Частота Смешивание Магнитный сканер обнаружения для визуализации магнитных частиц в планарных образцах

Общая цель этой процедуры заключается в использовании двумерного сканирования со смешанным магнитным детектированием для анализа тонких биологических образцов, содержащих наномагнитные частицы. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области биохимии и медицинской диагностики, такие как анализ срезов тканей с использованием наномагнитных частиц в качестве выравнивающего соединения. Основное преимущество этого метода заключается в том, что он позволяет достичь соответствия распределения наномагнитных частиц.

Демонстрировать процедуру будут Ыль Гюн Лим, Чжэ Чан Чон и Джихо Чанг, три исследователя из моей лаборатории. Измерительная головка p-FMMD должна быть спроектирована в соответствии с текстовыми протоколами. Подробная информация приведена по всем техническим характеристикам проводки и намотки.

Сборка и настройка подробно описаны в текстовом протоколе. Это включает в себя регулировку баланса высоких частот и наведенного напряжения. Затем настраивается измерительная электроника, которая включает в себя секцию возбуждения, секцию низкочастотного и высокочастотного драйвера и секцию детектирования FMMD.

После этого настраиваются предусилитель, первый демодулятор, промежуточный усилитель с фильтрацией, второй демодулятор и конечный усилитель с фильтрацией. Наконец, 2D-сканер устанавливается и сопрягается с компьютерным управлением. Для этой процедуры используются частицы магнетита диаметром 50 нанометров и 100 нанометров и частицы маггемита диаметром 1 микрон.

Промойте исходные растворы частиц в воде и соберите частицы с помощью магнита. Слейте воду и промойте их каждый еще два раза. Затем разбавьте частицы до 25 миллиграммов на миллилитр растворов, используя дистиллированную воду.

Из 100-нанометрового раствора частиц сделайте пятикратный ряд разведения для концентраций пять, один, 0,2 и 0,04 миллиграмма на миллилитр. Затем выбейте кусочки абсорбирующей промокательной бумаги с помощью пуансов для биопсии. Затем замочите бумажные дыроколы в различных растворах частиц размером 100 нанометров на 30 секунд.

После замачивания дайте бумажным пробойникам высохнуть на воздухе. Далее подготовьте вырезанные кусочки нитроцеллюлозы размером два на 18 миллиметров. Замочите один кусочек нитроцеллюлозы в неразбавленном растворе частиц диаметром один микрон на 10-15 секунд и высушите феном с помощью ненагретого воздуха.

Замочите другой кусок нитроцеллюлозы в двух растворах разной концентрации, чтобы получить градиент концентрации, и высушите его, как и другой. Наконец, используя капиллярное действие, загрузите в капиллярную трубку 30 микролитров неразбавленного раствора частиц диаметром 50 нанометров. Затем загрузите второй капилляр с 10 микролитрами 20-кратного разбавления тех же частиц.

Направление сканирования должно быть короче из двух плоских размеров. Установите начальную точку и длину сканирования с помощью меток линейки на палитре. Введите эти значения в программное обеспечение для сканирования, затем установите смещение сканирования немного меньше достижимого пространственного разрешения.

Далее задайте скорость сканирования с учетом снижения сигнала, которое происходит из-за фильтрации нижних частот. Используйте значение от одного до семи миллиметров в секунду. Теперь установите расстояние шага.

Общее время сканирования рассчитывается по формуле, которая указана в текстовом протоколе. Перед сканированием закрепите образец клейкой лентой. Для сканирования сгенерируйте файл NVD для программы управления движением.

Откройте программу управления движением PMC и загрузите файл NVD. Нажмите кнопку «Домой», чтобы установить механические исходные точки. Закройте программу управления движением и вернитесь к программе сканера.

Затем выполните сканирование. Для этих сканирований интенсивность сигнала анализировалась в зависимости от концентрации магнитных шариков, а скорость сканирования составляла 10 миллиметров в минуту. Была обнаружена сильная корреляция между концентрацией шариков и сигналом.

Взаимосвязь между скоростью сканирующего столика и интенсивностью сигнала проверялась с помощью бумажных гранул, пропитанных магнитными шариками. Более высокие сигналы были получены при более низких скоростях сканирования. Сравнение сканирования p-FMMD с оптическим изображением образца мембраны из нитроцеллюлозы ясно показало полезность p-FMMD в качестве сканера MPI.

Широта сканирования обусловлена главным образом профилем чувствительности измерительной головки. Аналогичным образом, два капилляра, заполненные магнитными частицами разной концентрации, были сфотографированы и отсканированы с помощью p-FMMD. Очевидно, что концентрации, отличающиеся в 20 раз, легко различимы.

После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее понимание того, как анализировать 10 образцов, содержащих наномагнитные частицы, с помощью метода FMMD. После освоения этой техники ее можно выполнить примерно за час, если она выполнена правильно. После своего развития эта методика открыла путь для исследователей в области биохимии и медицинской диагностики к изучению распределения наномагнитных частиц, которые скорее относятся к специфическим антителам в системе органов.