Мышиные Экспериментальная модель самобытного развития опухолевого и перитонеальный метастаз с помощью Ортотопическая Заражение клеток карциномы яичников
9 декабря 2016 г.
Для уточнения многоэтапный процесс брюшины распространения рака яичников, текущее исследование представляет собой мышиный экспериментальную модель развития первичной опухоли и метастазов с помощью перитонеального ортотопической прививки с этими опухолевыми клетками.
Общей целью данной процедуры является наблюдение за развитием исходного и метастатического образования опухоли при эпителиальной карциноме яичников. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в гинекологической онкологической области, такие как понимание биологии опухоли или дефеменации брюшины. Основное преимущество этой методики заключается в том, что ороспатическая инокуляция эпителиальной карциномы яичников человека, или клеток EOC, выполняется через забрюшинный доступ, выращенный с дорсальным флангом. Для получения клеточной линии светлоклеточного рака яичников человека пластинируйте и поддерживайте клетки ES2 в среде RPMI-1640 с 10% FBS и PenStrep при 37 градусах Цельсия и 5% CO2. В фазе логарифмического роста удалите старую среду из культуры и используйте три-четыре миллиметра PBS для однократной промывки клеток. Затем добавьте один миллиметр трипсина/ЭДТА и раскачайте сосуд, чтобы покрыть весь монослой. Извлеките и выбросьте раствор трипсина и верните клетки в инкубатор на три-пять минут. После изучения клеток под микроскопом, чтобы убедиться, что клетки отделились и плавают, добавьте пять миллиметров свежей питательной среды, содержащей сыворотку, чтобы инактивировать трипсин и повторно суспендировать клетки, прежде чем перенести их в 15-миллиметровую коническую трубку. Центрифугируйте суспензию при 300-кратном перегрузке и комнатной температуре
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Обзор
В данном исследовании представлена экспериментальная модель на мышах для выяснения многоэтапного процесса перитонеальной диссеминации рака яичников. Модель предполагает ортотопическую инокуляцию опухолевых клеток для изучения развития первичной опухоли и последующего перитонеального метастазирования.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Онкология
- Экспериментальные модели
- Исследование метастазирования
Теоретическая часть
- Рак яичников характеризуется сложным метастатическим поведением.
- Понимание механизмов перитонеальной диссеминации имеет решающее значение для совершенствования стратегий лечения.
- Мышиные модели широко используются для изучения прогрессирования рака.
- Данное исследование направлено на изучение механизмов метастазирования.
Цель исследования
- Для выяснения механизмов перитонеальной диссеминации при раке яичников.
- Для разработки надежной мышиной модели для изучения поведения опухоли.
- Для исследования роли ортотопического введения в процессе метастазирования.
Используемые методы
- Ортотопическое введение опухолевых клеток мышам.
- Мониторинг развития опухоли и метастазирования.
- Использование методов визуализации для оценки распространения опухоли.
- Анализ взаимодействий в микроокружении опухоли.
Основные результаты
- Успешное создание мышиной модели рака яичников.
- Наблюдение перитонеальных метастазов после ортотопической инокуляции.
- Понимание роли микроокружения опухоли в метастазировании.
- Идентификация потенциальных терапевтических мишеней для вмешательства.
Выводы
- Мышиная модель эффективно имитирует перитонеальную диссеминацию.
- Полученные результаты способствуют пониманию механизмов метастазирования карциномы яичников.
- Будущие исследования могут быть сосредоточены на терапевтических стратегиях, основанных на этих данных.
Часто задаваемые вопросы
Практическая значимость для промышленности
Ортотопическая инокуляция клеток карциномы яичников в моделях мышей позволяет напрямую изучать развитие первичной опухоли и перитонеальное метастазирование, восполняя критический пробел в понимании механизмов метастазирования. Данная модель повышает прогностическую достоверность на ранних этапах поиска за счет воспроизведения клинически значимых путей диссеминации. Ее воспроизводимость и трансляционная согласованность делают ее ценной для отбора перспективных кандидатов из портфеля и снижения механистических рисков в онкологических исследованиях и разработках.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Ранние этапы поиска и валидация мишени
- Позволяет исследовать механизмы метастазирования в соответствующем заболеванию контексте in vivo.
