Кавернозных нерва стимуляции и запись интракавернозные давления в крыса

Общие цели этого метода заключаются в описании упрощенной хирургической техники канюляции голени полового члена для регистрации внутрикавернозного давления, а также диссекции и изоляции кавернозного нерва для электростимуляции. Этот экспериментальный протокол может быть использован для изучения патофизиологии эректильной дисфункции и тестирования новых методов лечения. Основное преимущество этой методики заключается в том, что она воспроизводима, быстра и надежна.

В нем рассмотрены и устранены основные подводные камни, описанные в этом руководстве. Хотя этот метод может дать представление об эректильной дисфункции, изоляция комплекса нервных электродов с биосовместимым силиконовым клеем применима для электростимуляции любого периферического нерва, позволяя проводить физиологическое тестирование других органов. Чтобы начать эту процедуру, после обезболивания животного побрейте нижнюю половину его живота и промежность.

Потрите животное 70%-ным спиртом и повидон-йодом три раза поочередно. После этого поместите крысу на подогретую хирургическую прокладку в лежачем положении. Нанесите мазь на глаза и держите крысу под наркозом через носовой конус с 2,5% изофлураном.

Затем проведите всю хирургическую процедуру под операционным микроскопом на простыне. Затем сделайте разрез кожи в один сантиметр на пять миллилитров латеральнее средней линии, начиная с уровня основания пениса и продолжая вниз. С помощью ватной палочки осторожно отделите фасцию, расположенную латерально к мошонке.

После рассечения фасции с помощью пары ретракторов оттяните края кожи и яичка и определите местоположение седалищного бугра с помощью пальпации тампоном с ватным наконечником. Рассекайте жировую ткань медиально до тех пор, пока не станет видна седалищная мышца. С помощью щипцов разделите мышцу в продольном направлении и обнажите белочную оболочку.

Белочная оболочка будет выглядеть как ярко-белая структура. После калибровки настроек системы вставьте трубку через кожу промежности, следя за тем, чтобы она шла параллельно голени полового члена. Затем оставьте линию на месте и держите разрез влажным с помощью физраствора.

При этой процедуре сделайте разрез живота на два сантиметра ниже средней линии через кожу. Сделайте соответствующий разрез через фасцию по белой линии, чтобы обнажить мочевой пузырь и простату. Используйте втягивающие устройства для достижения хорошей экспозиции.

Затем с помощью тампонов с ватным наконечником отделите простату от жировой ткани. Отрегулируйте ретракторы и завершите диссекцию до получения четкой визуализации MPG и CNG, проходящих на дорсальной латеральной стороне простаты. После определения местоположения МПГ и КН осторожно разрежьте фасцию, расположенную над нервом на расстоянии от двух до пяти миллиметров дистальнее МПГ.

Затем распределите ткань по каждой стороне нерва и под ним, чтобы освободить участок длиной четыре миллиметра, а затем наложите шов под нерв. Слегка приподнимите нерв с помощью шва, чтобы облегчить размещение крючков биполярного электрода вокруг нерва. Дайте помощнику смешать двухкомпонентный силиконовый клей с кончиком инсулиновой иглы в течение пяти секунд.

Высушите нерв и нанесите клей на область вокруг крючков и нерва. Держите нерв в приподнятом положении, слегка потянув за электрод примерно на одну минуту, чтобы клей высох. После этого снимите втягивающие устройства, за исключением втягивающих устройств с правой стороны, чтобы избежать вытягивания или скручивания электрода.

Впоследствии смочите обнаженные органы физиологическим раствором и положите на разрез марлю, смоченную в физрастворе. В этой процедуре восстанавливают визуализацию белочной оболочки с помощью ретракторов. Следите за тем, чтобы не прикреплять ретракторы к седалищной мышце, так как это приведет к деформации голени.

Далее прикрепите иглу к трубке PE50 и промойте трубку гепаринизированным физиологическим раствором перед введением ее в белочную оболочку. Держите белочную оболочку натянутой и удерживайте вышележащую мышцу дистальнее до места введения доминирующей рукой. Затем возьмите иглу в недоминантную руку и введите ее в пещеристое тело.

Промойте леску, чтобы подтвердить правильное размещение в пещеристых телах без утечки. Введение иглы в кавернозное тело для регистрации давления является критически важным этапом. При развертывании иглы в голень важно, чтобы голень был растянут и игла развернута параллельно его ходу.

Промойте трубки и нажмите на горлышко, чтобы проверить линию. Убедитесь в отсутствии утечек. После этого закрепите трубку к столу с помощью скотча, чтобы предотвратить случайное натягивание лески.

Затем снимите втягивающие устройства. Установите параметры на стимуляторе и применяйте стимуляцию в течение 50 секунд с минимум одной минутой отдыха между стимуляциями. На этом рисунке показано снижение первой реакции при стимуляции 50 миллиметрами ртутного столба, за которой следует вторая и третья стимуляция 66 миллиметров ртутного столба.

Затем последующие измерения были зафиксированы на нормальном уровне при 73 миллиметрах ртутного столба. Здесь показана стабильность результатов при использовании этого протокола с 10 последовательными стимуляциями при давлении от 75 до 78 миллиметров ртутного столба. На этом рисунке показаны эффективные дозы анестезии при внутрикавернозном давлении.

Наблюдалось снижение и более флуктуирующий ответ на повышение уровня изофлурана по сравнению со стабильным ответом на 2% в первых двух и последних трех стимуляциях. Синий след сверху показывает постоянное основное артериальное давление. На этом рисунке показано влияние типа анестезии на внутрикавернозное давление.

Первоначальные стимуляции, проведенные под анестезией изофлураном, показали повышение давления на 80 миллиметров ртутного столба. После введения фентанилмидазолама наблюдалось увеличение реакции на 110 миллиметров ртутного столба. На этом рисунке показан эффект введения кислорода через носовой обтекатель.

Прекращение подачи кислорода через носовой конус привело к значительному снижению кавернозного повышения давления при стимуляции кавернозного нерва. Влияния на основное артериальное давление не отмечено. После освоения и при правильном выполнении эта процедура может быть завершена за 30 минут.

При проведении стимуляции важно помнить, что как тип, так и уровень анестезии и оксигенации оказывают значительное влияние на внутрикавернозное давление. После этой процедуры различные агенты могут быть протестированы, чтобы ответить на вопросы, связанные с патофизиологией эректильной дисфункции и внедрением новых методов лечения. После просмотра этого видео у вас должно сложиться полное представление о том, как проводить стимуляцию канюльного нерва, включая изоляцию нервного электрокомплекса с помощью герметизирующего клея и регистрацию внутрикавернозного давления после минимально инвазивной диссекции и канюляции кавернозных частей.