20 сентября 2015 г.
Метод, представленный здесь использует одновременное позитронно-эмиссионной томографии и магнитно-резонансной томографии. В коре головного модели ишемии-гипоксии, динамические изменения в диффузионной и метаболизма глюкозы происходят во время и после травмы. Развивающейся и неповторимы повреждения в этой модели требует одновременного приобретения, если значимые мультимодальных данных изображений будут приобретены.
Общая цель этой процедуры заключается в одновременном получении данных одноэмиссионной томографии и магнитно-резонансной томографии в период возникновения гипоксически-ишемического повреждения. Это достигается путем первого лигирования, общей сонной артерии в одностороннем порядке у мыши. Вторым шагом является подготовка животного к визуализации и получение исходных данных ПЭТ и МРТ.
Последним шагом является получение данных визуализации во время и после гипоксической нагрузки. В конечном счете, одновременная регистрация с помощью ПЭТ и МРТ используется для демонстрации изменений в диффузии воды и поглощении глюкозы дезоксиглюкозой при поражении во время и после гипоксии. Этот метод может дать представление о динамических изменениях в физиологии и биохимии во время инсульта, но он также может быть применен в других случаях, когда наблюдаемая система не находится в устойчивом состоянии, а изменяется.
Подготовьте стерильное операционное поле с помощью показанных здесь инструментов, удобно расположенных снаружи. Включите грелку и убедитесь, что она достигает 37 градусов по Цельсию. Перед началом процедуры.
Обезболите мышь, используя от одного до 3% изоизофтора, и нанесите офтальмологическую мазь на глаза. Поместите его в положение лежа на спине и подтвердите седацию щипцом для пальца ноги. Далее нанесите крем detory на нижнюю часть шеи и верхнюю часть груди с помощью одного-двух ватных тампонов.
Подождите около двух минут, а затем снимите волосы и крем с помощью влажной марли, как только волосы освободятся. Простерилизуйте область разреза Бетадином, применяя его круговым способом изнутри наружу. Переоденьтесь в стерильные хирургические перчатки и с помощью хирургических ножниц сделайте разрез в один сантиметр по средней линии нижней части шеи.
Хирургическими ножницами аккуратно отделите внешнюю кожу от окружающей фасции. Использование двух щипцов для наложения швов MCFE sin micro iris. Удалите соединительную ткань.
Пройдите между жировыми подушками с памятью и отделите правую общую сонную артерию от фасции. Будьте осторожны, чтобы не повредить вены и не потревожить блуждающий нерв. Затем с помощью щипцов обнаружьте правую общую сонную артерию.
В устойчивом положении нанесите несколько капель физиологического раствора, чтобы предотвратить его высыхание за два-три сантиметра из шести шести шелковых швов под правой общей сонной артерией, и перевязайте с помощью двойного квадратного узла. Затем повторите лигирование с использованием второго отрезка шва. Вправьте правую общую сонную артерию и удалите лишнюю жидкость из отверстия с помощью стерильного тампона с губкой.
Затем закройте разрез шестью шелковыми швами OTT и нанесите лидокаин местно до семи миллиграммов на килограмм. Следуйте рекомендациям вашего учреждения по хирургическому обезболиванию. Выполняйте послеоперационный мониторинг во время восстановления, пока мышь не будет готова к визуализации.
Проверьте работу расходомеров кислорода и азота, предварительно включив источники кислорода и азота воздуха. Затем включите питание расходомеров со скоростью один литр в минуту. Установите расход кислорода на 114,3 миллиграмма в минуту, а расход азота на 1,150 грамма в минуту.
Затем подготовьте лежанку для животных, убедившись, что анестезия, дыхательная подушка и системы обогрева расположены надежно и функционально. Затем прикрепите реперные метки, содержащие радиоиндикатор, к ложу животного в пределах поля зрения. Вы обезболиваете мышь изофтором и предварительно согреваете ее хвост, чтобы подготовить его к введению катетера.
Когда все будет готово, вставьте до пяти сантиметров катетер PE 10, предварительно заполненный гепаринизированным физиологическим раствором. Закрепите внутривенную капельницу в месте введения каплей цианоакрилатного клея. Затем переложите животное на подготовленную подстилку для животных.
Повторно нанесите офтальмологическую мазь на глаза мыши, чтобы предотвратить высыхание и стабилизировать голову животного, поместив ее верхние резцы вокруг зубного стержня и установив ушные планки на место. Начните подачу от одного до 2% изофтора со скоростью от 0,5 до одного литра в минуту. Вставьте ректальный зондовый термометр, убедитесь в работоспособности показаний температуры и дыхания.
