Разделение смесей с помощью осаждения

1. Осадки CaCO₃

1. Приготовьте 5 мл 1 М CaCl₂.
2. Приготовьте 5 мл 1 М Na₂CO₃.
3. В маленькую центрифужную пробирку (1,5 мл) добавьте 750 мкл CaCl₂ и 750 мкл Na₂CO₃.
4. Подождите 2 минуты, пока не наступит реакция. Раствор должен стать мутным.
5. Центрифугируйте смесь при 10 000 × г в течение 5 мин.
6. Сцедите надосадочную жидкость.
7. Добавьте в гранулу 1 мл холодной воды.
8. Повторно суспендируйте гранулу путем перемешивания в вихревом смесителе в течение 10 с.
9. Центрифугируйте смесь при 10 000 × г в течение 5 мин.
10. Сцедите надосадочную жидкость.

2. Осаждение молочных белков

1. Налейте молоко в стакан и добавьте брусок для размешивания.
2. Осторожно нагрейте молоко до 40 °C в горячей плите для перемешивания. Не нагревайте выше 40 °C.
3. Приготовьте 15% (v/v) уксусной кислоты, смешав 7,5 мл уксусной кислоты и разбавив водой, достаточной до 50 мл.
4. Погрузите электрод рН-метра в теплое молоко, и следите за рН.
5. Добавляйте уксусную кислоту по каплям в молоко до тех пор, пока не будет достигнут pH 4,6.
6. Фильтрация молока
   1. Заделайте канчик из фильтровальной бумаги и поместите его в воронку.
   2. Поместите воронку в колбу, и влейте в нее раствор подкисленного молока.
   3. По мере заливки раствора фильтровальная бумага может засориться. С помощью стержня для перемешивания периодически перемешивайте раствор и фильтруйте бумагу, чтобы очистить его. Если он не улучшает прохождение раствора, смените фильтровальную бумагу.
   4. Положите новую фильтровальную бумагу на столешницу и перенесите как можно больше влажного твердого вещества на новую фильтровальную бумагу. Это должно впитать больше воды из твердого вещества.
   5. Если новая фильтровальная бумага стала слишком влажной, продолжайте менять ее до тех пор, пока на фильтровальной бумаге не останется минимальное количество влаги. Слегка надавите на него, чтобы впитать больше воды, если это необходимо.
   6. Возьмите высушенное твердое вещество и повторно суспендируйте примерно в 70% этанола. Снова отфильтруйте твердое вещество, следуя шагам с 2.6.1 по 2.6.5.
7. Центрифугирование молока (как альтернатива фильтрации)
   1. Переложите порции 50 мл смеси в центрифужные пробирки объемом 50 мл.
   2. Центрифугируйте при 4 500 × г в течение 10 минут, затем сцедите надосадочную жидкость.
   3. Добавьте в гранулу 50 мл 70% этанола.
   4. С помощью стержня для перемешивания повторно суспендируйте гранулу в этаноле.
   5. Центрифугируйте эту суспензию в соответствии с шагом 2.7.2.
8. Повторно суспендируйте гранулу в буфере для дальнейшего анализа, такого как SDS-PAGE, в противном случае храните ее при температуре 4°C.

3. Рекристаллизация KCl

1. Взвесьте 50 г KCl в колбе Эрленмейера и добавьте 100 мл воды
2. Нагревайте смесь до закипания воды. Убедитесь, что весь порошок KCl растворен. Некоторые примеси могут не растворяться в воде.
3. Нагрейте еще одну (пустую) колбу Эрленмейера вместе со смесью и держите ее в сильном тепле.
4. Поместите воронку с фильтровальной бумагой в теплую пустую колбу.
5. Вылейте раствор через фильтровальную бумагу, чтобы удалить нерастворенные примеси. Приемная колба поддерживается в тепле, чтобы во время фильтрации не происходили изменения температуры, в противном случае образуется неочищенный осадок. Если это произойдет, повторно нагрейте смесь, пока весь осадок не растворится.
6. Снимите колбу с раствором с огня.
7. Держите его в прохладном месте в комнате и дайте ему медленно остыть в течение примерно 30 минут или пока он не перестанет быть теплым на ощупь.
8. После охлаждения до комнатной температуры поместите колбу на ледяную баню, чтобы еще больше снизить температуру. В качестве альтернативы можно оставить колбу в холодильнике или комнате с регулируемой температурой при температуре 4 °C.
9. Кристаллы можно собирать путем фильтрации как в пунктах 3.4–3.5 (используйте колбу и воронку комнатной температуры).