29 июня 2014 г.
Мы описываем процедуру поэтапного создания перегрузки давления и гипертрофию левого желудочка у крыс Вистар сужением восходящей аорты с помощью небольшого металлического клип. Эта модель широко используется для изучения изменений ремоделирования во гипертрофии сердца и для выявления и оценки стратегий для регрессии таких изменений.
Здравствуйте, я Аджи Кумар Гс из отдела биологии сердечно-сосудистых заболеваний Раджа Ганди, центра биотехнологии Индии. Я работаю под руководством process karta и в этом видео мы покажем пошаговую процедуру построения восходящего I ОТЭ у крыс. В нашей лаборатории мы используем эту годовую модель для изучения патофизиологии и основных молекулярных механизмов гипертрофии сердца и прогрессирующей сердечной недостаточности.
Мы также используем эту модель для изучения легочной гипертензии, связанной с левой сердечной недостаточностью. Итак, давайте начнем И эстетизировать животное и держать его в лежачем положении. Выполните эндотрахеальную интубацию, сделав половинчатый разрез между двумя кольцами трахеи и вставив канюлю трахеи, которая, в свою очередь, подключена к аппарату искусственной вентиляции легких для грызунов.
Затем сделайте надрез кожи длиной около двух сантиметров в левой области груди между вторым и третьим ребрами и отделите мышечные слои. Визуализировать сужение йоты восходящего отдела йоты следует с помощью титанового зажима небольшого размера с аппликатором, противопоставить ребра и затем зашить мышечные слои и кожу по прерывистому рисунку. После удаления эндотрахеальной трубки закройте мышцу трахеи, слои и кожу и дайте животному восстановиться.
Процедура была проведена после получения одобрения от институционального комитета по этике животных. Перед операцией продезинфицируйте операционное поле 70% спиртом и держите грелку в асептическом состоянии. Держите аппарат искусственной вентиляции легких и анестезиологический аппарат для грызунов наготове к операции.
Стерилизуйте хирургические инструменты путем автоклавирования. Основными хирургическими инструментами для восходящей Iotic констрикции являются стерильные перчатки, щипцы для большого пальца, ножницы, хирургические лезвия, небольшие по размеру титановые зажимы и аппликаторные щипцы артерии с марлей на случай кровотечения, иглодержатель из пролинового шовного материала, плетеный шелковый шов и игла. Выдержите крысу под зонтиком антибиотика в течение 24 часов и эстетизируйте крыс в индукционной камере с 3%-ным фтором ISO, смешанным со стопроцентным кислородом.
Снимите шерсть с декольте и левой области груди крысы и держите животное сверху. Грелка. Поддерживайте анестезию с помощью 1,5%-ного рефлекса проверки фтора ISO для подтверждения успешной анестезии.
Продезинфицируйте операционную область раствором повидон-йода с последующим добавлением 70% спирта. Повторите процедуру три раза. Наложите на животное стерильную простыню, обнажая только место операции.
Сделайте разрез кожи параллельно трахее и отделите подлежащие ткани. Для того, чтобы обнажить трахею. Наложите под трахею завязку из шелковой нити и аккуратно поднимите ее вверх.
Сделайте половинчатый разрез между двумя хрящевыми кольцами и вставьте канюлю трахеи. Подключите канюлю трахеи к аппарату искусственной вентиляции легких для грызунов. Аппарат искусственной вентиляции легких должен быть настроен на частоту дыхания 50 вдохов в минуту.
Приливный объем 1,7 мл и время вдоха 0,6 секунды. Сделайте надрез в левой области грудной клетки между вторым и третьим ребрами. Межреберные мышцы должны быть разделены слой за слоем.
Следует соблюдать осторожность, чтобы избежать травмирования легких при выполнении разреза между ребрами. После втягивания ребер осторожно найдите восходящую часть йоты, мягко манипулируя жировой тканью. Стрелка указывает на возрастающую часть йоты.
