Name: Способ получения рекомбинантного белка mCD1d в клетках насекомых. (Видео) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-12-10T22:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 41 s
Description: Узнайте метод получения рекомбинантного белка mCD1d в клетках насекомых с помощью бакуловирусной инфекции. Этот подход позволяет генерировать тетрамеры для исследования NKT-клеток в иммунологии.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

И. Оттепель Клетки Возьмите замороженный флакон Tn5 клеток, а оттепель его в 37 ° С водяной бане. Добавьте 5 мл среднего насекомого Express (Invitrogen, каталожный номер-10486) в 25 см 2 TC колбу. Обратите внимание, что экспресс пять поставляется без глютамина, нужно добавить 10 мл 100X глютамин стрептококк ручки или глютамин только до 1 л средства массовой информации. Добавить Tn5 клетки в нее и инкубировать 30 минут в 27 ° C инкубатора. Затем, аспирация среде с ДМСО мягко, не нарушая клетки прикреплены к нижней части колбы. Добавьте 5 мл свежей среды. II. Растет и расширяется Клетки Монитор клетки с каждым днем. Когда колбы составляет почти 70% сливающийся, довести клеток в суспензии, ударяя колбу с обеих сторон и передача клетки 175см 2 колбу, добавляя 21 мл насекомых среду выражать и 5 мл клеточной культуры. Каждый T175 колбе должна иметь около 25-30мл среды в конечном объеме. Сплит сливной колбы (около 1 млн / мл конц.) 1 / 4 или 1 / 5 по мере необходимости. Не позволяйте клетки разрастаются. Подсчитайте количество отрывков, которые вы разделили клетки. Не расти на протяжении прохождения номер 30, поскольку это может вызвать старение клеток в результате лизиса клеток. Когда вы достигнете желаемого объема при концентрации 1 млн / мл, инфицировать клетки. Я обычно вырастают до 2 до 2,5 л, который обычно составляет до семидесяти 175см 2 колбы и ок. От 25 до 30 мл / флакон, или пять 1 литр колб Эрленмейера и ок. 400 мл до 500 мл в каждой колбе Примечание: Вы либо может вырасти клеток в Т-175 разъем колбу печать или Corning колбу Эрленмейера. Рост клеток в колб Эрленмейера быстрее и проще. III. Titering вирусов к концу метода разведения точка <ol><li> Пластина 3000-5000 клеток на лунку в плоское дно 96 ячейках в 200ul Экспресс пять УЛ среды. Пусть клетки оседают на 27 ° С в течение не менее 30 минут. </li><li> Сделать серийные разведения бакуловирус акций. Надо сделать 1 / 10 разбавления в одной строке 96 ячейках нижней U, используя 250ul на лунку. Разведения делаются в Экспресс Пять УЛ среды. </li><li> Использование многоканальной пипетки, передача фиксированную сумму (обычно 20 мкл) разных разведений к клеткам. </li><li> Культуры при 27 ° С в течение 7 дней. Чтобы избежать испарения с краю строки, заверните края пластины с парафильмом. </li><li> Через 7 дней, проверьте пластину и определить, какой титр вируса дает 50%-инфекции - половина скважин на этой концентрации вируса заражены). Затем с помощью формулы для расчета титра, который выражается в БОЕ / мл (БОЕ-бляшкообразующих единиц). Формула содержится в большинстве руководств бакуловирус. </li></ol> IV. Заражение клетки Это очень важно знать точные титр вируса. Добавить необходимое количество вируса. Для вирусных подготовки массы клетки должны быть инфицирован при множественности заражения (МВД) не более 1 (1pfu к 1High Пять ячейки) Высшее МВД приводит к производству вирусных мутаций. Для белка, обычная сумма MO1 5-10. Пример: Титр mCD1d бакуловирус = 1X108 БОЕ / мл Добавить МВД = 1 (для усиления вирус) = 20x10 ^ 6 кл / колбу / 1x10 ^ 8 БОЕ / мл = 200 мкл / флакон МВД = 5 до 10 (для белка) = 1 мл на 2 мл Для 20x10 ^ 6 кл / колбу На 4-й день после заражения, посмотрите на инфицированные клетки. Они должны быть отделены, плавающие, опухание и формирования колбас. В. Восстановление Супернатанты Возьмите среду от инфицированных фляги, и трансфер в 250 мл синяя шапка Сокол прядильной бутылок. Они могут быть автоклавного и использовать повторно. Заполните бутылки равномерно и центрифуги клеток в Sorvall GSA ротора при 200rpm, 20 минут, 4 ° C. Сбор супернатант и приступить к дальнейшей очистки. VI. Очистка рекомбинантного mCD1d <ol><li> Диализ и концентрации в 150 мМ буфера фосфата натрия (рН 7,4) </li><li> По Ni-NTA агарозы хроматографии, элюции белка mCD1d + В2т с 150 мМ фосфат натрия +200 мм Immidazole </li><li> Выполнить Обессоливание колонки, используя 20 мМ Трис-HCl буфера PH8, чтобы избавиться от Immidazole </li><li> Выполнить хроматографии анионообменной использованием MonoQ колонки для устранения оставшихся загрязнений. </li><li> Концентрат для 1mg/ml использованием YM 30 концентратор (Millipore) </li><li> Бира ферментативных biotynlation из mCD1d согласно протоколу производителя (алчность) </li><li> Свободный биотин устраняется S200 колонке (Chromatograpy гель) с использованием фосфатным буферным раствором (PBS), pH7.4. Среднем от 2 до 3 мг в biotynlated белок может быть получен из 2 литра супернатант </li><li> Производство-Galcer CD1d тетрамер. </li></ol> Для того, чтобы загрузить CD1d молекулы с-Galcer, растворимые biotynlated CD1d-b2м инкубировали в течение ночи при комнатной температуре в три раза молярный избыток-Galcer, растворенного в 0,5% твина -20 в PBS, O.9% хлорида натрия. Тетрамеров образуются путем смешивания-Galcer загружены CD1d мономеров с 4-кратным молярным избытком PE - конъюгированная стрептавидином и инкубации в течение 4 часов при комнатной температуре. Хранить при температуре 48 ° C.

