перистальтическое движение является одной из нормальных физиологических активностей кишечника. Поскольку инсуффляция воздуха не способствует расширению просвета во время перистальтики, следует подождать, пока перистальтическая волна не пройдет. В-четвертых, образцы биопсии для биопсии получают с помощью гибких щипцов для биопсии.
Чашки открываются и закрываются за ручку. Вставьте щипцы в рабочий канал. Будьте осторожны, чтобы не проколоть кишечник.
Откройте чашки подходящего размера и поместите кончик на интересующую область. Аккуратно закройте чашки и сильно потяните. Удалите образец путем промывки подходящим раствором.
Номер пять, восстановление. После обследования согрейте мышь до тех пор, пока она не восстановится. Мы используем электрический свет для согревания шести забиваний при воспалении толстой кишки.
Наша система оценки состоит из четырех параметров: одно перианальное поражение, два, прозрачность стенки толстой кишки, три кишечных кровотечения и четыре очаговых поражения. Каждый параметр можно оценить от нуля до трех. Максимальный общий балл — 12.
Кроме того, мы включили шкалу десятичных единиц, которые можно использовать для выделения конкретных эндоскопических результатов. Подробное описание каждого параметра доступно в сопроводительной рукописи. Вот резюме номер один, перианальное поражение.
Этот признак следует наблюдать перед введением эндоскопа в прямую кишку. Это позволяет избежать путаницы с травматическим кровотечением. Нулевой балл является нормальным.
Оценка два – за кровянистые выделения. Три балла относятся к грануляционной ткани или пролапсу прямой кишки. Второе. Прозрачность. Это способность визуализировать кровеносные сосуды в стенке толстой кишки и окружающих ее внутренних органах.
Нулевой балл указывает на то, что кровеносные сосуды хорошо видны. Забейте один балл. Мелкие сосуды частично невидимы, а вот крупные суда видны.
Забей два. Малые суда вообще невидимы, и даже большие сосуды не прозрачны. Тройка такая же, как и в двойке и утолщенный вид толстой кишки. Три.
Кровотечение, спонтанное кровотечение следует дифференцировать от контактного кровотечения. Судите об этом соответственно. Первая оценка указывает на то, что контактное кровотечение индуцируется щадящей стандартной процедурой определения области зрения.
Самопроизвольное кровотечение при попадании в толстую кишку. Номер четыре, очаговое поражение. Эти данные отражают местные условия, которые часто сопровождают воспаление.
Забейте один балл. Бляшка представляет собой плоское возвышение, покрытое на первый взгляд нормальной слизистой оболочкой. Забей два.
Эрозия в области красного конца оценивается в три балла. Изъязвительные эрозии, покрытые фибриноподобным материалом. NBI полезно признать это.
Десятичные дескрипторы. Мы добавили три дополнительных параметра и присвоили им десятичные баллы.0.1. По шкале стриктуры 0,2 балла для разрыва кишечника или перфорации, 0,5 балла по опухолевому поражению, случай проявления первый.
Мышь с инфекцией Clostridium difficile. Он имеет нормальную прозрачность, но раннюю эрозию. Видны небольшие эрозии, но фоновая слизистая в норме.
При внимательном наблюдении выявляется небольшой отек вокруг этого поражения. Тоже. В других частях нет признаков, указывающих на наличие воспаления. Случай второй.
Мышь с DSS индуцировала колит на диете с высоким содержанием жиров. В этом случае наблюдаются непрозрачность, спонтанные кровотечения и стриктуры. Вначале наблюдается кровотечение.
Она спонтанна. Вот такая стриктура. Он не расширяется за счет инсуффляции воздуха, и эндоскоп не может пройти через него.
Фоновая слизистая оболочка покраснела и утолщена. Также то тут, то там происходит контактное избиение. Это свидетельствует о хрупкости корпуса толстой кишки. Три.
У мыши наблюдается хронический колит DSS, непрозрачность, толщина стенок и опухолевидные выступы. Как правило, видна толщина стенки с белым воротником, и стенка не прозрачна. Это изъязвление вокруг сгибателя селезенки, выступы примечательны.
Случай четвертый. Мышь с колитом, ассоциированным с раком, индуцированным азоксиметаном и DSS. Имеет множественные опухоли и изъязвления.
Большое плоское выпячивающееся поражение находится на правой стене, а в немного более проксимальной области видно еще одно поражение более низкого плоского типа. Структура поверхности, по-видимому, отличается от нормальной слизистой. NBI полезен для выявления и диагностики при таком поражении.
В прямой кишке имеется географическое большое изъязвление, покрытое фиброзным материалом. Спасибо за просмотр.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данной статье представлен подробный протокол проведения колоноскопии у мышей с акцентом на оценку воспаления кишечника и колоректальных опухолей. Авторы представляют новую систему оценки для документирования степени тяжести колита и опухолей с использованием десятичных идентификаторов.
Валидированная эндоскопическая оценка на мышиных моделях позволяет проводить воспроизводимый количественный анализ степени тяжести колита и колоректальных опухолей, что напрямую способствует валидации мишеней и снижению механистических рисков в исследованиях заболеваний желудочно-кишечного тракта. Интеграция оценки воспаления и опухоли в единый рабочий процесс повышает прогностическую достоверность и трансляционную преемственность от этапа первичного поиска до доклинических исследований. Стандартизированные системы оценки облегчают сопоставимость данных между исследованиями и принятие решений на уровне портфеля в биофармацевтических исследованиях и разработках.
Данная валидированная система эндоскопического скоринга применяется на этапе от первичных открытий до доклинических исследований, обеспечивая проверку гипотез, оценку перспективных соединений и оптимизацию трансляционных моделей при изучении заболеваний желудочно-кишечного тракта.