Рестриктазой основе Клонирование метод оценки

15.4K просмотров

Цитируется: 12

14:23 мин.

31 августа 2014 г.

10.3791/51506-v

31 августа 2014 г.

15.4K просмотров

Daniel T. Claiborne^*¹ , Jessica L. Prince^*¹ , Eric Hunter¹^,²

¹Emory Vaccine Center at Yerkes National Primate Research Center, Emory University, ²Department of Pathology and Laboratory Medicine, Emory University

^* These authors contributed equally

ВИЧ-1 патогенез определяется как вирусными характеристиками, так и генетическими факторами хозяина. В этой статье мы описываем надежный метод, который позволяет проводить воспроизводимые измерения для оценки влияния вариации последовательности гена gag на способность вируса к репликации in vitro.

Больше видео

Репликативная способность ВИЧ-1

клонирование с помощью рестриктаз

ВИЧ-1 подтипа C

клеточная линия Т-клеток на базе CEM

анализ обратной транскриптазы с радиоактивной меткой

титрование вирусного стока

нест-РТ-ПЦР амплификация

рестрикция BCL One

заражение клеток GXR25

Chapters in this video

0:05

Название

1:53

Амплификация гена Gag ВИЧ-1 из замороженной плазмы инфицированных пациентов

3:29

Клонирование амплифицированных генов Gag в инфекционный молекулярный клон MJ4 подтипа C

6:09

Репликация химер Gag-MJ4 *in vitro* в клетках GXR25 (CEM-CCR5-GFP)

10:06

Анализ обратной транскриптазы в супернатантах клеточных культур

12:11

Результаты: метод клонирования с использованием рестриктаз для оценки способности к репликации *in vitro* химерных вирусов Gag-MJ4 ВИЧ-1 подтипа C

13:44

Заключение