<ol><li>Benlagha, K., Weiss, A., Beavis, A., Teyton, L., Bendelac, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+identification+of+glycolipipd+antigen-specific+T+cells+using+fluorecent+CD1d+tetramers%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">In vivo identification of glycolipipd antigen-specific T cells using fluorecent CD1d tetramers.</a> J. Exp. Med. 191, 1895-1903 (2000).</li>
<li>Kinjo, Y., Wu, D., Kim, G., Xing, G. W., Poles, M. A., Ho, D. D., Tsuji, M., Kawahara, K., Wong, C. H., Kronenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recognition+of+bacterial+glycosphingolipids+by+natural+killer+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Recognition of bacterial glycosphingolipids by natural killer T cells.</a> Nature. 434, 520-525 (2005).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Binding+and+antigen+presentation+of+ceramide-containing+glycolipids+by+soluble+mouse+and+human+CD1d+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">Binding and antigen presentation of ceramide-containing glycolipids by soluble mouse and human CD1d molecules.</a> J. Exp. Med. 190, 1069-1080 (1999).</li>
<li>Porcelli, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CD1+family%3A+A+third+lineage+of+antigen-+presenting+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Immunol%22%5BJournal%5D)">The CD1 family: A third lineage of antigen- presenting molecules.</a> Adv. Immunol. 59, 1-98 (1995).</li>
<li>Sidobre, S., Kronemberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD1+tetramers%3A+A+powerful+tool+for+the+analysis+of+glycolipid-reactive+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">CD1 tetramers: A powerful tool for the analysis of glycolipid-reactive T cells.</a> J. Immunol. 169, 1340-1348 (2002).</li>
</ol>

В этой процедуре показано, как инициировать, растут, инфицировать клетки насекомых и как титр бакуловирус с помощью этих клеток. Наиболее важные аспекты этой процедуры не требуют технического обслуживания клеток и знать точное титр бакуловирус. После того как вы сформировали CD1 тетрамеров, они могут быть использованы в качестве мощного инструмента для анализа гликолипид реактивных Т-клеток. Baculovirus системы также широко используются для производства рекомбинантных белков, в том числе МНС класс II тетрамеров поэтому эта процедура имеет г...

