25 августа 2015 г.
Эта статья демонстрирует хирургические процедуры гастроэзофагеального рефлюкса с мышами. Эти модели являются полезными инструментами для исследования механизмов и лечения болезни гастроэзофагеального рефлюкса и потенциально болезни Барретта и аденокарциномы пищевода.
Основной целью этой процедуры является создание моделей гастроэзофагального рефлюкса у мышей. Сначала показана подготовка модели желудочного рефлюкса, затем представлена настройка модели смешанного рефлюкса, за которой следует демонстрация подготовки модели дуоденального рефлюкса. В конечном итоге, степень повреждения пищевода, вызванного различными моделями рефлюкса, может быть оценена путем гистологического анализа.
Как правило, люди, недавно начавшие использовать это лекарство, будут сталкиваться с трудностями из-за небольшого размера пищевода мыши. Для настройки модели желудочного рефлюкса. После подтверждения правильного уровня анестезии щипанием пальцев, используйте стамески для удаления волос для бритья хирургической области и нанесите мазь на глаза животного. Используя раствор бетадина, стерилизуйте открытую кожу.
Затем сделайте двухсантиметровый разрез в верхней средней линии, начиная от грудино-пупочного отростка вниз к анусу. Затем откройте брюшную полость через среднюю линию и используйте ножницы для удаления грудино-пупочного отростка. Разделите и перережьте соединительные ткани между печенью и желудком.
Затем перевяжите и перережьте пучок сосудов между селезенкой и фонусом. Когда фонус будет полностью освобожден, немного поверните ткань влево, чтобы открыть левую сторону гастроэзофагального соединения. Затем с помощью острой пары ножниц сделайте пятисантиметровый продольный разрез по мышце вдоль дистального пищевода, чтобы открыть эпителий.
Откройте эпителий в том же направлении с помощью трех разрезов, чтобы отрезать большую часть четырех желудков. Затем, используя иглу с закругленным концом, установите восьми-О пролиновый шов, сначала через пищевод, а затем через четыре желудка с точным оппозицией слизистой оболочки к слизистой. В этой демонстрации используется шести-О пролиновый шов, чтобы улучшить его способности, продолжайте равномерно ставить швы, от 3 до 4 мм друг от друга, через пищевод через четыре желудка, пока вся область не будет связана от точки до точки, как показано после того, как последний шов был поставлен, используйте физиологический раствор для очистки брюшной полости от любой крови и оставшихся желудочных содержимых.
Затем закройте брюшную стенку шелковыми швами и кожу металлическими зажимами, чтобы установить модель смешанного рефлюкса. После выявления гастроэзофагального соединения, как только это было продемонстрировано, аккуратно отделите спинную сторону пищевода от кровеносных сосудов за пищеводом. Проведите маленький ватный тампон между пищеводом и кровеносными сосудами.
Затем сделайте два пятисантиметровых продольных разреза на гастроэзофагальном соединении и два пятисантиметровых продольных разреза на антимезентериальной границе вдоль проксимального конца дуоденума, смежного с пилорусом. Затем, используя прерывистое ATO проленовое шитье, наложите три-четыре шва на спинную сторону и два-три шва на переднюю сторону для анастомоза разрезов с точным оппозированием слизистой оболочки к слизистой. Затем удалите отрезанный кончик, промойте брюшную полость физиологическим раствором и закройте брюшную стенку и кожу, как только это было продемонстрировано, чтобы установить модель дуоденального рефлюкса.
После подготовки модели смешанного рефлюкса, как только это было продемонстрировано, осторожно поднимите желудок, чтобы открыть заднюю сторону ткани, затем откройте кровеносные сосуды на спинной стороне пищевода, перевяжите и перережьте кровеносные сосуды, перевяжите дуоденум у пори и перевяжите, а также перережьте мезентерий. Затем удалите весь желудок, промойте брюшную полость физиологическим раствором и закройте брюшную стенку и кожу. По завершении каждой из операций поместите животных на греющий коврик с мониторингом, пока они полностью не восстановятся. Через четыре недели после операции архитектура эпителия пищевода будет демонстрировать повреждения от рефлюкса, как это наблюдается на этих изображениях верхних отделов пищеварительного тракта.
У мышей с желудочным смешанным или дуоденальным рефлюксом эпителий становится более густым, и папиллы удлиняются по сравнению с контрольными животными, гиперпролиферация эпителиальных клеток и инфильтрация верхних отделов пищеварительного тракта воспалительными клетками. Общие признаки эзофагита наблюдаются в модели рефлюкса. Животные также, освоив этот метод, могут быть выполнены за 20-30 минут, если они выполняются правильно.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данной статье продемонстрированы хирургические процедуры моделирования гастроэзофагеального рефлюкса на мышах. Эти модели являются полезными инструментами для исследования механизмов и методов лечения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, а также потенциально пищевода Барретта и аденокарциномы пищевода.
Надежные хирургические модели гастроэзофагеального рефлюкса у мышей позволяют снизить механистические риски и провести валидацию мишеней для изучения повреждения и воспаления пищевода. Эти модели предоставляют контролируемую платформу для исследования путей развития заболевания, связанных с рефлюкс-эзофагитом и предраковым перерождением, обеспечивая трансляционную преемственность от этапа открытия до доклинических исследований. Их воспроизводимость и гистологические результаты способствуют принятию обоснованных решений по управлению портфелем проектов на ранних стадиях разработки программ по заболеваниям ЖКТ.
Данные хирургические модели используются на этапе от ранних открытий до доклинических исследований, позволяя проводить проверку гипотез, валидацию мишеней и трансляционные исследования в рамках портфелей заболеваний ЖКТ.