Новый метод для стимулирования депрессии подобное поведение у крыс

Общая цель этой модели состоит в том, чтобы установить заражение депрессией у крыс. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в поведенческой области, такие как механизм действия, профилактика, сдерживание и лечение заразной депрессии. Главное преимущество данной методики заключается в том, что это новая модель установления заразной депрессии.

Применение этого метода распространяется и на терапию депрессии, потому что на данный момент не существует формата изучения инфекционной депрессии. Для экспериментальной процедуры были отобраны самцы крыс Sprague Dawley без явной патологии весом от 300 до 350 граммов каждый. Содержите по три крысы в клетке с кормом и водой, доступной в неограниченном количестве.

Дайте минимум две недели на адаптацию в течение 12-часового цикла света и темноты. Перед началом эксперимента протестируйте всех крыс на наличие депрессивного поведения, используя трехдневный тест на предпочтение сахарозы. Для этого поместите крыс в индивидуальные клетки в одном помещении с жильем на время темного цикла.

Поместите флакон со 100 миллилитрами 1%-ного раствора сахарозы в каждую клетку на 24 часа и дайте время адаптации. Через 24 часа уберите бутылочки и лишите крыс пищи и воды на 12 часов. Через 12 часов поместите две бутылки, одну из которых 100 миллилитров 1%-ного раствора сахарозы, а другую 100 миллилитров водопроводной воды в каждую клетку на четыре часа.

Через четыре часа запишите объем в миллилитрах о потребленном растворе сахарозы и воде и рассчитайте сродство к предпочтению сахарозы, как показано на рисунке. Исключите крыс с положительным результатом теста на депрессию, затем устраните крыс, которые содержались в тех же клетках, что и крысы с депрессией. При необходимости исключите дополнительных крыс случайным образом, чтобы создать итоговые группы.

Пометьте крыс с помощью пронумерованных наклеек. Чтобы вызвать депрессию, подвергните 60 крыс в группе хронического непредсказуемого стресса воздействию любых двух из следующих семи стрессоров. В случайном порядке в течение пяти недель подряд используйте один стрессор днем, а другой ночью.

Размещайте крыс в больших группах, размещая шесть крыс вместо обычных трех в клетке на 18 часов. Поместите крыс в клетку, наклоненную на 45 градусов по вертикальной оси, на три часа. Пищи лишают крыс на 18 часов.

Лишайте крыс воды в течение 18 часов, подвергая их воздействию пустых бутылок с водой через час. Поместите крыс в клетку с влажной подстилкой на восемь часов во время ночного цикла. Подвергайте крыс постоянному освещению в течение 24 часов в обратном цикле свет-темнота два раза в неделю.

Поместите крыс в жаркую среду при температуре 40 градусов Цельсия на пять минут во время ночного цикла. После воздействия двух выбранных стрессоров подтвердите развитие депрессии, выполнив тест на предпочтение сахарозы. Во-первых, поместите двух крыс, подвергшихся воздействию КАС, в каждую клетку в 30 разных клетках.

Затем добавьте по одной крысе из группы заражения депрессией в каждую клетку, содержащую двух крыс, подвергшихся воздействию CUS, и позвольте им сожительствовать в течение пяти недель в стандартных условиях. После пяти недель совместного проживания подвергните все группы тестам на предпочтение сахарозы, открытому полю и принудительному плаванию. Очистите аппарат 5%-ным спиртом перед введением каждого животного.

Поставьте крысу в угол открытого поля лицом к стене. Записывайте поведение крысы с помощью видеокамеры в течение пяти минут. Анализируйте записи постов об общем расстоянии перемещения, скорости в центральной части поля и времени, проведенном в центральной части поля.

Чтобы привыкнуть, поместите крысу в стеклянный цилиндр с водой комнатной температуры на 15-минутный сеанс плавания. Снимите крысу с цилиндра, обсушите бумажными полотенцами и поместите в теплую клетку на 15 минут до возвращения крысы в домашнюю клетку. На следующий день запишите на видео пятиминутный сеанс плавания и проанализируйте записи на предмет неподвижности, лазания и дефекации.

После пятинедельного воздействия КУС на крыс для индукции депрессии, а затем последующего воздействия на здоровых крыс крыс, подвергшихся воздействию КУС в течение следующих пяти недель, обе группы крыс в конце проявили депрессивное поведение, о чем свидетельствует снижение предпочтения сахарозы. В открытом поле у крыс в группах, подвергшихся воздействию CUS, и в группах заражения депрессией уменьшилось общее расстояние перемещения и снизилась средняя скорость по сравнению с контрольной группой. Время, проведенное в центре открытого поля крысами из контрольной группы в двух опытных группах, существенно не отличалось.

Крысы, подвергшиеся воздействию CUS, и крысы с инфекцией депрессии показали длительную неподвижность после теста с принудительным плаванием. Однако значительно увеличенное время бездействия было зарегистрировано только в группе с КУС по сравнению с контрольной группой. В другом исследованном параметре теста на принудительное плавание, времени лазания, обе группы крыс, подвергшихся воздействию CUS и крыс с депрессией заражения, продемонстрировали крайне ограниченные способности к лазанию по сравнению с контрольной группой.

Оценка скорости дефекации привела к регистрации большого количества кала в обеих опытных группах по сравнению с контролем. Пытаясь выполнить эту процедуру, важно помнить о том, что нужно заранее планировать случайную ротацию стрессоров во время модели хронического непредсказуемого стресса из-за высокой потребности в ручном труде. После этой процедуры могут быть проведены другие тесты, такие как лабиринт с повышением плюс или зеркальный тест, чтобы дополнительно исследовать поведенческие изменения после депрессии.