<table><tbody><tr><td>Express Five SFM</td><td>Безсывороточная среда</td><td>Invitrogen</td><td>10486025</td><td></td></tr><tr><td>High Five TM</td><td>Клетки насекомых</td><td>Invitrogen</td><td>B855-02</td><td></td></tr><tr><td>Glutamine Pen strep</td><td>Антибиотики</td><td>Invitrogen</td><td>10378-016</td><td></td></tr><tr><td>Флакон для культивирования клеток 25cm2</td><td>Пластик</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-126-28</td><td></td></tr><tr><td>Флакон для культивирования клеток 175 cm2</td><td>Флакон с пробкой</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-126-8</td><td></td></tr><tr><td>Колба Эрленмейера</td><td>Колба для культивирования клеток</td><td>Fisher Scientific</td><td>07 200 672</td><td></td></tr><tr><td>Концентратор YM 30</td><td>30,000 MWCO</td><td>EMD Millipore</td><td>UFC 903096</td><td></td></tr><tr><td>Оборудование FPLC</td><td></td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Фермент BrA и буфер</td><td>Набор для биотинилирования</td><td>Avidity</td><td>BIRA500</td><td></td></tr><tr><td>Колонка с Ni-NTA агарозой</td><td>Колонка для очистки белков с His-тегом</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Обессоливающая колонка</td><td>Для удаления солей из белка</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Колонка MonoQ</td><td>Анионообменная хроматография</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Колонка S200</td><td>Эксклюзионная хроматография</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>alpha-Galcer</td><td>Гликолипид</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PE-Стрептавидин</td><td>Для конъюгации белков</td><td>Molecular Probes, Life Technologies</td><td>S-866</td><td></td></tr></tbody></table>

Способ получения рекомбинантного белка mcd1d в клетках насекомых.

A Method For Production of Recombinant mCD1d Protein in Insect Cells.

CD1 белки составляют третий класс антиген-представляющих молекул. Они поверхности клетки гликопротеинов, выраженное в примерно 50-кДа гликозилированного тяжелые цепи, которые нековалентно связанных с бета2-микроглобулина. Они связывают липиды, а не пептиды. Хотя их структура подтверждает сходство CD1 белков MHC класса I и класса II антиген представляющих молекул, mCD1d канавки относительно узких, глубоких, и высоко гидрофобными и имеет два обязательных карманы вместо нескольких мелких карманах описано для классической MHC- закодированный антиген-представляющих молекул. На основании их аминокислотных последовательностей, таких hydrobphobic канавка обеспечивает идеальную среду для связывания липидных антигенов. Естественных киллеров Т (НКТ) клетки используют их TCR признать гликолипиды обязаны или представленных CD1d. Т-клетки реагируют на липиды представленных CD1 были вовлечены в защиту от аутоиммунных и инфекционных заболеваний и в опухолевой отказа. Таким образом, способность идентифицировать, очистить и отслеживать реакцию CD1-реактивного ячейки NKT имеет большое значение. Поколение тетрамеров альфа галактозил церамида (-Galcer) с CD1d имеет значительно углубить понимание биологии клетки NKT. Тетрамеров построены из других CD1 молекул также был сформирован, и эти новые реагенты значительно расширили знания о функции липидов реактивных Т-клеток, с потенциалом использования в целях мониторинга ответ на основе липидов вакцин и диагностики аутоиммунных заболеваний и других лечения.

Метод подготовить клеток насекомых и заразить их бакуловирус для целей производства рекомбинантных proteinand mCD1d генерации mCD1d тетрамеров.

Способ получения рекомбинантного белка mCD1d в клетках насекомых.