Поместите титановый зажим небольшого размера вокруг восходящей йоты с помощью аппликатора, тем самым сужая йоту на 50-60% от исходного диаметра. После I отической констрикции переместите сердце и приблизьте ребра пролиновым швом Одновременно приостановите аппарат искусственной вентиляции легких примерно на две-четыре секунды, чтобы снова накачать легкие. Нанесите на мышцы слоями с пролином, затем нанесите на кожу шелковые швы в прерывистом узоре швов.
Постепенно снижайте частоту дыхания, установленную на аппарате искусственной вентиляции легких, и наблюдайте за животным на предмет спонтанного дыхания. Удалите трахеальную канюлю после того, как восстановится спонтанное и регулярное дыхание. Теперь анестезия поддерживается через носовой конус.
Закройте отверстие между кольцами трахеи пролиновыми нитями. Закройте мышечные слои и кожу пролиновыми и шелковыми швами соответственно. Нанесите раствор повидон-йода на операционную область в качестве послеоперационной инъекции обезболивания.
Внутрибрюшинный солевой раствор тремадола может вводиться внутрибрюшинно. При появлении признаков обезвоживания постепенно снижают анестезию в выключенное положение после того, как животное выздоравливает, перекладывают в клетку и вводят амоксициллин перорально в смеси с питьевой водой в течение семи дней. Интенсивность перегрузки давлением, вызванной сужением восходящей йоты, может быть определена путем наблюдения за градиентом давления через Iотический участок сужения с помощью двумерной эхокардиографии.
На левом рисунке показано доплеровское эхо суженной аорты крысы с градиентом давления 63 мм ртутного столба. А правая панель представляет собой фиктивную управляемую крысу без значительного градиента давления по йоте. На верхней панели показана эхокардиография левого желудочка в режиме М у крыс через восемь недель после операции, а на нижней панели представлен фиктивный контроль, толщина межжелудочковой перегородки и толщина задней стенки левого желудочка были значительно увеличены, в то время как внутренний диаметр левого желудочка был значительно уменьшен у крыс, перенесших Iотическую констрикцию.
По сравнению с контрольными группами, перенесшими симуляцию операции, у крыс, перенесших восходящую Iотическую констрикцию после восьми недель операции, наблюдается значительная гипертрофия сердца по сравнению с контрольными группами, подвергшимися симуляции операции. Привет, меня зовут Радж. Здесь мы объясним процедуру сужения восходящей йоты у крысы.
Основным преимуществом данной модели является постепенное развитие гипертрофии сердца и сердечной недостаточности. Аналогично клинической ситуации при хронической гипертензии у этой матери следует проявлять осторожность при применении зажима Titanic для сужения йоты. Самое главное, что применение зажима «Титаник» должно быть достаточным для того, чтобы вызвать критическое сужение левой 20 плюс стресс, но не настолько сильным, чтобы вызвать острый электронный отказ и отек легких, а также следует соблюдать осторожность, чтобы избежать травмирования легких при выполнении разреза между ребрами.
Аппараты ИВЛ должны быть размещены на три-четыре секунды напротив ребер, чтобы снова надуть легкие. Так что спасибо за просмотр этого видео и удачи в ваших экспериментах.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данной статье описывается пошаговая процедура индукции перегрузки давлением и гипертрофии левого желудочка у крыс линии Wistar путем констрикции восходящей аорты. Эта модель широко используется для изучения гипертрофии миокарда и оценки потенциальных стратегий по ее регрессии.
Констрикция восходящей аорты у крыс представляет собой надежную доклиническую модель гипертрофии миокарда, индуцированной перегрузкой давлением, что позволяет снизить механистические риски и провести валидацию мишеней при поиске новых сердечно-сосудистых препаратов. Данная модель обеспечивает прогностическую достоверность трансляционных исследований, воспроизводя постепенное развитие гипертрофии и сердечной недостаточности, наблюдаемых при хронической гипертензии. Ее воспроизводимость и количественные показатели делают ее ценным инструментом для отбора перспективных проектов и проверки терапевтических гипотез на ранних этапах.
Данная модель интегрируется в континуум от поиска до доклинических исследований, связывая ранние механистические исследования с трансляционной валидацией кандидатов в сердечно-сосудистые лекарственные препараты.