- Обеспечивает функциональную валидацию мишеней, участвующих в отсоединении опухоли и ее прикреплении к брюшине.
- Способствует снижению механистических рисков путем моделирования клинически наблюдаемых паттернов диссеминации.
- Предоставляет платформу для исследований взаимодействий опухоли и мезотелия на основе выдвинутых гипотез.
Скрининг и разработка анализа
- Подготовка валидированных моделей на животных для последующего скрининга эффективности и изучения механизмов действия.
- Поддержка стандартизации протоколов инокуляции опухоли и оценки метастазирования.
- Обеспечение воспроизводимого количественного определения метастатической нагрузки для сравнительных исследований.
- Облегчение оценки потенциальных методов терапии, направленных на подавление метастатического распространения.
Трансляционные и доклинические исследования
- Соответствует прогрессированию заболевания у человека за счет моделирования перитонеальной диссеминации in vivo.
- Обеспечивает непрерывность процесса от этапа поиска до доклинической валидации антиметастатических стратегий.
- Позволяет принимать взвешенные решения о дальнейшем продвижении проекта на основе результатов метастазирования in vivo.
- Служит трансляционным мостом для тестирования гипотез относительно биомаркеров и терапевтических методов.
Интеграция конвейеров и рабочих процессов
Данная ортотопическая мышиная модель находится на стыке этапов раннего поиска и доклинической валидации, что позволяет проводить механистические исследования и оценку кандидатов перед переходом к клиническим испытаниям.
- Фундаментальная биология: позволяет проверять гипотезы об откреплении опухолевых клеток, их миграции и колонизации брюшины.
- Скрининг: обеспечивает воспроизводимую систему для оценки антиметастатической эффективности и количественного определения распространения опухоли.
- Аналитика: позволяет проводить количественное измерение метастатических очагов и опухолевой нагрузки в различных экспериментальных группах.
- Трансляционные исследования: моделирует клинически значимую диссеминацию, что способствует поиску соответствующих биомаркеров и терапевтических средств.
- Корпоративное повторное использование: предлагает стандартизированную, многократно используемую платформу in vivo для программ разработки онкологических препаратов.
Операционное и корпоративное влияние
- Научная ценность: повышает достоверность прогнозов в исследованиях механизмов метастазирования и валидации мишеней.
- Операционная ценность: улучшает воспроизводимость и стандартизацию моделирования метастазирования in vivo.
- Стратегическая ценность: служит основанием для принятия решений о продолжении или прекращении разработки антиметастатических препаратов и снижает биологические риски на поздних этапах.
- Влияние на портфель: обеспечивает приоритизацию онкологических активов, направленных на борьбу с метастатическим прогрессированием, с учетом рисков.
Особенности реализации
- Требуется опыт применения хирургических методик на мышах и ортотопической инокуляции клеток.
- Необходим доступ к инфраструктуре визуализации и количественного анализа для оценки метастазирования.
- Требуется межкомандная стандартизация правил обращения с животными и критериев конечных точек.
- Может потребоваться адаптация для различных линий клеток карциномы яичника или метастатических фенотипов.
- Практические ограничения включают вариабельность конкретной модели и этические аспекты использования животных.
Часто задаваемые вопросы по биофармацевтике
Chapters in this video
0:05
Title
0:46
Preparation of Cell Suspensions
3:12
Orthotopic Inoculation with Cell Suspensions
5:12
Post-surgical Treatment and Analysis of Tumors and Metastases
5:59
Results: Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation of Ovarian Carcinoma Cells
6:48
Conclusion
