Измерение гладких мышцах функции в выделенную ткань баня приложений к фармакологии исследований

Общая цель этой процедуры заключается в измерении тонуса гладкой мускулатуры. Это достигается путем предварительного рассечения и подготовки тканей. Вторым шагом является установка ткани в изолированную ванну для тканей.

Затем проверяется жизнеспособность ткани и проводятся измерения изометрического сокращения. В конечном счете, препарат для ванны с выделенной тканью используется для проверки функции рецептора, передачи сигналов рецепторов и реактивности гладких мышц. В целом, основными преимуществами данной методики являются гибкость системы, быстрота достижения результата, а также сохранение целой ткани в целости.

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы В любой области, которая использует лекарства для вмешательства в сигнализацию рецепторов или гладких мышц души, есть несколько препаратов, на которые следует обратить внимание. Крайне важно предварительно нагреть тканевую ванну до 37 градусов Цельсия, включив рециркуляционную водяную баню с подогревом. Вода должна поступать в каждый компонент в самом низком заусечковом соединении и вытекать в самом высоком зазубренном соединении.

Каждый компонент должен быть соединен. Преобразователи силы должны быть откалиброваны, а также должны быть включены не менее чем за 15 минут до начала эксперимента, чтобы привести их температуру в равновесие. Далее при подключении газа проверьте на герметичность, затем нагнетайте давление в систему.

После заполнения системы раствором обязательно загрунтуйте ее и удалите все пузырьки воздуха. Также оправдано тестирование аэраторов для тканевых ванн. Хорошая аэрация позволит эффективно распределять лекарства, но не дестабилизировать ткань непосредственно перед экспериментом.

Рассеките ткань. После обезболивания крысы создайте пневмоторакс с помощью ножниц. Выругайте вдоль диафрагмы в нижней части грудной клетки.

Затем разрежьте снизу грудной клетки до грудины и рассеките ткань пополам. Очистите органы над позвоночным столбом, чтобы найти аорту, которая находится непосредственно вдоль позвоночного столба. Теперь разрежьте все соединения с аортой и разрежьте аорту перпендикулярно позвоночнику на уровне диафрагмы.

Далее аккуратно придерживайте аорту и рассекайте аорту от позвоночника. Начните с нижней части диафрагмы, прилегающей к позвоночнику, и двигайтесь к сердцу. Просто будьте осторожны, не тяните и не тяните ткань аорты, потому что это может привести к немедленному ее повреждению.

Поместите аорту в чашку для вскрытия, содержащую PSS. Теперь возьмите проволоку и сделайте небольшой угол в 90 градусов. С одного конца закрепите наклонный конец проволоки в основании чашки для вскрытия.

Затем осторожно проденьте направляющий провод в просвет аорты и наденьте аорту на провод. Когда свободный конец проволоки станет виден, аккуратно согните его и вдавите в фундамент, таким образом стабилизируя ткань. Теперь с помощью небольших венеринских ножниц и щипцов удалите периваскулярную жировую ткань и другие посторонние ткани до тех пор, пока грудная аорта не станет белой и несколько волокнистой.

После того, как вы очиститесь от лишних тканей, осторожно удалите чистую аорту из проволоки. Завершите этот участок, разрезав аорту на кольца шириной от трех до пяти миллиметров. Аортальное кольцо с доставкой.

Подготовьте два тканевых крючка со швами, чтобы закрепить его в камере бани. Один крючок должен иметь шов с небольшой завязанной петлей для крепления к стержню. Для другого крючка нужен кусок шва длиной от 10 до 14 сантиметров.

Чтобы завязать узел, аккуратно прикрепите пару этих тканевых крючков к каждому аортальному кольцу. Будьте осторожны, чтобы не запутать крючки. Затем переложите каждый кусочек салфетки в чашку с PSS комнатной температуры с держателем для салфеток, закрепленным на кольцевой подставке.

Затем наденьте завязанную петлю на колышек стержня и используйте длинный кусок шва, чтобы удерживать ткань. Затем поместите стержень в камеру и убедитесь, что стержень надежно закреплен. Теперь завяжите шов от оставшегося крючка к преобразователю силы.

Оставьте достаточную слабину в шовной нити, чтобы напряжение между преобразователем силы и тканью можно было регулировать с помощью микрометра. Повторите этот процесс для каждого кольца в каждой камере. Теперь установите пассивное напряжение.

С помощью микрометра увеличьте натяжение до двух граммов и подождите, пока натяжение на ткани перестанет увеличиваться. Затем увеличьте натяжение еще на два грамма, и снова дождитесь изменения натяжения. В заключение.

Напряжение теперь должно быть около 3,2 грамма. Повторите этот процесс на каждом кольце в каждой камере. После установки всех пассивных напряжений дайте тканям уравновеситься в течение часа.

В течение этого времени заменяйте ПСС каждые 15 минут и проводите другие приготовления к эксперименту, такие как приготовление препаратов в конце периода равновесия. Промойте салфетку в последний раз, сохраните данные и повторите все входные данные. Затем, следуя деталям в текстовом протоколе, сделайте первоначальное задание.

Обязательно задокументируйте эти действия в программном обеспечении. После первоначального испытания изменение напряжения выйдет на плато. Затем промойте провокационный препарат так, чтобы тон ткани достиг базового уровня.

Дайте ткани отдохнуть на этом базовом тоне около 10 минут, теперь в одной ванне в автомобиле, в данном случае воде в другой. Добавьте в ванну достаточное количество празоцина для концентрации в пять наномоляров. Дайте тканевым ванночкам поинкубироваться в течение часа без мытья.

Между тем, восстанавливайте фенолрин в широком диапазоне концентраций по логарифмической кривой. Через час добавьте в ванну агонист фенилрина в возрастающих концентрациях для создания кумулятивной концентрационной реакции. После каждого добавления дождитесь реакции тканей на плато, прежде чем добавлять следующую концентрацию.

Продолжайте вносить добавки до тех пор, пока они не перестанут менять тон ткани или пока вся кривая реакции не выйдет на плато. Скорее, грудную аорту инкубировали в антагонисте альфа-1 адренергических рецепторов POZ sim в течение одного часа перед добавлением альфа-1 адренергического агониста фенилрина в тканевую ванну и генерированием кумулятивных кривых реакции на максимальное и половину максимального сокращения фенилрина. Только на автомобиле контрольные ткани обозначены зеленым цветом.

Полумаксимум определяет эффективную концентрацию для препарата. Те же размеры обработанной разином ткани выделены черным цветом. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее понимание того, как измерять функцию гладких мышц в изолированной тканевой ванне.