Белки CD1 представляют собой третий класс антигенпрезентирующих молекул. Они являются гликопротеинами клеточной поверхности, экспрессируемыми в виде гликозилированных белков с массой примерно 50 кДа...

Здравствуйте, я Ашра Корона из лаборатории доктора Митча Кроненберга с кафедры иммунологии развития Института аллергии и иммунологии Ла-Хойи. Сегодня я покажу вам, как подготовить клетки насекомых High Five и инфицировать их VIR с целью получения тетрамеров MA CD 1D. Тетрамеры CD 1D используются в нашей и других лабораториях для распознавания NKT-клеток.Системы VIR широко используются для получения рекомбинантных белков, включая MS C класс два TE треморы. Таким образом, демонстрируемая процедура имеет гораздо более широкую область применения. Данная процедура включает инициирование и наращивание культуры клеток насекомых High Five, инфицирование клеток реовирусом, несущим кДНК CD 1D, сбор супернатанта путем центрифугирования через четыре дня после инфицирования, лизис и определение концентрации белка в 150 мМ натрий-фосфатном буфере, pH 7.4, очистку белка мышиного CD 1D с помощью никелевых Ni-NTA-агарозы и ионообменного метода, концентрирование белка мышиного CD 1D до 1 мг/мл с использованием концентратора YM 30, где проводится ферментативное расщепление мышиного CD 1D по протоколу AVID D, и удаление свободного биотина с помощью колонки S 200.И, наконец, получение альфа-геля CD 1D Tet. Хотя вся процедура включает в себя все эти этапы, сегодня мы покажем вам только то, как работать с этими клетками и заражать их вирусом с целью генерации большего количества CD 1D треморов. Приступим.Прежде всего я хотел бы показать вам работу с клетками насекомых High Five; клеточная линия High Five была получена из клеток яичников капустной совки. Они используются в данном протоколе, так как растут в бессывороточной среде, адаптированы к суспензионному культивированию и обеспечивают высокий уровень продукции рекомбинантного белка при использовании 5 мл среды Insect Express Medium в культуральных флаконах T-25. Обратите внимание, что среда Express Five поставляется без глутамина.Таким образом, необходимо добавить 10 ml 100-кратного раствора глутамина (glutamine pen strip) или только глутамина в один литр среды. Теперь я возьму замороженную пробирку с клетками насекомых High Five, разморожу ее на водяной бане при 37 °C, затем незамедлительно перенесу клетки High Five в колбу и инкубирую в течение 30 минут в инкубаторе при 27 °C. После этого осторожно аспирируют среду, чтобы удалить среду с DMSO, не потревожив клетки, прикрепившиеся к дну колбы.Теперь после размораживания необходимо добавить в колбу 5 ml свежей среды. Далее следует экспансия клеток перед инфицированием вирусом. Контролируйте состояние клеток ежедневно до достижения примерно 70% конфлюэнтности. Приведите клетки в состояние суспензии, аккуратно постукивая по обеим сторонам колбы.Перенесите клетки в квадратный флакон объемом 75 см², добавив 25 мл среды Insect Express и 5 мл клеточной культуры из флакона для расщепления. Используйте соотношение от 1:4 до 1:5 по мере необходимости. Не допускайте избыточного роста клеток; учитывайте количество пассажей, в которых проводилось расщепление клеток.Не превышайте 30-й пассаж, так как это может привести к старению клеток и их последующему лизису. Рассев клеток необходимо проводить через день. При рассеве используйте соотношение один к пяти.Когда будет достигнут необходимый объем при концентрации 1 миллион клеток на мл, проведите инфицирование клеток. Обычно я выращиваю до двух литров культуры, что соответствует либо семи-восьми колбам T 75 см, по примерно 25 мл в каждой, либо четырем колбам Erlenmeyer объемом 1 л, по примерно 500 мл в каждой. Выращивание клеток в колбах Erlenmeyer происходит гораздо быстрее. В колбу наливают 100 мл культуры и 400 мл среды Express SFM, после чего их культивируют в шейкере при 125 RPM и температуре 27 °C до достижения концентрации 1 миллион клеток на мл и нужного общего объема перед инфицированием. Теперь я продемонстрирую вам, как титровать вирус белло, и мы приступим к этому далее. Для титрования вируса посейте от 3000 до 5 000 клеток на лунку.Рассейте клетки в лунку 96-луночного планшета с плоским дном в 200 µL среды Insect Express Five SFM. Дайте клеткам осесть при 27 °C в течение не менее 30 минут. Приготовьте серийные разведения стокового раствора вируса.Необходимо выполнить последовательное разведение в одном ряду 96-луночного планшета, используя по 250 µL на лунку. Разведения проводят в среде express five SFM.С помощью многоканального дозатора перенесите фиксированный объем (обычно 20 µL) различных разведений в культуральную среду с клетками и поместите в инкубатор при 27 °C на семь дней, чтобы избежать испарения из крайних рядов. Через семь дней оберните края планшета пленкой. Проанализируйте планшет и определите, какое разведение вируса дает 50% инфицирование.Затем с помощью формулы рассчитайте титр, который выражается в PFU на мл. Формула приведена в большинстве руководств по работе с вирусами. После титрования вируса, для инфицирования клеток с целью продукции белка, множественность заражения должна составлять от 5 до 10.Например, если титр мышиного вируса бело (Belo virus) CD 1D составляет сто миллионов бляшкообразующих единиц на мл, а в колбе находится 20 миллионов клеток, для инфицирования клеток необходимо добавить от 1 мл до 2 мл вируса бело. Инфицирование клеток должно продолжаться четыре дня. На четвертый день после заражения клетки должны открепиться, стать плавающими, набухшими и принять форму, напоминающую сосиски.Теперь пришло время собрать супернатант. Перенесите среду из флакона с инфицированными клетками в центрифужные бутылки Falcon объемом 250 мл с синими крышками. Их можно автоклавировать и использовать повторно.Равномерно наполните флаконы и центрифугируйте клетки в роторе GSA при 2000 RPM в течение 20 минут при температуре 4 °C. Соберите супернатант и приступайте к дальнейшей очистке. Я только что продемонстрировал вам, как инициировать культуру, выращивать и инфицировать насекомых клетки High Five, а также определять титр бакуловируса.При использовании этих клеток наиболее важными аспектами данной процедуры являются способы содержания клеток и определения точного титра вируса. После получения CD1d-тетрамеров их можно использовать в качестве мощного инструмента для анализа Т-клеток, реагирующих на гликолипиды. Данная процедура по работе с бакуловирусом и определению его титра может быть применена и для многих других рекомбинантных белков.На этом все. Спасибо за просмотр и удачи в ваших экспериментах.

