Generation of Integration-free Induced Pluripotent Stem Cells from Human Peripheral Blood Mononuclear Cells Using Episomal Vectors

Wei Wen; Jian-Ping Zhang; Wanqiu Chen; Cameron Arakaki; Xiaolan Li; David Baylink; Gary D. Botimer; Jing Xu; Weiping Yuan; Tao Cheng; Xiao-Bing Zhang

doi:10.3791/55091

Генерация интеграции свободных индуцированные плюрипотентные стволовые клетки из человеческих мон...

JoVE Journal
Developmental Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Developmental Biology

Generation of Integration-free Induced Pluripotent Stem Cells from Human Peripheral Blood Mononuclear Cells Using Episomal Vectors

Генерация интеграции свободных индуцированные плюрипотентные стволовые клетки из человеческих мононуклеарных клеток периферической крови с помощью эписомальные векторы

Full Text

11,462 Views

09:45 min

January 1, 2017

DOI: 10.3791/55091-v

Wei Wen¹, Jian-Ping Zhang¹, Wanqiu Chen², Cameron Arakaki², Xiaolan Li^1,2, David Baylink², Gary D. Botimer³, Jing Xu¹, Weiping Yuan¹, Tao Cheng^1,4,5,6,7, Xiao-Bing Zhang^1,2

¹State Key Laboratory of Experimental Hematology, Institute of Hematology and Blood Disease Hospital,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ²Division of Regenerative Medicine, Department of Medicine,Loma Linda University, ³Department of Orthopaedic Surgery,Loma Linda University, ⁴Center for Stem Cell Medicine,Chinese Academy of Medical Sciences, ⁵Department of Stem Cell & Regenerative Medicine,Peking Union Medical College, ⁶Collaborative Innovation Center for Cancer Medicine, ⁷Tianjin Key Laboratory of Blood Cell Therapy and Technology

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Этот протокол подробно описывает метод эффективного получения ИПСК без интеграции из клеток периферической крови взрослого человека. С помощью четырех эписомальных векторов на основе oriP/EBNA для экспрессии факторов перепрограммирования, KLF4, MYC, BCL-XL или OCT4 и SOX2, из 1 мл периферической крови можно получить тысячи колоний iPSC.

Общая цель этой процедуры заключается в получении iPS-клеток из мононуклеарных клеток периферической крови взрослого человека с использованием неинтегрирующихся эписомальных векторов. Этот протокол может помочь ученым в области стволовых клеток, которые хотят получить iPS-клетки для мониторинга заболеваний, скрининга лекарств и регулярной радиотерапии. Наш протокол перепрограммирования очень прост, но очень эффективен.

После этой процедуры можно легко освоить технику перепрограммирования клеток крови. Качество плазмы не менее важно для успешного перепрограммирования. Загрязняющие вещества могут снижать эффективность перепрограммирования, поэтому мы рекомендуем использовать наборы Endofree для очистки эписомальных плазмид.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Explore More Videos

Биология развития выпуск 119 одноядерные клетки периферической крови (PB MNC) гемопоэтические клетки-предшественники () карманные ПК перепрограммирование эписомальные векторы интеграция свободных индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (иПСК)