Затем наберите около 600 микрокюри дозы радиоактивного индикатора в 200 микролитрах физиологического раствора в одномиллилитровый шприц и поместите его в шприцевую помпу. Подсоедините примерно три метра гепаринизированной трубки PE 10 к шприцу, а другой конец — к катетерной линии хвостовой вены. Убедитесь, что расположение катушки МРТ и любых линий и кабелей, особенно трубки для анестезии, не запутались.
Убедитесь, что центр мозга выровнен с центрами катушки МРТ, ПЭТ-системы и магнита МРТ. Затем осторожно сдвиньте лежанку животного вперед в отверстие магнита. Выполните настройку и согласование катушки МРТ, вращая ручки регулировки на катушке, чтобы свести к минимуму несоответствие импеданса и частоты.
Затем выберите редкую последовательность пилотов и запустите последовательность из окна управления сканированием, чтобы получить изображение разведчика. Проверьте положение животного и при необходимости корректируйте его положение до тех пор, пока мозг не будет центрирован. Затем сбросьте прокладки в нулевое значение.
Теперь проведите точку. Разрешите спектроскопическую последовательность сканирования в мозге, используя прямоугольный объем 3,9 миллиметра на шесть миллиметров на девять миллиметров. Проверьте ширину ватерлинии с помощью макрокоманды calc line width.
Если допустима полная ширина при половине максимального значения, расположите план среза для диффузионно-взвешенного сканирования изображения с помощью геометрического редактора, когда результирующий план среза будет выровнен нужным образом. Скопируйте этот план среза в окне управления сканированием для всех последующих сканирований и начните получение изображения. Затем, когда забор ПЭТ подготовлен и готов к началу, запустите инфузионный насос После введения физиологического раствора из катетера начните забор ПЭТ.
Для того, чтобы зафиксировать вхождение радиотрассера. Следите за скоростью подсчета и ищите постепенное увеличение количества, указывающее на успешную инъекцию. Через 10–15 минут запустите гипоксическую проблему, выключив поток медицинского воздуха и немедленно включив расходомеры кислорода и азота для подачи 8% кислорода и 92% азота.
На этом этапе уменьшите изофтор до 0,8% сразу после начала гипоксической провокации. Начните получение диффузионно-взвешенного изображения, используя предыдущую настройку сканирования. Начните получение второго диффузионно-взвешенного изображения сразу после завершения первого сканирования.
Устраните проблему гипоксии, отключив расходомеры, восстановив циркуляцию воздуха в медицинских учреждениях и вернув концентрацию фтора к 1-2%Получите взвешенную визуализацию после гипоксии, затем выключите инфузионный насос и получите анатомические изображения в осевой и сагиттальной плоскостях с помощью редактора геометрии. Убедитесь, что поле зрения сбора данных охватывает мозг. При использовании этого метода изменения в диффузии обнаруживаются быстро после начала инсульта, как и ожидалось.
Кажущиеся значения коэффициента диффузии на окклюзированной стороне мозга уменьшаются по мере прогрессирования травмы. Показывать. Вот корональные и поперечные срезы животного, показывающие поглощение ФДГ. Изображение домашнего животного находится на переднем плане и регистрируется с анатомическим изображением МРТ на заднем плане для визуализации.
Одновременно с изменениями кажущегося коэффициента диффузии могут наблюдаться полусферические различия в поглощении ФДГ после начала гипоксического воздействия. В двух из трех случаев более позднее поглощение ЭПС снизилось по сравнению с контралатеральным поглощением после гипоксии. Хотя это не так, во всех случаях, вероятно, из-за изменчивости животных, мы можем использовать эту общую процедуру с различными видами МРТ и контрастирования домашних животных, чтобы наблюдать за другими физиологическими параметрами или мишенями в мозге.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данной статье представлен метод одновременного получения данных позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) и магнитно-резонансной томографии (МРТ) при гипоксически-ишемическом повреждении на мышиной модели. Данный подход позволяет наблюдать динамические изменения диффузии воды и метаболизма глюкозы во время и после повреждения.
Одновременная ПЭТ/МРТ-визуализация позволяет в режиме реального времени сопоставлять метаболические и структурные изменения в динамических моделях заболеваний, устраняя критический пробел в доклинических исследованиях инсульта, при которых временное рассогласование затрудняет понимание механизмов патогенеза. Эта возможность способствует валидации мишеней путем установления связи между ранними биохимическими нарушениями и последующим повреждением тканей, что повышает прогностическую точность определения времени терапевтического вмешательства. Данный метод улучшает трансляционную преемственность за счет регистрации эволюции патофизиологии у отдельных субъектов, снижая вариабельность, которая ограничивает групповой анализ в моделях сосудистых повреждений.
Данный метод интегрируется в общий процесс открытий, предоставляя механистические данные на ранних этапах, которые служат основой для стратегий валидации мишеней и идентификации ведущих соединений в нейроваскулярных исследованиях.