a-method-for-production-of-recombinant-mcd1d-protein-in-insect-cells

Research

JoVE Journal

Biology

Биология

В пост-человеческой эры геномики, наличие рекомбинантных белков в родной конформации имеет решающее значение для структурных, функциональных и терапевтических исследований и разработок. Здесь мы описываем испытаний и масштабные экспрессии белков системы человеческих эмбриональных почек 293T клетки, которые могут быть использованы для производства различных рекомбинантных белков.

Удобный и общее выражение платформы для производства секретируемых белков из клеток человека

Белковые комплексы катализируют ключевые клеточные функции. Подробные функциональные и структурные характеристики многих важных комплексов требует рекомбинантного производства. MultiBac является бакуловирус / клетка насекомого разработана специально для выражения эукариотических белков и их комплексов. MultiBac был реализован как открытая платформа доступа, и стандартных оперативных процедур разработаны для максимального использования ее полезности.

MultiBac белкового комплекса добывающей платформы на EMBL

Здесь мы используем ретровирусной трансдукции и concatemeric трансфекции создать клеточную линию, которая может выразить компоненты лентивирусов вектор (LV) в отсутствие тетрациклина. Этот LV кодирующий GFP и pseudotyped с гликопротеином, SVGmu, которая является специфической для рецептором на дендритных клеток.

