RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ru_RU
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/52927-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Здесь мы представляем протокол для индуцирования анорексии, основанной на активности (ABA) у самок мышей-подростков. АБК – это состояние гиперактивности, вызванное ограничением в еде грызунов, имеющих доступ к беговому колесу. Это явление используется в качестве модели для изучения нейробиологии, лежащей в основе нервной анорексии.
Общая цель этой процедуры состоит в том, чтобы вызвать анорексию, основанную на активности, у самок мышей-подростков. Для этого нужно сначала познакомить мышей с беговым колесом и в течение как минимум трех дней непрерывно контролировать активность их бегового колеса. Затем М помещаются в ограниченный график доступа к пище, и фиксируются изменения в их добровольном движении колеса.
В конечном счете, эта модель анорексии, основанная на активности, может показать, что нейробиологические изменения связаны с изменениями в поведении животного при ограниченном доступе к пище. Я надеюсь, что эта модель анорексии, основанной на активности, поможет улучшить терапию нервной анорексии, потому что она выявит дискретные индивидуальные различия в нейрохимии и нейроанатомии, которые лежат в основе устойчивости и уязвимости к нервной анорексии. Хотя этот метод может дать представление о нервной анорексии, он также может быть применен к другим заболеваниям, которые имеют сопутствующее беспокойство состояние.
Как правило, индивидуальный подход к этому методу будет сложным, потому что уязвимость каждого животного к активности, основанной на AIA, сильно варьируется. Таким образом, требуется тщательный контроль за потерей веса животного, питанием и активностью, или животные могут начать настройку. Разместите компьютер и USB-концентратор в комнате для животных вдали от проточной воды и пешеходного движения, но в пределах досягаемости передатчика беговых колес.
Также используйте резервный источник питания для компьютера и USB-хаб с помощью переключателей на хабе. Установите номера каналов в соответствии с номерами каналов всех ходовых колес, которые он будет отслеживать. Теперь запустите программное обеспечение для управления ходовым колесом и убедитесь, что программное обеспечение распознает каждый передатчик.
Каждое колесо будет указано в окне программы. Под заголовком колесные датчики. Программное обеспечение автоматически присвоит идентификационный номер каждому колесу.
Возможно, будет полезно отметить этот номер на колесе. Если колесо не распознается, замените батарейки на колесе. Далее подготовьте клетку для каждого мышиного субъекта с подстилкой, гнездами, свободным доступом к воде и беговым колесом.
Беговое колесо должно свободно двигаться, не касаясь стенок клетки, корзины для корма или верхней части клетки. Кроме того, убедитесь, что программное обеспечение обновляет счетчик колес. Для акклиматизации зверьки размещают каждую мышь индивидуально в клетке с беговым колесом и доступом к примерно 100 граммам сухого корма и 50 граммам влажного корма в клетке.
В программном обеспечении. Начните сбор и хранение данных, выбрав «Начать сбор». В меню файлов выберите директорию, в которую будут сохраняться данные до тех пор, пока они не будут остановлены.
Программное обеспечение будет непрерывно записывать каждый день непосредственно перед началом темной фазы светового цикла. Взвесьте животное, взвесьте влажный корм и отвесьте сухой корм. Наполните контейнер для сухого корма, если он содержит менее 50 граммов, и замените контейнер для влажного корма.
Если пища высыхает или пачкается подстилкой, вручную запишите количество колес в это же время. Чтобы сделать резервную копию цифровых данных в первый день ограничения приема пищи, уберите весь влажный и сухой корм из клетки в середине светового цикла. Позже, с наступлением темного времени, запишите вес животного и количество колес.
Затем положите в бункер около 50 грамм сухого корма и предоставьте пять грамм влажного корма в лодку. Далее подготовьте для каждого зверька свежую клетку с подстилкой и гнездами. Через два часа с кормом перекладываем беговое колесо и несколько горстей грязной подстилки в подготовленную клетку.
Пересадите мышей в новые клетки без еды. В конце периода доступа к продуктам питания запишите вес продуктов UNE и количество колес. Повторяйте этот процесс ежедневно в течение всего эксперимента.
Если в какой-то момент вес животного упадет ниже 75% от его первоначального веса, исключите его из эксперимента. Другие признаки чрезмерного голодания, которые указывают на то, что животное следует удалить из эксперимента, включают сгорбленную позу и неспособность передвигаться по клетке. Животное может быть холодным на ощупь и не принимать пищу в течение двух часов доступа к пище.
После трех дней ограничения в пище завершите эксперимент. Либо усыпьте животное, чтобы собрать ткани, либо дайте животным восстановиться. Для дальнейшего поведенческого тестирования в программном обеспечении выберите опцию «Завершить захват» в меню «Файл».
Теперь данные сохраняются в файле WLS в каталоге, выбранном В начале эксперимента извлеките ходовые колеса из сепараторов, а затем извлеките их батареи. Выздоравливающим животным должен быть разрешен ad libido, доступ к пище. Теперь экспортируйте данные в электронную таблицу.
Выберите опцию экспорта в меню файла и выберите нужные файлы WLS в опции файла исходных данных. Затем выберите дату и время начала и окончания и, наконец, выберите каждый датчик колеса для экспорта. В списке датчиков колес данные затем могут быть проанализированы по мере необходимости для изучения влияния a b.
В популяции, аналогичной нервной анорексии человека, самки мышей-подростков были акклиматизированы к колесу в точке P 36. Вскоре после наступления половой зрелости на P 40 началось лишение пищи, и их масса тела резко снизилась. Голодные животные чрезмерно бегали после наступления ограничения в пище.
Детальный анализ активности колеса показал циркадную закономерность. Любопытно, что даже во время доступа к пище голодные животные предпочитали использовать беговое колесо. После того, как началось ограничение питания, некоторые животные демонстрировали повышение активности непосредственно перед временем кормления, что можно назвать пищевым Упреждающая активность Один мастер по созданию когорты для прохождения сценария на основе активности может быть достигнут за пару часов, если он выполнен правильно.
При попытке выполнить эту процедуру важно не забывать записывать подсчет колес вручную не реже одного раза в день. Неожиданный сбой в линии электропередачи или разрядка батарей могут нарушить сгенерированный компьютером подсчет колес После этой процедуры. Другие методы, такие как иммуноцитохимия, электрофизиология и поведенческое тестирование, могут быть выполнены, чтобы ответить на дополнительные вопросы, такие как влияние индукции анорексии на основе активности на анатомию мозга, биофизические свойства и поведение.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
05:57
Related Videos
13.7K Views
09:29
Related Videos
15.8K Views
10:05
Related Videos
15K Views
08:26
Related Videos
13K Views
04:48
Related Videos
11.5K Views
09:10
Related Videos
11.5K Views
05:15
Related Videos
1.7K Views
04:42
Related Videos
1.3K Views
19:15
Related Videos
87.6K Views
07:54
Related Videos
14.7K Views