Тетрациклин-регулируемой клеточная линия продуцирует высоким титром лентивирусных векторов, которые специально направлены дендритных клеток

Kindlins имеют основополагающее значение для клеточной адгезии через интегринам но исследования них были затруднены трудности встречаются в выражении их рекомбинантно в бактериальных хозяевах. Мы описываем здесь методы их эффективного производства в бакуловирусом-инфицированных клетках насекомых.

Эффективное производство и очистка рекомбинантного мышиного Kindlin-3 от клетках насекомых биофизической исследований

В этом исследовании сравнивалась экспрессия целевого человеческого рекомбинантного белка на различных производственных платформах. Мы сосредоточились на традиционных культурах на основе ферментеров и на растениях, описав настройку каждой системы и выделив на основе полученных результатов ограничения и преимущества, присущие каждой платформе.

Сравнительный анализ рекомбинантного белка слова в разных биофабрик: бактерии, клетках насекомых и растительных систем

Nonlytic системы экспрессии клеток насекомых недостаточно для производства, торговли сотовой / локализации, а также рекомбинантного белка функционального анализа. Здесь мы описываем методы для генерации векторов экспрессии и последующей кратковременной экспрессию белка в коммерчески доступных чешуекрылых клеточных линиях. Совместно локализация Bemisia tabaci аквапоринов с субклеточных флуоресцирующих белков - маркеров также представлены.

Кратковременная экспрессия и клеточная локализация рекомбинантных белков в культивируемых клетках насекомых

Мы сообщать, с использованием искусственного intronic малых РНК выражение стратегию для разработки не дефектных рекомбинантной Aedes aegypti densovirus (AaeDV) в естественных условиях системы доставки. Описывается подробная процедура для строительства, упаковки и количественный анализ векторов rAaeDV, а также что касается личиночной инфекции.

Использование рекомбинантных комаров Densovirus как вектор доставки генов для функционального анализа генов в личинки комаров

Этот протокол описывает тепла шок индуцированного белка выражение (система pDHsp/V5-его/sf9 клеток), который может использоваться для выражения инородные белки или оценке анти apoptotic деятельность потенциальных иностранных белков и их усеченного аминокислот кислоты в клетках насекомых.

Переходных выражение иностранных генов в клетках насекомых (sf9) для функциональных Assay протеина

Здесь мы представляем протокол производить дом летать carboxylesterase белков в пробирке с системой выражение насекомых клеток бакуловирусы опосредованной и позднее функционально характеризуют их роли в метаболизм перметрин, таким образом, присвоение пиретроиды сопротивление путем проведения на основе клеток МТТ пробирного и в пробирке метаболических исследований.

Функциональная характеристика Carboxylesterases в стойкие инсектициды дома мух, Муха Domestica

Здесь мы представляем протоколы для использования насекомых клеток и бакуловирусы системе выражения протеина для производства большого количества белков растений выделяется для кристаллизации белка. Вектор выражения бакуловирусы был изменен с GP67 или насекомое hemolin пептид сигнала для растений секрецию белков в клетках насекомых.

Изменение бакуловирусы векторы выражения производить выделяется растительных белков в клетках насекомых

Векторная система экспрессии бакуловируса (BEVS) является надежной платформой для скрининга экспрессии и производства белковых аргининметилтрансфераз (PRMT), которые будут использоваться для биохимических, биофизических и структурных исследований. Миллиграммовые количества материала могут быть получены для большинства PRMT и других белков, представляющих интерес, требующих платформы эукариотической экспрессии.

Производство рекомбинантных белков PRMT с использованием векторной системы экспрессии бакуловируса

Узнайте метод получения рекомбинантного белка mCD1d в клетках насекомых с помощью бакуловирусной инфекции. Этот подход позволяет генерировать тетрамеры для исследования NKT-клеток в иммунологии.

Способ получения рекомбинантного белка mCD1d в клетках насекомых.

Больше видео